国家自然科学基金(81073031)
- 作品数：22 被引量：162H指数：7
- 相关作者：代龙高鹏王升光宋晓光刘玉军更多>>
- 相关机构：山东中医药大学安徽生物肽产业研究院有限公司山东中医药大学附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 水蛭活性肽的纯化工艺被引量：7
- 2017年
- 目的:对水蛭活性肽进行纯化,并对水蛭活性肽进行树脂纯化条件考察。方法:采用DA201-C大孔吸附树脂进行极性分离,后经D201阴离子交换树脂进行电荷分离,最终得到纯化的水蛭活性肽组分。结果:DA201-C大孔树脂,上样肽浓度20 mg·m L-1,流速1.0 BV·h-1,依次用25%乙醇、50%乙醇和75%乙醇溶液洗脱,各洗脱部位得率及活力较高,但总体活性成分被分散,以上各洗脱部位经D201离子交换树脂,pH 4.0,上样肽浓度30 mg·m L-1,流速3.0 BV·h-1,分别用2.5%氯化钠的25%乙醇、2.5%氯化钠的50%乙醇、2.5%氯化钠的75%乙醇溶液洗脱,2.5%氯化钠的25%乙醇和2.5%氯化钠的50%乙醇洗脱部位有明显的抗凝活性,经过分析性RP-HPLC验证后,基线平稳,各组分分离度良好。结论:经DA201-C大孔树脂和D201离子交换树脂纯化后的水蛭活性肽,2.5%氯化钠的25%乙醇和2.5%氯化钠的50%乙醇洗脱部位活力较高,分离度好。
- 宋晓光李秉润王少平王升光于帅刘庆丰于海涛刘国飞张继娟高鹏代龙
- 关键词：水蛭纯化大孔树脂HPLC
- 肽的分离纯化研究进展被引量：2
- 2012年
- 对近5年来具有代表性的不同分子量肽的分离纯化文献进行综述,并总结出肽分离纯化的一般技术路线,为肽的分离纯化研究提供参考。
- 刘玉军魏永利代龙
- 关键词：分离纯化超滤
- 天龙抗肿瘤小分子肽纯化工艺
- 2011年
- 目的:纯化天龙酶解液,制备小分子肽。方法:用石蜡萃取法除油脂,用Sephadex G-15除氨基酸和盐。结果:天龙酶解液中加入药材质量分数40%的石蜡,加热使完全融化,搅拌,冷藏(6℃)静置4 h,弃去石蜡,水液以每2 mL加于Sephadex G-15柱(1.6 cm×64 cm)上,用去离子水2 mL.min-1洗脱,收集第60～84 mL洗脱液。结论:所筛选的纯化工艺简便可行。
- 刘玉军代龙魏永利马睿马大龙
- 关键词：天龙纯化
- 天龙抗肿瘤研究进展被引量：17
- 2011年
- 介绍天龙的基原及性状,对近10年来天龙抗肿瘤的活性成分、药理机制及临床应用研究报道进行介绍,并指出存在的问题和今后的研究方向,为天龙在今后抗肿瘤方面的应用和研究提供参考和依据。
- 刘玉军李刚马睿代龙
- 关键词：天龙抗肿瘤活性寡肽
- 土鳖虫活性肽组分对急性血瘀模型大鼠血液流变学、血脂四项指标及血液因子含量的影响被引量：34
- 2020年
- 用胃蛋白酶和胰蛋白酶复合酶系对土鳖虫药材进行仿生酶解,产物经除盐、超滤、纳滤、DA201-C型大孔吸附树脂、葡聚糖凝胶G-25层析、反相高效液相色谱以及半制备液相色谱分离纯化,获得纤溶活力最强的土鳖虫活性肽组分。并研究其对急性血瘀模型大鼠的血液流变学指标、血脂四项指标和血清内一氧化氮(NO)、超氧化歧化酶(SOD)、组织性纤溶酶原激活物(t-PA)和纤维蛋白(FIB)含量等的影响。结果表明:土鳖虫活性肽组分F2能显著降低血液黏度、红细胞压积、血小板计数(P<0.05);与模型组相比,土鳖虫活性肽组分F2能显著降低大鼠血液内甘油三脂(TG)、胆固醇(T-CHO)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的含量(P<0.05);大鼠血液中NO、SOD、t-PA含量较模型组明显升高,血清内FIB含量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。土鳖虫经仿生酶解、分离纯化后制备的土鳖虫活性肽组分F2具有改善急性血瘀模型大鼠血液流变学指标,降低血脂四项指标和改变血液因子含量的作用。
- 姜珊姜珊代龙张加余高鹏高鹏王喻淇
- 关键词：急性血瘀模型血液流变学血脂
- 茯苓桂枝药对对慢性心力衰竭模型大鼠心肌组织血管紧张素Ⅱ受体1及血清炎症因子的影响被引量：21
- 2020年
- 目的探讨茯苓-桂枝药对对慢性心力衰竭大鼠心肌组织的影响及可能作用机制。方法60只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、卡托普利组及茯苓桂枝高、中、低剂量组,每组10只。除假手术组外,其余各组采用腹主动脉缩窄的方法制备慢性心力衰竭大鼠模型。造模成功后假手术组与模型组给予2ml/kg蒸馏水灌胃,茯苓桂枝高剂量组给予茯苓2.16g/(kg·d)、桂枝1.62g/(kg·d)灌胃,茯苓桂枝中剂量组给予茯苓1.08g/(kg·d)、桂枝0.81g/(kg·d)灌胃,茯苓桂枝低剂量组给予茯苓0.54g/(kg·d)、桂枝0.41g/(kg·d)灌胃,卡托普利组给予卡托普利混悬溶液6.3mg/(kg·d)灌胃,均每日1次,共4周。比较各组大鼠收缩压、心脏质量指数(HMI),检测血清中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、内皮素1(ET-1)含量,HE染色观察心肌组织病理改变,检测心肌组织血管紧张素Ⅱ受体1(AT1)含量。结果与假手术组比较,模型组大鼠HMI、收缩压、心肌组织AT1及血清AngⅡ、ET-1、TNF-α、IL-1β水平升高(P<0.01),病理显示心肌细胞束的间隙稍增宽,心肌纤维排列紊乱、变粗肥大。与模型组比较,卡托普利组及茯苓桂枝中、高剂量组大鼠HMI、收缩压、心肌组织AT1及血清AngⅡ、ET-1、TNF-α、IL-1β水平降低(P<0.05或P<0.01);茯苓桂枝高剂量组与卡托普利组病理显示心肌组织炎症细胞减少,细胞形态较清晰,心肌纤维化程度低。与卡托普利组比较,茯苓桂枝高剂量组各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论茯苓-桂枝药对可以调节慢性心力衰竭大鼠血压,抑制心肌肥厚与心室重构,改善大鼠心肌纤维化,可能与控制炎症反应、抑制神经内分泌过度激活有关,且以高剂量效果最佳。
- 王文琪崔磊张馨方杨光孙明江
- 关键词：茯苓桂枝慢性心力衰竭心肌纤维化炎症因子
- 宽体金线蛭有效成分分子量分布和纯化工艺考察被引量：2
- 2017年
- 目的:采用不同方法对宽体金线蛭活性溶液进行不同分子量的含量测定和物质分离,获得最优条件。方法:采用不同分子通透性的透析膜对宽体金线蛭活性溶液进行分子量的含量测定。再分别采用大孔树脂、Q Sepharose FF、SP Sepharose FF对宽体金线蛭活性溶液进行纯化。通过考察不同纯化条件以达到分离有效物质的目的,并结合体外抗凝实验对最佳组分进行活性检测。结果:分别采用500 Da、1000 Da、3000 Da的透析膜对活性溶液进行分子量含量测定,得出<500 Da的物质占37.6%;500 Da^1000 Da的物质占到18.5%;1000 Da^3000 Da的物质占28.1%;>3000 Da物质占到15.7%。采用大孔树脂DA201-C处理得出50%乙醇洗脱液具有很好的活性。再采用Q Sepharose FF、SP Sepharose FF分别对宽体金线蛭活性溶液进行处理,采用不同洗脱剂进行洗脱然后进行活性验证得出1.0%Na Cl的p H值=8.5的Tris缓冲溶液洗脱组分活性比较强。结论:采用不同方法对宽体金线蛭活性溶液进行研究,获得较纯的活性组分,为后期的继续研究做好基础。
- 王少平孟莹李亚男宋晓光李秉润于帅刘庆丰王升光于盈盈刘国飞高鹏代龙杨培民
- 关键词：纯化分子量活性宽体金线蛭
- 天龙仿生酶解制备小分子肽优选工艺被引量：10
- 2011年
- 目的:优选天龙仿生酶解工艺。方法:采用福林酚比色法测定样品中小分子肽的含量,并以此为指标,分别对胃蛋白酶和胰蛋白酶的加酶量及酶解时间进行考察。结果:加5倍量去离子水,加热至沸腾,放至室温,用稀盐酸调pH 2.0,加入药材质量2.0%的胃蛋白酶,37℃保温振荡2.0 h,用10%氢氧化钠溶液调pH 8.0,加入药材质量2.0%的胰蛋白酶,50℃保温振荡4.0 h,放至室温,离心(5 000 r.min-1×5 min),分离上清液,微滤(0.22μm),超滤,收集相对分子质量<3 000的滤液。结论:所优选的仿生酶解工艺稳定。
- 刘玉军代龙魏永利
- 关键词：天龙小分子肽
- 活性炭对水蛭酶解液脱腥脱色试验研究被引量：4
- 2017年
- 目的:采用活性炭方法对水蛭多肽提取液进行脱腥脱色处理,最终得出最佳脱腥脱色方法。方法:分别采用粉末活性炭、颗粒活性炭及与白陶土的联合方法对水蛭酶解液进行脱腥脱色处理,确定最佳方法,并对最佳脱色脱腥方法进行分析,得出组合之间的具体参数。结果:通过实验得出,采用粉末活性炭与白陶土联合方法对水蛭酶解液进行脱腥脱色效果最佳,即水蛭酶解液p H为5.0,粉末活性炭加入量为1.0%,白陶土加入量为2.5%,活性炭脱色温度为60℃,反应时间40 min时,再加白陶土,先振荡40 min,后常温静置吸附60 min,在此条件下得到的水蛭酶解液基本无颜色、澄清,同时腥味感官评分可以达到4.0以上。结论:试验结果表示采用粉末活性炭与白陶土联合方法可以达到脱腥脱苦的目的,同时也提高了水蛭酶解液的品质,为水蛭酶解液以后的深度开发奠定了基础。
- 李秉润王少平宋晓光王升光刘元涛高鹏王广录刘国飞代龙
- 关键词：脱腥脱色
- 天龙核苷体外抗肿瘤作用的研究被引量：3
- 2012年
- 目的探讨天龙核苷的体外抗肿瘤作用。方法分别选用K562和A549细胞株,采用光镜检查细胞形态学变化,MTT法测定天龙核苷对两种细胞的体外抑制作用。结果光镜显示给药组细胞变圆变小,折光性下降,出现发泡现象,染色质浓缩致密并分裂成块,多数细胞形成凋亡小体;MTT实验结果表明,对核苷敏感的最低药物浓度分别为100μg/mL和50μg/mL,IC50分别为277μg/mL和298μg/mL。结论天龙核苷有一定的体外抑瘤作用,并有较好量效关系。
- 宋景赵启韬高鹏代龙
- 关键词：天龙核苷抗肿瘤MTT法
