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青岛市科技发展计划项目(13-1-3-69-nsh)
青岛市科技发展计划项目(13-1-3-69-nsh)
- 作品数:2 被引量:11H指数:2
- 相关作者:徐海峰储三军张敏曾繁星王敏更多>>
- 相关机构:山东省眼科研究所济南大学青岛大学更多>>
- 发文基金:青岛市科技发展计划项目山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- Bevacizumab对视网膜色素上皮细胞纤维化相关因子表达的影响被引量:7
- 2014年
- 目的观察Bevacizumab对人视网膜色素上皮细胞纤维化相关因子基因及蛋白表达的影响,探讨Bevacizumab在新生血管纤维化中的作用。方法用含终浓度0.25 g·L-1Bevacizumab的DMED/F12培养液培养ARPE-19细胞,按Bevacizumab处理的时间分为0 h、6 h、12 h、24 h和48 h共5组,0 h为对照组。不同时间点收集细胞及上清。用逆转录聚合酶链反应检测ARPE-19细胞中结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、转化生长因子-β2(transforming growth factorβ2,TGF-β2)和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)的mRNA相对表达量。采用ELISA检测上清中CTGF、bFGF和TGF-β2的蛋白浓度,应用免疫蛋白印迹法(Western blotting)检测MMP-2蛋白的表达。结果 Bevacizumab作用后6 h、12 h、24 h和48 h,CTGF、bFGF、TGF-β2及MMP-2的mRNA相对表达量分别为CTGF:1.694±0.160、1.994±0.221、1.733±0.057、1.397±0.075,bFGF:1.720±0.068、2.144±0.080、1.893±0.068、1.372±0.076,TGF-β2:1.356±0.070、1.737±0.515、1.576±0.098、1.439±0.050,MMP-2:1.414±0.115、1.644±0.094、1.435±0.075、1.285±0.024,与对照组相比均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。ELISA结果显示Bevacizumab作用后6 h、12 h、24 h和48 h,CTGF、bFGF、TGF-β2蛋白的表达量与对照组相比均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05);对照组及各时间组蛋白浓度分别为CTGF:(31.949±0.388)ng·L-1、(48.697±0.863)ng·L-1、(56.847±0.499)ng·L-1、(51.753±1.395)ng·L-1、(43.085±1.240)ng·L-1,bFGF:(26.660±1.360)ng·L-1、(46.529±3.297)ng·L-1、(55.883±1.705)ng·L-1、(47.937±1.303)ng·L-1、(36.894±2.532)ng·L-1,TGF-β2:(26.982±2.404)ng·L-1、(35.452±1.360)ng·L-1、(46.787±0.896)ng·L-1、(43.683±1.630)ng·L-1、(38.008±1.110)ng·L-1。Western blotting结果显示,Bevacizumb处理后6 h、12 h、24 h、48 h MMP-2蛋白含量升高,组间比较差异有统计学意义(F=2620.429,P=0.000)
- 张敏储三军曾繁星徐海峰
- 关键词:BEVACIZUMAB视网膜色素上皮细胞纤维化细胞因子
- 贝伐单抗对人脐静脉内皮细胞纤维化相关炎症因子表达的影响被引量:4
- 2015年
- 目的观察贝伐单抗对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)纤维化相关炎症因子表达的影响,以探讨贝伐单抗治疗后新生血管纤维化的可能机制。方法分别在正常氧含量及缺氧条件下培养HUVEC,培养液中加入终浓度为0.25g·L-1贝伐单抗,根据处理时间的不同分为0 h组(对照组)、6 h组、12 h组、24 h组、48 h组。分别用RT-PCR及ELISA方法检测各组纤维化相关炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-8以及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)mRNA和蛋白的表达。结果正常氧含量条件下,与对照组相比,IL-6、IL-8的mRNA和蛋白表达在各实验组均明显增加,而IL-1β、TNF-αmRNA和蛋白的表达仅在12 h、24 h、48 h组明显增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。缺氧条件下,与对照组相比各实验组IL-1β、IL-6、IL-8及TNF-α的mRNA和蛋白表达在各时间点均明显增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论无论在正常氧含量还是缺氧条件下,贝伐单抗均可刺激纤维化相关炎症因子的表达增加,此部分炎症因子可能参与了抗新生血管内皮生长因子治疗后的新生血管纤维化过程。
- 储三军王敏徐海峰
- 关键词:贝伐单抗血管纤维化炎症因子人脐静脉内皮细胞