山东省自然科学基金(Y2005D07)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：马万山葛汝村汪运山高辉逯素梅更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 应用基因表达谱芯片研究人胃癌细胞周期和细胞凋亡相关基因被引量：4
- 2007年
- 目的:筛选胃癌发生过程中与正常组织差异表达的细胞周期和细胞凋亡相关基因并作初步功能分析。方法:应用Trizol一步法抽提胃癌及正常组织总RNA,分离纯化mRNA并逆转录合成荧光分子(Cy3/Cy5)标记cDNA探针,与含有8464种cDNA基因的表达谱芯片杂交,分析胃癌与正常组织间差异表达的基因,对所获得的基因进行分子生物信息学分析。结果:胃癌与正常组织间差异表达的细胞周期和细胞凋亡基因有17条,占芯片基因总数的0.2%。其中与细胞周期相关的基因11条,与细胞凋亡相关的基因6条。在胃癌组织中表达量增加的10条,表达量下降的7条。生物信息学分析显示,该17条差异表达的细胞周期和细胞凋亡相关基因,与胃癌组织细胞的生长和凋亡有关。结论:胃癌的发生、发展过程中存在多基因表达调控的改变,细胞周期和细胞凋亡基因与胃癌组织细胞的生长和凋亡有相关性,对于该相关基因群的进一步研究有助于阐释胃癌的发病机制。
- 马万山葛汝村高辉汪运山
- 关键词：胃肿瘤基因表达细胞周期细胞凋亡
- 缺氧对人肝癌SMMC-7721细胞HIF-1α和DEC1表达影响及机制分析
- 2014年
- 目的:探讨缺氧对人肝癌SMMC-7721细胞中缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和分化型胚胎软骨发育基因1(differentiated embryo-chondrocyte expressed gene 1,DEC1)表达的影响,并分析其机制,为肝癌的缺氧调节提供理论依据。方法:以肝癌SMMC-7721细胞为实验材料,应用二氯化钴(CoCl2)建立体外缺氧模型,对SMMC-7721细胞进行不同时间的缺氧培养(0、2、4、6、24和48h)。RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测缺氧不同时相HIF-1α和DEC1mRNA及蛋白质的表达变化。HIF-1α和DEC1蛋白表达的相关性采用Pearson等级相关性分析。应用HIF-1α蛋白抑制剂YC-1对SMMC-7721细胞进行HIF-1α抑制培养,并设立缺氧对照组和常氧对照组,观察抑制HIF-1α对DEC1表达影响。结果:常氧培养时,肝癌细胞中HIF-1α和DEC1mRNA和蛋白表达明显高于肝细胞。随缺氧时间延长,HIF-1α蛋白、DEC1mRNA及DEC1蛋白表达均明显增加,F值分别为183.13、127.78及84.22,P值均<0.01;但HIF-1αmRNA表达无明显变化,F=0.960,P>0.05。其中HIF-1α蛋白、DEC1mRNA及DEC1蛋白均在缺氧4h达到高峰,相对表达量分别为1.183±0.063、2.182±0.234及0.839±0.051,与常氧对照组相比较,差异均有统计学意义,P值均<0.001。Pearson相关性分析结果显示,HIF-1α蛋白与DEC1蛋白表达呈高度正相关,r=0.826,P<0.05。YC-1抑制培养时,HIF-1α蛋白、DEC1mRNA及DEC1蛋白均较缺氧对照组明显降低,相对表达量分别为0.507±0.028、0.702±0.044及0.676±0.067,F值分别为428.12、730.24和371.69,P值均<0.01;但HIF-1αmRNA表达无明显变化,F=0.757,P>0.05。结论:干扰或抑制肝癌SMMC-7721细胞中HIF-1α蛋白的表达,能够降低缺氧诱导的DEC1高表达,为肝癌的缺氧调节和临床治疗提供理论依据。
- 马庆海石晓红逯素梅乌琳琳马万山
- 关键词：SMMC-7721细胞缺氧微环境印迹法
