国家重点基础研究发展计划(2011CB504900)
- 作品数：8 被引量：79H指数：5
- 相关作者：邵祝军朱兵清徐丽高源徐征更多>>
- 相关机构：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所河北省疾病预防控制中心武汉大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 血清杀菌试验和酶联免疫吸附试验测定C群脑膜炎奈瑟菌血清抗体滴度比较被引量：2
- 2012年
- 目的比较血清杀菌试验（SBA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）N定两种C群脑膜炎奈瑟菌（Nm）疫苗免疫后血清抗体滴度的差异。方法采用SBA测定75名未免疫健康成年人（40-70岁）血清、143名3-8月龄婴儿及194名3-5岁儿童NmA和C群结合疫苗或A＋C群多糖疫苗免疫前后血清中Nm杀菌抗体水平，然后用ELISA测定相应血清的Nm特异性IgG含量，并利用线性相关与回归分析两种测定结果的相关性。结果未免疫健康成年人血清中Nm杀菌抗体水平和特异性IgG含量之间的相关性较高（r=0．81433，P〈0．001）；3-8月龄婴儿和3-5岁儿童接种结合／多糖疫苗前，Nm杀菌抗体水平和特异性IgG含量之间相关性较差（3-8月龄：r=0．14064，P〉0．100／r=0．2899，P〈0．05；3-5岁：r=0．54040，P〈0．05／r=0．19436，P〈0．05），接种1剂结合疫苗后，杀菌抗体水平和特异性IgG含量之间的相关性较好（r=0．80938，P〈0．001和r=0．83723，P〈0．001）；接种多糖疫苗后，杀菌抗体水平和特异性IgG含量之间的相关性较差（r〈0．50000）。结论健康成年人血清和结合疫苗免疫后的婴幼儿血清中特异性C群NmIgG含量可以间接反映血清杀菌抗体水平，ELISA方法可以替代SBA。但ELISA检测方法不适用于3-8月龄婴儿多糖疫苗免疫后的效果评价。
- 朱兵清徐丽周海健邵祝军
- 关键词：C群脑膜炎奈瑟菌酶联免疫吸附试验
- 中国流行性脑脊髓膜炎流行变异趋势被引量：56
- 2013年
- 流行性脑脊髓膜炎（简称为流脑）,是由脑膜炎奈瑟菌（neisseria meningitidis）感染引起的以脑脊髓膜炎和菌血症为主的呼吸道传染病,严格意义上应称其为脑膜炎球菌病（meningococcal disease）.历史原因,我国疾病监测中一直沿用流脑作为病例定义.
- 邵祝军
- 关键词：流行性脑脊髓膜炎脑膜炎奈瑟菌呼吸道传染病脑膜炎球菌病疾病监测菌血症
- 2003—2012年中国部分地区脑膜炎奈瑟菌体外抗生素敏感性分析被引量：12
- 2015年
- 目的了解我国脑膜炎奈瑟菌对抗生素敏感性的变化趋势。方法对2003—2012年本研究室收集的脑膜炎奈瑟菌菌株,根据分离年份、血清群和来源(患者或健康携带者)选择487株,采用微量肉汤稀释法和E-test浓度梯度扩散法,对其进行体外12种抗生素敏感性检测和分析。结果所有菌株对头孢噻肟、头孢曲松、阿奇霉素、美洛培南、氯霉素和米诺环素均敏感;对青霉素和氨苄西林不敏感的菌株分别是4.9%(24/487)和3.5%(17/487),75.6%(368/487)的菌株对萘啶酸耐药,87.1%(424/487)对复方新诺明耐药,48.9%(238/487)对环丙沙星耐药。从2005年开始出现对环丙沙星耐药的菌株23.8%(24/101),从2006年开始出现对青霉素类药物不敏感菌株2.4%(2/82)。患者和健康携带者来源的菌株对萘啶酸、复方新诺明和环丙沙星3种药物显现不同的耐药率。结论我国流脑菌株对磺胺类和喹诺酮类药物具有较高的耐药性,对青霉素类药物不敏感的菌株也逐渐增多。这种耐药性与菌株分离年份、血清群和菌株来源具有相关性。
- 徐丽朱兵清徐征高源邵祝军
- 关键词：脑膜炎奈瑟菌药敏E-TEST
- C群和不可分群脑膜炎奈瑟菌对人喉癌上皮细胞黏附能力的研究
- 2012年
- 目的建立和优化脑膜炎奈瑟菌(Neisseria Meningitidis,Nm)对人喉癌上皮细胞(Human Larynx Carcinoma Epithelial Cell,HEp-2)的黏附实验方法,检测C群序列型(SequenceType,ST)4821序列群和不可分群(Nongroupable,NG)Nm对HEp-2黏附能力的差异性。方法以C群Nm疫苗株C11作为靶菌,选用HEp-2,选择不同的黏附时间和不同的感染复数(Multiplicity of Infection,MOI)确定Nm与HEp-2黏附作用的最适条件,对中国分离的26株C群ST-4821序列群和8株NG Nm菌株进行HEp-2黏附能力研究。结果 Nm与HEp-2黏附研究最适作用时间为4h,最适MOI为100～1000;各血清群参考菌株的黏附菌落数在1.46×105～1.63×106菌落形成单位/毫升(Colony Form ingUnit,CFU/ml);26株ST-4821序列群的C群Nm对HEp-2的黏附菌落数在1.33×105～9.53×106CFU/ml;8株NGNm的黏附菌落数在3.04×105～8.52×106CFU/ml。结论不同血清群Nm对HEp-2的黏附能力存在差异;同是ST-4821序列群的C群Nm对HEp-2的黏附能力存在差异;同是NG Nm对HEp-2的黏附能力存在差异。
- 杨郝亮秦天徐丽任红宇朱兵清邵祝军
- 关键词：脑膜炎奈瑟菌
- 中国不可分群脑膜炎奈瑟菌的分子分型分析被引量：9
- 2014年
- 目的了解我国血清不可分群(non-serogroupable,NG)脑膜炎奈瑟菌分子分型特征。方法选取我国2005-2011年分离的104株血清不可分群脑膜炎奈瑟菌作为研究对象,采用多位点序列分型(MLST)和聚合酶链反应(PCR)基因分群(A、B、C、W、E、X、Y、Z、H、I、L、K、cnl)方法,检测其ST序列群及基因群。结果 104株不可分群脑膜炎奈瑟菌中,基因群分布为荚膜基因缺失菌株(capsule null locus,cnl)(36株)、B群(20株)、C群(14株)、W群(9株)、E群(9株)、X群(3株)和Y群(3株),余下10株未鉴定出基因群;未发现其他基因群菌株。MLST分型将104株NG菌株分为45种ST型,其中14种为新的ST型;17种ST型可归为7个序列群(65株);cnl菌株全属于ST-198序列群,B群和C群菌株以ST-4821为优势序列群,W群以ST-11和ST-174序列群为主。结论我国NG脑膜炎奈瑟菌具有基因多态性,其中ST-198序列群全部为cnl菌株。
- 徐征朱兵清高源徐丽邵祝军
- 关键词：脑膜炎奈瑟菌多位点序列分型
- 细菌分离培养与实时荧光定量-聚合酶链反应用于健康人群脑膜炎奈瑟菌携带率研究被引量：7
- 2013年
- 目的了解河北省部分地区健康人群脑膜炎奈瑟菌(Nm)带菌状况,评价实时荧光定量-聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative Polymerase Chain Reaction,FQ-PCR)作为菌株分离培养法的补充在健康人群带菌调查中的应用价值。方法按年龄分层整群随机抽取577人采集咽拭子,采用Nm分离培养和FQ-PCR法同时检测,并使用血清学和分子生物学方法分群。结果分离到18株Nm菌株,总阳性率3.12%,其中不可分群最多(9株),其次为B群(3株)、W135群(3株)、X群(2株)、C群(1株)。FQ-PCR检测阳性样本46份,总阳性率7.97%,其中B群最多(13份),其次为W135群(12份)、不可分群(11份)、X群(7份)、C群(3份)。结论细菌培养和FQ-PCR均提示这些地区健康人群携带Nm血清群多样化。FQ-PCR检测方法在发现病原体及分群方面比传统菌株分离培养方法都有显著提升,可作为传统方法的有力补充。
- 王颖童孙印旗贾肇一何宝花姜霞朱兵清邵祝军
- 关键词：脑膜炎奈瑟菌携带率调查细菌培养
- 中国脑膜炎奈瑟菌nadA基因多态性分析被引量：5
- 2012年
- 目的了解我国脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitidis,Nm)主要黏附蛋白(Neisseria adhesion A,NadA)编码基因nadA的多态性特征,以期研究我国主要流行Nm菌株NadA蛋白的流行病学意义及NadA蛋白作为脑膜炎球菌蛋白疫苗候选蛋白研发的可行性。方法选取我国26个省(市、自治区)1963-2012年间不同血清群代表性Nm菌株230株,采用多位点序列分型(muliti-locus sequence typing,MLST)、PCR、斑点杂交、基因测序等方法,检测Nm菌株基因型特征、nadA基因分布的多态性及其基因序列特征,利用BioEdit、Mega 4.0等软件对nadA基因序列进行比对分析。结果我国230株不同血清群的Nm菌株中,nadA+菌株55株,仅存在于ST-5 complex(序列群)的A群和ST-11 complex的W135群Nm菌株中,B、C及其他血清群Nm菌株nadA-。nadA+菌株基因型以variant 3(V3)型为主(54/55),包括5种亚型(NadA V3.1～3.5),同源性高达99%以上。结论我国Nm菌株中,仅ST-5complex的A群和ST-11 complex的W135群菌株存在NadA黏附蛋白,型别以variant 3型为主。B群菌株不含有NadA蛋白,variant 3型NadA蛋白不适合作为我国B群Nm(B meningococci,MenB)蛋白疫苗的候选蛋白。
- 孙晓芳杨郝亮周海健朱兵清徐丽高源邵祝军
- 关键词：脑膜炎奈瑟菌黏附蛋白疫苗
- 人源FCHo1蛋白μHD结构域的表达、纯化及晶体生长
- 2015年
- 人FCHo1蛋白(Fer/Cip4 homology domain only proteins 1)是网格蛋白介导的内吞途径中的成核剂,其碳端μHD结构域(AP2-μhomology domain)对于FCHo1在披网格蛋白小泡(clathrin-coated vesicle)形成过程中的正确定位非常重要。为揭示人FCHo1碳端μHD结构域的作用机制,制备可衍射的μHD结构域蛋白质晶体并解析其结构至关重要。通过构建p ET15b原核表达载体,并转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达。利用亲和层析、离子交换层析和分子筛层析技术,制备得到纯度95%以上的蛋白。通过多次优化结晶条件,获得衍射率约2.1的μHD结构域蛋白晶体,为解析其晶体结构奠定了良好的基础。
- 李夫夏鹏飞戴雪辰石康熊鹰刘映乐
- 关键词：纯化衍射
