国家自然科学基金(30872516)
- 作品数：8 被引量：24H指数：3
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- 乳腺癌间质成纤维细胞对MDA-MB-231种植肿瘤生长和转移的影响及其机理探讨
- 2014年
- 目的通过裸鼠接种方式进行体内实验,观察乳腺癌间质成纤维细胞(CAFs)对种植肿瘤生长和转移的影响,并探讨其作用机理。方法选择MDA-MB-231乳腺癌细胞系细胞(简称MDA)、乳腺癌患者的CAFs和癌旁正常乳腺组织的正常成纤维细胞(NFs),结合不同的试剂,包括生理盐水(NS)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)配体拮抗剂1,4,8,11-四氮杂环十四烷(AMD3100,简称AMD),组合成以下6种处理:MDA+NS、NFs+NS、MDA+NFs+NS、MDA+NFs+AMD、MDA+CAFs+AMD及MDA+CAFs+NS。将36只Bal b/c无胸腺裸小鼠按配伍随机方法分成6组,分别接受上述处理。将细胞悬液接种于裸鼠,接种后饲养46 d处死,观察种植肿瘤的大小,有无淋巴结、肺及肝脏转移。采用ELISA法检测6组裸鼠的血浆SDF-1浓度,采用real-time PCR法检测6组裸鼠肿瘤组织中的SDF-1 mRNA水平,采用Western blot法检测6组裸鼠肿瘤组织中SDF-1蛋白的表达水平。结果除NFs+NS组外,其余5组均有种植肿瘤形成。MDA+CAFs+NS组裸鼠的种植肿瘤体积〔(9.092±2.662)cm3〕、血浆SDF-1浓度〔(75.25±16.23)ng/L〕、肿瘤组织中SDF-1 mRNA(中位数为14.714)及其蛋白(中位数为0.673)的表达水平均最高,与其他5组比较差异均有统计学意义(P<0.050)。6组裸鼠的肝和肺组织均未见转移灶。但MDA+CAFs+NS组有4只、MDA+NS组有2只裸鼠存在腋窝淋巴结转移,其他组均未发现腋窝淋巴结转移。结论乳腺癌CAFs对乳腺癌的生长起促进作用,且可促进肿瘤淋巴结的转移;其作用可能是通过乳腺癌CAFs分泌SDF-1,与其特定的受体即趋化因子受体4(CXCR4)结合来实现的。
- 刘晨蔡伟康骅孙海晨刘爽崔叶青张雁海涛
- 关键词：乳腺癌间质成纤维细胞基质细胞衍生因子-1
- 乳腺癌间质成纤维细胞的分离、培养及鉴定被引量：6
- 2011年
- 目的探讨乳腺癌间质成纤维细胞(BCSFs)分离、培养及鉴定的方法,为其功能的研究奠定基础。方法在无菌条件下,术中留取乳腺癌切除标本的部分癌组织块,剪切成1mm×1mm×1mm大小块后采用振荡联合Ⅰ型胶原酶和透明质酸酶消化法分离、培养癌组织间质成纤维细胞。通过观察细胞形态、免疫组织化学检测(CK、Vimentin、α-SMA以及TE-7)和流式细胞仪测定以鉴定其是否为间质成纤维细胞。结果 培养24h后有细胞贴壁生长,7～10d左右细胞近融合,可传代培养。经鉴定,BCSFs分离、培养的成功率为90%(18/20),其细胞特点为:细胞呈扁平梭形,两端有细胞质突起,有一个扁平卵圆形囊状的核,胞浆丰富;免疫组织化学检测显示CK(-)、Vimentin(+)、α-SMA(+)、TE-7(+);流式细胞仪检测CD34和CD45均为(+)。结论振荡结合双酶消化法可有效地分离、培养BCSFs。本方法为进一步研究BCSFs提供了一种新的细胞来源途径。
- 张晓耀康骅孙海晨刘爽崔叶青张琳蔡伟
- 关键词：乳腺癌间质成纤维细胞
- 乳腺癌间质成纤维细胞体内外研究现状及展望被引量：2
- 2012年
- 目的:总结间质成纤维细胞与乳腺癌发生发展的研究现状,探讨间质成纤维细胞在乳腺癌发生、生长和转移中的作用及对治疗的影响。方法:应用Medline、PubMed及CNKI期刊全文数据库检索系统,以"乳腺癌、间质、肿瘤相关成纤维细胞、肿瘤微环境"为中文关键词,"breast cancer、stromal、carcinoma-associated fibroblasts、tumor microenviron-ment"等为英文关键词,检索1994-2011年的相关文献,共检索到英文文献258条,中文文献56条。纳入标准:1)乳腺癌间质成纤维细胞的形态和特性;2)分离和培养的方法;3)功能的研究;4)对乳腺癌的发生、生长、转移,以及治疗的影响。结果:乳腺癌间质成纤维细胞通过细胞与细胞间的相互接触,在各种趋化因子和(或)细胞因子的作用下,通过不同的信号通路促进上皮细胞恶性转化,在乳腺癌的发生、生长及转移中起着重要的作用,但具体的机制尚不明确。结论:乳腺癌间质成纤维细胞通过细胞间的相互作用,促进细胞的恶性转化,并通过分泌各种的细胞因子使得乳腺癌细胞的增殖、转移和侵袭能力大大加强,促进了乳腺癌的发展。它对于乳腺癌的内分泌治疗和化疗疗效有着重要的影响,可能是乳腺癌治疗的新靶点。
- 刘晨康骅
- 关键词：乳腺肿瘤间质肿瘤相关成纤维细胞肿瘤微环境
- 血浆基质细胞衍化因子-1与乳腺癌临床病理学特征及预后分析被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨血浆基质细胞衍化因子-1(SDF-1)与乳腺癌临床病理学特征及预后的关系。方法:2006年2月至2007年3月首都医科大学宣武医院普外科住院手术乳腺癌患者82例,手术前空腹状态抽取血液标本,分离血浆后-20℃冻存,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测患者血浆中SDF-1水平。收集所有患者的临床资料及随访资料,SPSS17.0统计软件进行多因素Cox回归、生存曲线分析。结果:82例中乳腺癌患者中,失访2例,随诊率为97.6%。随访时间为12.5-71.2个月,平均55.6个月。有淋巴结转移组血浆SDF-1水平显著高于无淋巴结转移组,两者分别为(65.78±8.47)pg/ml和(56.02±3.70)pg/ml,P<0.05。多因素Cox回归分析显示只有淋巴结转移是影响无病生存、总生存的风险因素,HR=4.958,95%CI(1.314,18.709),P=0.018和HR=5.541,95%CI(1.117,27.491),P=0.036。以血浆SDF-1中位数54.589pg/ml将患者分为SDF-1高水平组和低水平组,尽管两组间患者无病生存率及总生存率无显著差异(P=0.527和P=0.678),但是SDF-1高水平组呈现出预后差于血浆SDF-1低水平组的趋势。结论:血浆SDF-1水平与乳腺癌淋巴结有无转移密切相关,高血浆SDF-1水平可能预示着预后不良。有必要就SDF-1与乳腺癌预后的关系扩大标本量进一步研究。
- 康骅陶金波李开富海涛孙海晨刘爽
- 关键词：乳腺癌血浆预后
- 间质成纤维母细胞与乳腺癌的发生发展研究进展被引量：2
- 2010年
- 成纤维母细胞是乳腺癌间质的重要组成成分之一,该细胞与正常乳腺组织间质的成纤维细胞在生物学特性上存在明显的差异,不仅在肿瘤的发生、发展中起重要作用,而且与患者的预后密切相关。近年来,研究还显示乳腺癌相关成纤维母细胞与治疗效果有关,将成为乳腺癌治疗策略中不可忽略的一个方面。
- 张琳康骅
- 关键词：间质乳腺癌
- CAFs对乳腺癌细胞生物学特性的影响及机制探讨被引量：4
- 2014年
- 目的:通过乳腺癌间质成纤维细胞(carcinoma-associated fibroblasts,CAFs)与乳腺癌细胞系MDAMB-231共培养的体外细胞实验及裸鼠接种的在体动物实验,观察CAFs对乳腺癌细胞增殖、凋亡、侵袭和转移活性的影响,并探讨其作用机制。方法:体外实验:分离培养浸润性导管癌组织中CAFs和正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs),然后分别与乳腺癌细胞MDA-MB-231体外共培养,采用MTT法、流式细胞仪、Matrigel人工模拟基底膜法分别检测乳腺癌细胞的增殖、凋亡、细胞黏附和侵袭能力。动物在体实验:选择乳腺癌细胞系MDA-MB-231、CAFs和NFs,结合生理盐水(NS)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及其配体拮抗剂AMD3100,组成不同的组别并接种于裸鼠(共6组)。观察肿瘤的大小,有无淋巴结、肺、肝脏转移。留取血标本及肿瘤组织行SDF-1表达水平的检测。结果:MDA-MB-231与CAFs和NFs共培养后乳腺癌细胞的增殖活性显著增强,其中CAFs的作用较NFs更强(P=0.011);CAFs组的黏附能力(34.70±4.84个/视野)明显强于NFs组(20.16±3.09个/视野),P=0.000;而CAFs组的侵袭性(89.0±4.62个/视野)也明显强于NFs组(81.6±6.08个/视野,P=0.045)。CAFs组中的MDA-MB-231的早期凋亡率(2.9±2.4)较NFs组(5.0±4.2)明显降低(P=0.026);MDA231+CAFs+NS组的种植肿瘤平均体积最大(9.092±2.662cm3,P=0.000);此外,该组共有4只(66.6%),MDA231+NS组有2只(33.3%)存在腋窝淋巴结转移,未见肝肺转移灶。在MDA231+CAFs+NS组中,血标本SDF-1值(75.25±16.23pg/ml)、肿瘤组织标本中SDF-1mRNA值(11.686±8.926)、组织中SDF-1蛋白表达水平(1.006±0.327)均为最高,与其他各组相比均有统计学差异(P=0.000)。结论:CAFs可影响乳腺癌肿瘤细胞的生物学特性,具有促进肿瘤细胞增殖,增强其黏附、侵袭及转移能力。其机制可能是通过乳腺癌间质成纤维细胞分泌SDF-1与其特定的受体CXCR4结合这一信号通路来实现的。
- 蔡伟康骅刘晨张琳孙海晨刘爽崔叶青张雁海涛
- 关键词：乳腺癌基质细胞衍生因子-1
- 乳腺癌肿瘤相关成纤维细胞对MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、黏附及侵袭的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:研究乳腺癌肿瘤相关成纤维细胞(carcinoma-associated fibroblasts,CAFs)对乳腺癌细胞增殖、凋亡、黏附和侵袭能力的影响。方法:首先,从6例乳腺癌病人肿瘤及癌旁正常乳腺组织块分别分离培养成对的CAFs和正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs)。然后,通过Transwell小室将CAFs或NFs与乳腺癌MDA-MB-231细胞体外共培养,进行增殖(MTT)、侵袭、黏附实验及流式细胞仪细胞凋亡检测。结果:MDA-MB-231与CAFs或NFs共培养后乳腺癌细胞的增殖活性显著增强(P<0.05)。与NFs相比,这种差异在同CAFs共培养组更为明显(P=0.011)。与CAFs共培养之后,MDA-MB-231的早期凋亡显著减少(P=0.026);而与NFs共培养之后则无显著差异。CAFs或NFs对MDA-MB-231细胞的细胞周期和晚期凋亡无明显影响。与CAFs或NFs共培养24小时后,MDA-MB-231细胞的侵袭、黏附能力明显增强,黏附数目为(34.7±4.84)个/视野(CAFs)和(20.16±0.09)个/视野(NFs),(P=0.000);侵袭数为(89±4.62)个/视野(CAFs)和(81.6±6.08)个/视野(NFs),(P<0.05)。结论:CAFs能促进乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖、减少其早期凋亡;同时对乳腺癌细胞的黏附和侵袭能力有促进作用。可是NFs的作用较CAFs为弱。有关CAFs影响乳腺癌肿瘤细胞的生物学特性的机制有待于进一步研究。
- 张琳康骅孙海晨刘爽崔叶青蔡伟张雁海涛
- 关键词：乳腺癌间质肿瘤相关成纤维细胞MDA-MB-231
- 乳腺癌间质成纤维母细胞的生物学特性及研究现状被引量：9
- 2011年
- 目的总结乳腺癌间质成纤维母细胞的生物学特性及研究现状。方法分析近年来有关乳腺癌间质成纤维母细胞研究的相关文献。结果乳腺癌组织的构成除肿瘤细胞本身外,尚包括间质成分,而成纤维母细胞是乳腺癌间质的主要成分。乳腺癌间质中成纤维母细胞与正常乳腺组织中成纤维细胞除产生胶原物质外,它们的生物学特性存在明显差异,前者表现为-αSMA阳性、p53基因突变,同时能够分泌多种细胞因子/趋化因子,通过多种信号通路参与乳腺癌细胞的生长、迁移、浸润及转移。结论乳腺癌间质成纤维母细胞的生物学特性可反映病变性质,对乳腺癌的诊断和鉴别诊断以及预后预测有着重要的意义。针对乳腺癌间质成纤维母细胞的靶点治疗正在受到更多的关注。
- 张晓耀康骅
- 关键词：乳腺癌间质成纤维母细胞生物学特性
