国家自然科学基金(30872571)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 相关作者：孙祥宙刘贵华邓春华高勇黄燕平更多>>
- 相关机构：中山大学附属第一医院广东省第二人民医院中山大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 慢病毒-血管内皮生长因子165载体的构建及其在脂肪组织来源的干细胞中过表达的研究被引量：1
- 2011年
- 目的构建慢病毒-血管内皮生长因子。（VEGF165）载体并转染脂肪组织来源干细胞（ADSCs）以得到用于基因治疗的种子细胞。方法通过聚合酶链反应（PCR）方法将EHSl001—68950485313912克隆突变成VEGF165（NM_001025368）转录本后采用三质粒系统（pGC—FU、pHelpl．0和pHelp2．0）进行包装慢病毒。通过定时定量PCR测定滴度后使用慢病毒-VEGFl65转染ADSCs。免疫荧光、Westernblot鉴定VEGF165在ADSCs中的表达。结果PCR（535bp）、DNA测序、Westernblot（49×10^3）检测证明成功构建的载体为VEGF165与绿色荧光蛋白（GFP）融合表达载体。实时定量PCR确定病毒滴度达到2×10^8TU／ml。慢病毒-VEGF165贷载体转染ADSCs后经免疫荧光验证约95％ADSCs可表达VEGF165，同时Westernblot也证明基因稳定表达。结论通过获得稳定表达VEGF165的ADSCs，为血管性疾病特别是糖尿病性勃起障碍的治疗奠定了基础。
- 孙祥宙刘贵华黄燕平高勇张亚东邓春华
- 关键词：脂肪组织来源干细胞VEGF165慢病毒过表达
- 前列腺癌根治术后勃起功能障碍动物模型的建立被引量：3
- 2011年
- 目的 对大鼠海绵体神经（CN）进行解剖并对其造成钳夹损伤,以建立前列腺癌根治术（RP）后勃起功能障碍（ED）的动物模型.方法 将36只雄性SD大鼠随机分为模型组、假手术组、正常组,术后4周通过阿朴吗啡（APO）实验及海绵体内压（ICP）/平均动脉压（MAP）测定、阴茎神经型一氧化氮合酶（nNOS）免疫组织化学检测以评估建立模型的效果.结果 术后4周3组大鼠的阴茎勃起率和平均勃起次数分别为0%和0次、100%（11/11）和（2.24±0.86）次、100%（12/12）和（2.39±0.92）次.模型组大鼠无明显勃起反应,假手术组、正常组可见明确勃起反应.电刺激盆腔星状神经节（MPG）前3组大鼠ICP/MAP分别为（0.13±0.04）、（0.10±0.03）、（0.12±0.03）,电刺激MPG后分别为（0.12±0.05）、（0.57±0.08）、（0.58±0.06）,电刺激MPG前3组ICP/MAP差异均无统计学意义（P＞0.05）,模型组与假手术组、正常组的电刺激MPG后ICP/MAP差异有统计学意义（P＜0.05）.3组大鼠阴茎nNOS阳性神经纤维数分别为（23.04±2.59）、（73.94±7.51）、（80.26±6.95）,模型组大鼠阴茎nNOS阳性神经纤维数明显少于假手术组、正常组（P＜0.05）.结论 大鼠CN结构与人类非常相似,CN钳夹损伤是建立RP术后ED模型的可靠的方法.
- 卞军孙祥宙戴宇平刘贵华邓春华杨国胜
- 关键词：前列腺癌根治术勃起功能障碍海绵体神经
- 大鼠脂肪干细胞体外诱导为神经元样细胞的研究被引量：2
- 2009年
- 目的建立将大鼠脂肪干细胞体外诱导分化为神经元样细胞的方法。方法取SD大鼠腹股沟处的皮下脂肪,分离出脂肪干细胞并培养传代。使用诱导剂IBMX诱导ADSCs向神经元样细胞分化,检测神经前体细胞标志Nestin和神经元标志NF200、MAP2,以明确分化结果,而且检测Nestin在诱导过程中的表达阳性率的变化情况,采用SPSS11.0软件进行统计学分析。结果从大鼠脂肪组织中分离出脂肪干细胞,经诱导剂IBMX诱导后,ADSCs表现出神经元样细胞形态,大部分细胞表达nestin,少部分细胞表达MAP2和NF200,随着诱导的进行,nestin的表达是升高的。结论成功地建立了一种将大鼠脂肪干细胞体外诱导分化为神经元样细胞的方法,ADSCs有希望成为治疗神经性勃起功能障碍的、理想的组织工程种子细胞。
- 高勇孙祥宙邓春华刘贵华黄燕平廖勇彬
- 关键词：脂肪干细胞神经元勃起功能障碍
