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国家自然科学基金(31330071)

作品数：15 被引量：32H指数：4
相关作者：冯启理邓惠敏刘琳郑思春朱子丹更多>>
相关机构：华南师范大学中国科学院西北工业大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
相关领域：生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 15篇中文期刊文章

领域

  • 12篇生物学
  • 6篇农业科学

主题

  • 8篇家蚕
  • 4篇原基
  • 3篇夜蛾
  • 3篇在家
  • 3篇斜纹夜蛾
  • 3篇基因
  • 2篇信号
  • 2篇转录
  • 2篇转录因子
  • 2篇鳞翅目
  • 2篇鳞翅目昆虫
  • 2篇昆虫
  • 2篇发育
  • 2篇保幼激素
  • 1篇代谢调控
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白基因
  • 1篇凋亡
  • 1篇信号途径
  • 1篇信号转导

机构

  • 12篇华南师范大学
  • 1篇西北工业大学
  • 1篇中国科学院
  • 1篇中国农业科学...

作者

  • 9篇冯启理
  • 7篇邓惠敏
  • 3篇刘琳
  • 2篇郑思春
  • 2篇朱子丹
  • 1篇温众杰
  • 1篇王文
  • 1篇王文
  • 1篇徐安英
  • 1篇刘学术
  • 1篇相辉
  • 1篇李敏杰
  • 1篇李婵丹
  • 1篇章佳玲
  • 1篇陈亚青
  • 1篇夏亭
  • 1篇马琼

传媒

  • 5篇蚕业科学
  • 3篇环境昆虫学报
  • 2篇昆虫学报
  • 2篇华南师范大学...
  • 2篇Insect...
  • 1篇Zoolog...

年份

  • 2篇2021
  • 4篇2019
  • 2篇2018
  • 2篇2017
  • 3篇2016
  • 1篇2015
  • 1篇2014
共 15 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
家蚕翅原基细胞的凋亡和自噬分析被引量：4
2016年
【目的】家蚕Bombyx mori翅原基在生长分化过程中伴随着造血器官和翅囊等组织的消失。本研究旨在分析家蚕翅原基生长分化过程中是否存在细胞凋亡和细胞自噬。【方法】制作蛹期0 d翅原基石蜡切片,利用TUNEL法检测细胞凋亡情况;提取5龄第3天、5龄第6天、上簇第1天、预蛹期、蛹期0 d及蛹期第3天的翅原基总RNA,反转录成c DNA,利用定量PCR检测凋亡和自噬相关基因的表达水平;检测了细胞凋亡相关的Caspase 3和细胞自噬相关的酸性磷酸酶活性。【结果】TUNEL染色发现蛹期0 d的翅原基出现部分细胞凋亡现象;细胞凋亡相关基因Caspase 3和Nc主要在5龄幼虫期有高水平表达,细胞凋亡抑制因子IAP主要在幼虫末期有较高水平的表达;Caspase 3酶活性在上簇第1天出现峰值;细胞自噬相关基因Atg5,Atg6,Atg8和Atg12主要在幼虫末期有较高水平的表达;酸性磷酸酶活性也主要在幼虫末期较高。【结论】在幼虫期可能存在细胞凋亡,抑制了翅原基细胞的增殖,进而阻止了翅原基的生长分化;在幼虫末期可能同时存在细胞凋亡和自噬,促进翅囊等的退化,同时阻止了翅原基细胞的增殖,推动了翅原基向蛹翅的发育。
刘学术胡启豪郑思春冯启理邓惠敏
关键词：家蚕凋亡自噬CASPASE酸性磷酸酶
家蚕保幼激素信号途径中转录因子BmKr-h1的基因克隆与表达分析被引量：1
2016年
Krüppel homolog 1(Kr-h1)是含有C2H2锌指结构的转录因子,在昆虫变态发育中起重要作用。从家蚕5龄第3天幼虫的表皮中克隆了Bm Kr-h1基因,该基因全长c DNA为1 918 bp,其中开放阅读框1 047 bp,GC含量42.2%,编码348个氨基酸。氨基酸序列比对分析发现大部分昆虫物种的Kr-h1都含有8个锌指结构,暗示该蛋白质的功能具有一定的保守性。通过生物信息学方法预测Bm Kr-h1不含信号肽和糖基化位点,但含有19个可能的磷酸化位点,暗示其活性可能受到磷酸化和去磷酸化修饰的影响。利用原核表达系统表达获得了可溶的Bm Kr-h1蛋白并制备了抗体。Western blot和半定量RT-PCR检测的结果显示,不论在mRNA水平还是蛋白质水平,Bm Kr-h1在家蚕幼虫5龄初期和吐丝期的翅原基都有较高水平表达,而在蛹期的表达量较低。用保幼激素(JH)类似物Methoprene和蜕皮激素(20E)分别注射家蚕5龄第3天幼虫,发现2种激素均能诱导蚕体内Bm Kr-h1的表达上调。免疫组织化学结果显示,Bm Kr-h1在5龄第3天幼虫各组织中的表达量很低,而在吐丝期的中肠、脂肪体和表皮中都有一定水平的表达,暗示其可能参与家蚕蜕皮变态的过程。上述结果表明Bm Kr-h1可以响应JH和20E的诱导,提示其在家蚕的变态发育中发挥作用。
胡启豪朱子丹李婵丹冯启理邓惠敏
关键词：家蚕基因克隆
斜纹夜蛾精巢的发育和精子的发生被引量：4
2019年
采用解剖观察、石蜡组织切片及苏木精-曙红染色方法,利用显微镜照相获取图像,研究了斜纹夜蛾幼虫到成虫精巢的发育及精子的发生.研究结果表明:2个精巢在预蛹期开始融合,并在蛹期融合成1个;在成虫期,随着精子的排出,精巢体积逐渐减小;斜纹夜蛾雄性生殖细胞发育为有核精子和无核精子,2种精子的发生都经过精原细胞囊期、精母细胞囊期和精细胞囊期;精子的形成主要区别在于有核精子的细胞核有一个变形过程,而无核精子形成过程中不经过细胞核变形,且后期将细胞核丢弃.综上所述,有核精子的主要发育时期为6龄到蛹期,而无核精子的主要发育在蛹期.本研究结果可为进一步研究和控制精子形成以及利用生殖机理防治斜纹夜蛾打下基础.
文靓陈丰陈亚青周来娣刘玉成冯启理刘琳
关键词：斜纹夜蛾精子发生精子形成
添食不同含氮物质对家蚕产丝量及丝素蛋白基因表达的影响被引量：3
2015年
给家蚕5龄幼虫分别添食大豆蛋白、NH4Cl和尿素后,调查家蚕产丝量的变化,并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测蚕体丝腺组织中丝素重链基因(fib H)的表达变化,探究适合用于提高家蚕产丝量的含氮物质。5龄起蚕连续6 d按照0.45 mg/(头·d)的剂量添食尿素后,茧层率比对照组增加15.7%,且幼虫的体质量及丝腺体积都比对照组有所增加;5龄幼虫添食大豆蛋白和NH4Cl后茧层率无明显增加。qRT-PCR检测5龄起蚕按照上述剂量添食尿素120 h后,后部丝腺中fib H的表达量比对照组增加了1.5倍。上述结果再次证实了家蚕5龄幼虫添食尿素后可以增加产丝量,并且表明尿素可以促进蚕体后部丝腺中fib H基因的表达。
朱巧莹李敏杰陈燕冰冯启理邓惠敏
关键词：家蚕尿素实时荧光定量PCR
家蚕翅原基表皮蛋白基因BmWCPs的生物信息学分析与激素诱导表达特征被引量：1
2016年
翅原基表皮蛋白（WCPs）在昆虫翅的发育中起着非常重要的作用。为了研究家蚕翅原基表皮蛋白基因BmW CPs的表达是否与蜕皮激素（20E）的调节有关,用生物信息学方法分析BmW CPs基因的序列结构与系统进化特点,并通过半定量RT-PCR检测蜕皮激素对部分BmW CPs基因表达的诱导作用。11个BmW CPs基因成簇分布在家蚕基因组中,除BmW CP6和BmW CP10分别分布在第7号、第21号染色体外,其余的BmW CPs均分布在第22号染色体上;11个BmW CPs的核苷酸序列长度为588～2 670 bp,编码115～312个氨基酸,蛋白质分子质量12～35 kD,等电点4.30～7.45;11个BmW CPs基因的ORF内均有内含子插入,81.82%的基因含有2～3个内含子,内含子长度50～5 958 bp,在50～300 bp之间分布频率最高,占46%。将解剖获取的上蔟1 d蚕体的翅原基进行体外培养,并用浓度为2μmol/L的20E直接处理12 h后再常规培养18 h,提取翅原基总RNA并反转录合成cD NA,经半定量RT-PCR检测样品中BmW CPs的表达水平显著上调。依据上述研究结果初步认为,用蜕皮激素直接处理12 h后再常规培养18 h的脉冲作用,可诱导基因组中成簇分布的BmW CPs在翅原基组织中大量表达,以利于家蚕完成翅原基的变态发育。
朱子丹章佳玲冯启理邓惠敏
关键词：家蚕蜕皮激素
整联蛋白在家蚕翅发育中的作用研究
2018年
昆虫翅在昆虫生命活动中起着十分重要的作用,将昆虫的活动范围从平面扩大到立体,使其在躲避敌害、觅食和繁衍等方面增强了竞争优势。对家蚕翅突变表型的研究能够分析翅发育过程中基因调控的分子机制。本研究以家蚕泡状翅突变体w13为材料,分析了整联蛋白在翅原基中的表达和分布。qRT-PCR结果显示,整联蛋白基因家族在野生型和w13突变型翅原基中有着显著的差异表达。对其中差异表达的整联蛋白基因Bmintegrinβ3进行克隆、原核表达并制备了多克隆抗体。免疫组化分析结果显示,整联蛋白Bm INTEGRINβ3在w13突变型翅原基中的表达量极低。在c108野生型中Bm INTEGRINβ3呈微丝状,将翅的背腹侧表皮联系在一起,但在w13突变型中未检测到该蛋白。推测Bm INTEGRINβ3的下降或缺失可能是导致翅背腹表皮间的维系不紧密并形成泡状翅的原因之一。本研究为解释整联蛋白在昆虫翅发育中的功能作用提供了线索。
白珺徐安英邓惠敏冯启理
关键词：家蚕免疫组化整联蛋白
转录因子ZnF-706在鳞翅目昆虫中的进化格局及在家蚕中的功能被引量：3
2019年
【目的】探讨家蚕Bombyx mori的潜在驯化基因——转录因子ZnF-706在鳞翅目(Lepidoptera)昆虫进化过程及家蚕驯化过程中的分子进化格局;并基于CRISPR/Cas9家蚕基因组编辑平台,探讨ZnF-706基因在家蚕中的功能。【方法】首先分析了家蚕ZnF-706序列特征,并利用已发表芯片数据调研该基因在家蚕幼虫组织中的表达格局;利用Phylogenetic Analysis byMaximum Likelihood (PAML)分支检验方法,分析该基因在鳞翅目不同类群中的分子进化格局。基于已发表的家蚕-野桑蚕Bombyx mandarina群体基因组多态性数据,对ZnF-706进行基因区域人工选择信号分析;对ZnF-706基因上游2 kb的调控区域进行单核苷酸多态性位点频率检测,发掘在家蚕群体中固定下来的突变位点;针对突变位点所在区域进行转录因子结合活性预测。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除ZnF-706基因,获得纯和突变体;以野生型家蚕为对照,检测突变体的茧重及蛹重变化。【结果】家蚕ZnF-706的编码蛋白具有典型的锌指蛋白结构域。ZnF-706在家蚕5龄第3天幼虫各组织中广泛表达,尤其表皮、脂肪体和生殖腺中有很高的表达量;该基因在鳞翅目、蚕蛾总科(Bombycoidea)及天蚕Antherea yamamai 3个分支中均呈现快速进化信号,在家蚕中有强烈的人工选择信号。该基因所在基因组区域的家蚕-野桑蚕种群分歧度参数Fst明显升高,家蚕群体中的群体多样性π明显降低,表明它位于一个选择扫荡区域内;该基因在家蚕-野桑蚕中的9个SNP位点存在于上游调控区,并位于转录因子结合活性区域内。该基因的纯合家蚕突变体ΔZn F-706生存力减弱,并且茧重以及蛹重与野生型家蚕相比都显著降低。但与黑腹果蝇Drosophila melanogaster中不同的是,家蚕中该基因的突变并不致死。【结论】ZnF-706可能在鳞翅目尤其是泌丝昆虫中进化,并在家蚕驯化过程中受到选择压力,提示其对于特征性状�
崔勇朱亚楠黄悦莹谭丽庄冯启理王文王文
关键词：鳞翅目转录因子
家蚕Met1基因的表达与组织定位分析被引量：1
2017年
选择家蚕基因组中与果蝇Dm Met(Methoprene tolerant protein)同源的基因Bm Met1进行研究。预测Dm Met和Bm Met1的结构域均是一个b HLH-PAS(basic helix-loop-helix Per-ARNT-SIM)型转录因子,具有典型的DNA结合结构域。在原核系统表达获得了Bm Met1蛋白并制备了抗体。qRT-PCR和Western blotting检测结果显示,无论是Bm Met1基因mRNA的转录还是Bm Met1蛋白的表达,在家蚕5龄中后期和吐丝期的翅原基组织中都呈现较高水平,而在蛹期呈现较低的水平。通过免疫组织化学方法分析Bm Met1的组织定位,结果显示该蛋白质在5龄第6天和吐丝期家蚕胸节表皮、脂肪体及翅原基等组织中都有较高水平的表达,在蛹期上述部位和组织的表达水平较低。分别将蜕皮激素(20E)和保幼激素类似物(Methoprene)按照2μg/头的剂量注射到5龄第3天幼虫第2~3胸节间,qRT-PCR检测幼虫翅原基组织中的Bm Met1受到Methoprene的诱导上调表达,且在处理2 h后表达水平最高。上述结果暗示Bm Met1可能参与了保幼激素对家蚕翅原基生长分化的调控。
易文瑾马琼温众杰刘琳冯启理邓惠敏
关键词：家蚕保幼激素类似物
家蚕基因组中G四链体特征序列分布及关联基因的功能分析
2018年
G-四链体（G-quadruplex,G4）是一种不同于双螺旋的特殊结构,由富含鸟嘌呤的DNA链在阳离子的参与下形成的四链DNA螺旋高级结构,在哺乳动物中被证明是具有重要生物学功能的表观遗传学元件。以鳞翅目模式昆虫家蚕（Bombyx mori）为对象,利用Quadparser程序,在家蚕全基因组范围预测G4结构,对其分布特征以及对其潜在调控基因的表达特性和功能的影响进行初步分析。在家蚕全基因组共预测到6 278个G4结构,其中有63.5%位于转座子区,35.3%分布在编码基因区。在基因的5＇端侧翼序列转录起始位点和3＇端转录终止位点附近都有相对明显的G4结构富集,暗示G4结构可能对于基因表达具有一定的调控作用。相对于基因组背景,上游含有G4结构的基因其编码区长度偏短,下游含有G4结构的基因其编码区则显著加长。上游含有G4结构的基因主要富集于核酸结合活性尤其是转录因子活性分子功能上,主要参与核酸代谢相关的调控过程,G4结构主要位于编码链;下游含G4结构的基因则主要富集于激酶和转移酶活性以及受体活性分子功能上,主要参与蛋白质加工及信号转导过程,G4结构主要位于模板链。上述结果提示G4结构位于基因上、下游所调控的靶基因有所分歧,作用机制可能也有所差异。结合家蚕基因组芯片数据分析发现,含有G4结构的基因没有明显的组织表达特异性,提示该类基因在广泛的生物学过程中均发挥作用。以上结果为后续深入研究该类表观遗传学结构在家蚕中的生物学功能提供了重要线索和参考依据。
吴凤相辉冯启理
关键词：家蚕基因组信号转导
Identification and functional characterization of doublesex gene in the testis of Spodoptera litura被引量：4
2019年
Fusion of the testis occurs in most Lepidoptera insects, including Spodoptera litura, an important polyphagous pest. Testicular fusion in S. litura is advantageous for male reproduction, and the molecular mechanism of fusion remains unknown. Doublesex influences the formation of genitalia, the behavior of courtship, and sexually dimorphic traits in fruit-fly and silkworm, and is essential for sexual differentiation. However, its purpose in the testis of S. litura remains unknown. The doublesex gene of S. litura (Sldsx) has male-specific SldsxM and female-specific SldsF isoforms, and exhibits a higher expression level in the male testis. At the testicular fusion stage (L6D6), Sldsx attained the highest expression compared to the pre-fusion and post-fusion periods. Moreover, Sldsx had a higher expression in the peritoneal sheaths of testis than that of germ cells in the follicle. CRISPR/Cas9 (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/Cas9) was applied to S. litura to determine the role of Sldsx. A mixture of single guide RNA messenger RNA and Cas9 protein (300 ng/μL each) was injected into eggs within 2 h following oviposition. CRISPR/Cas9 successfully induced genomic mutagenesis of Sldsx at Go generation. The mutant males had smaller testis surrounded by less tracheae. Moreover, the mutant males had abnormal external genitalia and could not finish mating with wild-type females. Additionally, testes were fused for almost all mutant males. The results showed that Sldsx was not related to testicular fusion, and is required for both testis development and the formation and function of external genitalia in S. litura. The main roles of doublesex on the male are similar to other insects.
Qian DuLiang WenSi-Chun ZhengHong-Lun BiYong-Ping HuangQi-Li FengLin Liu
关键词：DOUBLESEXGENITALIASPODOPTERATESTIS
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