浙江省科技厅项目(2007C02001)
- 作品数:3 被引量:23H指数:2
- 相关作者:王日昕廖智鲁涛刘梅武梅更多>>
- 相关机构:浙江海洋学院华中科技大学更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划浙江省科技厅项目舟山市科技局科技项目更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 厚壳贻贝抗菌肽Mytilin的初步鉴定被引量:15
- 2010年
- 厚壳贻贝是我国具有重大经济价值的水产养殖贝类,对其抗菌肽的研究有助于人们了解厚壳贻贝的免疫机制。为了解厚壳贻贝血清中抗菌肽Mytilin的分子组成和特性,采用多维高效液相色谱对厚壳贻贝血清进行分离纯化,从中获得3种对革兰氏阳性菌以及阴性菌均有抑制作用的抗菌肽分子,序列分析表明3种抗菌肽具有较高的序列相似性,均属于贻贝抗菌肽Mytilin家族,分别命名为Mytilin-1,Mytilin-2和Mytilin-3。其中,Mytilin-1为34个氨基酸残基构成的多肽,其分子量为3885.17u,含8个半胱氨酸,形成4对二硫键。根据所测Mytilin-1的氨基酸序列设计特异性引物,通过菌落PCR方法筛选厚壳贻贝cDNA文库,获得Mytilin-1的cDNA基因并进行了序列分析。以上研究结果表明,作为贻贝的主要抗菌肽家族,Mytilin在厚壳贻贝血清中具有较高丰度,对其蛋白质序列以及基因序列的研究为深入了解厚壳贻贝Mytilin抗菌肽的分子多样性奠定了基础。
- 王日昕刘梅廖智鲁涛武梅何光源
- 关键词:厚壳贻贝抗菌肽CDNA
- 厚壳贻贝抗菌肽mytilin和myticin的cDNA基因的克隆与序列分析被引量:13
- 2010年
- 抗菌肽是贻贝免疫系统中的一个重要组成部分,也是目前海洋生物抗菌肽研究的重要内容。在贻贝抗菌肽家族中,mytilin和myticin是目前贻贝抗菌肽研究中发现成员最多,丰度最高的两个家族,在贻贝免疫系统中占有重要的地位。为了解厚壳贻贝抗菌肽mytilin和myticin的基因组成及其多样性机制,通过设计特异性引物,以厚壳贻贝血细胞cDNA文库为模板进行PCR扩增以筛选文库,共克隆到8条mytilin的同源cDNA序列和9条myticin的同源cDNA序列,并对其基因序列及推导的氨基酸序列进行了序列比对和变异位点初步分析。上述研究为将来深入研究厚壳贻贝的免疫机制及筛选具有开发价值的抗菌肽分子奠定了理论基础。
- 廖智刘梅王日昕武梅杨丽佳鲁涛徐田军石戈
- 关键词:厚壳贻贝抗菌肽CDNA
- 三疣梭子蟹Profilin基因全长cDNA的克隆与表达分析被引量:2
- 2010年
- 三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)是我国沿海重要养殖品种之一。近年来,养殖病害呈逐年上升趋势,制约了三疣梭子蟹养殖产业的健康可持续发展。克隆三疣梭子蟹免疫相关基因、研究免疫基因的功能和作用机制,可为三疣梭子蟹养殖病害的防治奠定基础。本研究从三疣梭子蟹血细胞全长cDNA文库中克隆了742bp的profilin基因全长cDNA。该profilin全长cDNA中开放阅读框长375bp,编码125aa。推导的三疣梭子蟹profilin理论等电点pI5.87,氨基酸序列与冈比亚按蚊(Anopheles gambiae)profilin同源性最高,序列一致性为42.9%。荧光定量RT-PCR分析结果显示,在正常的三疣梭子蟹机体中,血细胞profilin表达水平最高,其次为肝胰脏;在致病菌副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)诱导后,血细胞中profilin表达量显著上升(P<0.01),表明profilin可能参与了三疣梭子蟹的免疫防御反应,是一个免疫相关因子。
- 申望叶茂石戈王日昕
- 关键词:三疣梭子蟹免疫基因克隆PROFILIN基因表达