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湖南省卫生厅资助项目(B2006-115)
作品数:
2
被引量:5
H指数:1
相关作者:
刘双全
张秋桂
吴移谋
赵飞骏
刘兰芳
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相关机构:
南华大学
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发文基金:
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2009
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梅毒螺旋体Tp0751重组蛋白的表达及鉴定
2009年
目的表达梅毒螺旋体粘附蛋白Tp 0751,纯化表达产物并对其抗原性进行鉴定。方法通过生物信息学分析,去除Tp 0751信号肽序列,构建原核表达体并在大肠埃希菌(E.coli)R2566中进行诱导表达;Ni-NTA法纯化重组蛋白;蛋白质印迹法(WB)鉴定重组蛋白。结果成功构建了PET-28a(+)/Tp 0751原核表达载体;经表达、纯化后获得了相对分子量约为26 kD的融合蛋白;经WB分析能与梅毒患者阳性血清发生特异性反应。结论重组表达的Tp 0751重组蛋白具有良好的抗原性,为进一步研究Tp 0751重组蛋白在梅毒致病过程中的作用奠定了基础。
肖勇健
张秋桂
刘双全
谭湘芳
赵飞俊
关键词:
梅毒螺旋体
粘附蛋白
梅毒螺旋体Tp0751黏附蛋白的表达、纯化及免疫活性研究
被引量:5
2009年
目的表达梅毒螺旋体黏附蛋白Tp0751,纯化表达产物并进行免疫活性分析,为探索Tp0751重组蛋白在梅毒致病过程中的作用奠定基础。方法通过生物信息学分析,去除Tp0751信号肽序列,构建原核表达体进行诱导表达;Ni亲和层析柱纯化重组蛋白,Western blot检测其免疫反应性,用重组蛋白免疫新西兰家兔,评价其免疫原性。结果成功构建了pET-28a(+)-0751原核表达载体,经表达、纯化后获得了相对分子质量约为26×10^3的融合蛋白;Western blot检测其能与梅毒患者阳性血清发生特异性反应;利用纯化的Tp0751重组蛋白免疫新西兰家兔,能诱导家兔产生特异性免疫应答,ELISA法测定免疫血清中特异性抗体滴度在1:10 240以上。结论重组表达的Tp0751黏附蛋白具有良好的免疫活性,为进一步研究其在梅毒致病过程中的作用和生物学功能奠定了基础。
刘双全
赵飞骏
张秋桂
颜向军
刘兰芳
吴移谋
关键词:
梅毒螺旋体
黏附蛋白
重组蛋白
免疫原性
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