教育部科学技术研究重点项目(106132)
- 作品数:2 被引量:6H指数:2
- 相关作者:张尔永赁可郭应强任福强石应康更多>>
- 相关机构:四川大学华西医院更多>>
- 发文基金:教育部科学技术研究重点项目国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- PPARδ基因RNA干扰慢病毒载体的构建及稳定干扰结肠癌细胞株KM12C的建立被引量:2
- 2010年
- 大肠癌是常见的恶性肿瘤,其发病率和病死率正逐年递增。过氧化物酶体增殖因子活化受体δ(peroxisome pro1iferator-activated receptorδ,PPARδ)是结肠腺瘤性息肉基因通路的下游靶标,很可能参与了大肠癌发病机制。然而,目前对该基因在大肠癌中的功能尚未阐明。本实验采用慢病毒三质粒包装系统构建特异靶向人PPARδ基因的RNA干扰(RNAinterference,RNAi)慢病毒载体,用以建立PPARδ基因稳定沉默的结肠癌细胞株。测序证实,成功构建编码表达PPARδ短发夹结构RNA(sh-PPARδ)的慢病毒载体pLVshPPARδ以及对照载体pLVControl。病毒载体转导结肠癌细胞株KM12C后,荧光显微镜及流式细胞术(fluorescence-activated cell sorting,FACS)证实细胞转染效率>90%,RT-PCR测定实验组KM12C细胞PPARδ的mRNA表达比未处理细胞下降70%,对照组与未处理细胞无显著差异。Western blot显示实验组PPARδ蛋白表达量比未处理细胞明显下降,对照组与未处理细胞无显著差异。结果显示成功构建特异靶向人PPARδ基因的RNAi慢病毒载体,并成功建立PPARδ表达稳定干扰的人结肠癌细胞株KM12C,为PPARδ在大肠癌中的功能研究提供了新的细胞模型。
- 蒋小杨烈周总光李园王玲于永扬王存
- 关键词:结直肠癌RNA干扰慢病毒
- 大鼠急性心肌梗死模型建立方法的改进被引量:4
- 2009年
- 通过改进的结扎大鼠冠状动脉左前降支(LAD)的方法建立心肌梗死模型,并从心电图、心功能、组织形态学等方面对其进行观察。将成年雄性近交系Wistar大鼠30只随机分为假手术组(n=5)和模型组(n=25),模型组用改进的结扎LAD的方法建立心肌梗死模型,分别从心电图、心功能、组织形态学等方面对2组动物进行比较。结果发现采用改进的结扎左前降支的方法,操作简单,死亡率低,能建立稳定的大鼠心肌梗死模型,可用于心肌梗死发生机制及治疗等方面的研究。
- 任福强石应康郭应强张尔永赁可
- 关键词:心肌梗死动物模型左前降支