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瑞舒伐他汀对TPH-1巨噬细胞清道夫受体CD_(36)、SR-AⅠ表达的影响: 2011年; 目的观察瑞舒伐他汀对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的TPH-1巨噬细胞清道夫受体CD36和SR-AⅠ表达的影响。方法体外培养TPH-1巨噬细胞,分三组置6孔培养板中。对照组为正常生长的TPH-1巨噬细胞;ox-LDL组加入100 mg/L的ox-LDL培养24 h,诱导巨噬细胞泡沫化;瑞舒伐他汀组加入100 mg/L的ox-LDL培养24 h,诱导巨噬细胞泡沫化,然后加入瑞舒伐他汀10μmol/L培养2 h。检测各组细胞内清道夫受体CD36、SR-AⅠ蛋白及其mRNA。结果与对照组相比,ox-LDL组CD36、SR-AⅠ蛋白及其mRNA表达增加(P均<0.05);与ox-LDL组相比,瑞舒伐他汀组CD36、SR-AⅠ蛋白及mRNA表达明显降低(P均<0.05)。结论瑞舒伐他汀可降低ox-LDL诱导的TPH-1巨噬细胞中清道夫受体CD36、SR-AⅠ的表达。; 苗野罗俊生冯旭关宁霍小川; 关键词：瑞舒伐他汀氧化低密度脂蛋白泡沫细胞清道夫受体

辛伐他汀对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇代谢和SR-A表达的影响被引量：2: 2011年; 目的探讨不同浓度辛伐他汀对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇代谢和SR-A表达的影响。方法以50 nmol/L佛波酯诱导THP-1细胞分化成巨噬细胞,氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导巨噬细胞建立泡沫细胞模型,通过不同浓度辛伐他汀干预后,油红O染色观察细胞内脂质堆积情况,高效液相色谱检测细胞内游离胆固醇和胆固醇酯含量,W estern b lot检测SR-A蛋白的表达。结果与ox-LDL组比较,辛伐他汀处理组巨噬细胞的油红O染色阳性细胞数和细胞内胆固醇酯含量均显著减少(P均<0.01),同时SR-A蛋白表达明显下降(P<0.01),呈剂量依赖性。结论辛伐他汀可抑制ox-LDL诱导的THP-1巨噬细胞泡沫化,可能与辛伐他汀抑制SR-A的表达,从而减弱巨噬细胞对ox-LDL的摄取有关。; 李晨光罗俊生冯旭霍小川关宁; 关键词：辛伐他汀单核细胞泡沫细胞清道夫受体

胆固醇酯水解酶与动脉粥样硬化被引量：1: 2013年; 胆固醇酯以脂滴的方式存储在胞浆内是泡沫细胞的主要特点,也是动脉粥样硬化斑块发生发展的关键因素。只有游离胆固醇才能从细胞内外流到细胞外与胆固醇接受体结合,巨噬细胞内胆固醇酯代谢的第一步就是"水解"。水解是游离胆固醇外流的限速步骤,该反应由中性胆固醇酯水解酶催化。此外,胆固醇酯水解酶还调节胆固醇逆转运,从而参与体内胆固醇的最终清除。本综述旨在分析当前各种胆固醇酯水解酶的特点,阐述其参与细胞胆固醇酯水解来调节动脉粥样硬化的作用,为进一步明确能够作为防治动脉粥样硬化形成靶点的水解酶提供线索。; 霍晓川关宁冯旭王超甄为罗俊生; 关键词：胆固醇酯动脉粥样硬化

人胆固醇酯水解酶在RAW 264.7巨噬细胞内瞬时表达对胆固醇代谢的影响被引量：4: 2010年; 目的:以RAW264.7小鼠单核巨噬细胞为研究对象,探讨人胆固醇酯水解酶(Human cholesteryl ester hydrolase,hCEH)在鼠巨噬细胞内瞬时表达,对细胞内胆固醇代谢产生的影响。方法:利用FuGENE HD转染试剂将pEGFP-N1-hCEH质粒,转染RAW264.7小鼠单核巨噬细胞。24 h后将巨噬细胞与氧化型低密度脂蛋白(Oxidized low density lipoprotein,oX-LDL)(100 mg/L),共同孵育48 h。荧光显微镜观察及Western blot检测细胞内CEH的表达,油红O染色观察细胞内脂滴堆积情况,高效液相色谱检测细胞内游离胆固醇(Free cholesterol,FC)和胆固醇酯(Cholesterol esters,CE)含量。结果:转染72 h后,荧光细胞数最多,转染率接近40%。Western blot检测显示,hCEH蛋白在鼠巨噬细胞内大量表达并部分抑制鼠胆固醇酯水解酶(Cholesteryl ester hydrolase,CEH)表达。转染hCEH组与ox-LDL诱导组相比,油红O染色阳性细胞数显著减少,细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量明显下降。结论:hCEH基因在RAW264.7小鼠单核巨噬细胞内成功表达,减少细胞内胆固醇水平,抑制泡沫细胞的形成。; 冯旭罗俊生关宁霍晓川王瑞; 关键词：氧化低密度脂蛋白泡沫细胞胆固醇代谢

甘露醇应用时间及剂量对高血压性脑出血的影响被引量：20: 2010年; 目的:分析高血压性脑出血患者不同时间内应用不同剂量甘露醇对脑出血血肿增大及患者肾功能的影响。方法:选择发病6h内,经CT证实血肿20～30mL的基底节区脑出血患者109例,分为2组:Ⅰ组54例,在12h内用甘露醇,其中26例(A组)应用125mL,28例(B组)应用250mL;Ⅱ组55例,12h后应用甘露醇,其中27例(C组)应用125mL,28例(D组)应用250mL。发病24h后复查CT,1周后复查肾功能,比较不同时间段应用不同剂量甘露醇对血肿扩大及肾功能的影响。结果:A组有8例患者血肿扩大,B组12例,C组2例,D组6例,即不同时间应用甘露醇血肿扩大比较,差异有统计学意义(P<0.05),相同时间应用不同剂量甘露醇血肿增大比较无显著性差异(P>0.05)。但应用小剂量甘露醇的患者肾功能明显改善。结论:发病12h内应用甘露醇增加血肿增大率,使病情加重;同时间段内给予125mL或250mL甘露醇对血肿扩大无明显影响,但小剂量甘露醇可减少肾功能损害。; 孙霄云霍晓川张振兴郭闻师关宁罗俊生; 关键词：甘露醇脑出血高血压肾功能血肿扩大

人胆固醇酯水解酶真核表达载体的构建及U937细胞系的转染被引量：1: 2011年; 目的构建人胆固醇酯水解酶(hCEH)绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-N1-hCEH,并观察其转染单核巨噬细胞株U937后,细胞中hCEH的表达情况。方法以人肝细胞L-O2总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增hCEH编码区序列,将扩增片段插入到pMD19-T载体中,回收、纯化目的片段后亚克隆到pEGFP-N1真核表达载体上,经双酶切、测序鉴定后,转染U937,观察U937中绿色荧光蛋白的表达情况。结果 RT-PCR扩增hCEH基因的编码区序列获得1条约1.7 kb的片段,与预期片段大小相符;以pEGFP-N1为载体,成功构建重组表达质粒pEGFP-N1-hCEH,该质粒可以在U937中表达。结论成功构建pEGFP-N1-hCEH,用其转染U937后,细胞中pEGFP-N1-hCEH大量表达。; 顾立学罗俊生王瑞冯旭关宁霍晓川; 关键词：真核表达载体单核巨噬细胞 U937细胞转染

钙敏感受体在颈动脉平滑肌细胞增殖和迁移中的作用被引量：4: 2013年; 目的观察钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)在大鼠颈动脉平滑肌细胞中的表达情况及在颈动脉平滑肌细胞增殖和迁移中的作用。方法通过Realtime-PCR和Western Blot检测颈动脉平滑肌细胞中CaSR的表达情况;通过MTT法和Transwell法观察CaSR对颈动脉平滑肌细胞增殖和迁移能力的影响;通过Western Blot检测CaSR对MMP-9、MMP-2和PCNA表达的影响。结果 RT-PCR和Western blot结果显示在颈动脉平滑肌细胞中有CaSR的表达;MTT法和Transwell法结果显示与正常对照组相比较,CaSR激动剂组颈动脉平滑肌细胞增殖和迁移能力明显增强(P<0.05),而CaSR抑制剂组颈动脉平滑肌细胞增殖和迁移能力明显降低(P<0.05);Western Blot检测发现与正常对照组相比较,CaSR激动剂组MMP-9、MMP-2和PCNA表达明显增强,而CaSR抑制剂组MMP-9、MMP-2和PCNA表达明显降低。结论颈动脉平滑肌细胞中有CaSR的表达,并且CaSR可以影响颈动脉平滑肌细胞增殖和迁移。; 李辛贺成业罗俊生张凤香; 关键词：钙敏感受体迁移增殖

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辽宁省自然科学基金(20092190)

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