安徽省科技攻关计划(11010302119)
- 作品数：20 被引量：68H指数：5
- 相关作者：张丹俊戴银赵瑞宏胡晓苗侯宏艳更多>>
- 相关机构：安徽省农业科学院安徽农业大学中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：安徽省科技攻关计划国家自然科学基金国家蛋鸡产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 安徽两个鸡场ALV-J分离株gp85基因的克隆及序列分析被引量：3
- 2013年
- 为研究J-亚群禽白血病病毒(ALV-J)在安徽省鸡群中的遗传变异趋势,对分离到的2株安徽省ALV-J毒株,克隆了其gp85基因序列,并与国内外分离毒株的相应基因序列进行了比较。结果显示,ALVJ gp85基因序列具有高度的易变性,可变氨基酸残基占全长序列的22.8%。其中高变区hr1和hr2具有较多的可变位点,而可变区vr2和vr3相对较为保守。二级结构预测显示ALV-J gp85蛋白含有大量的无规则卷曲结构,尤其是hr2区域。同源性分析表明,毒株AH1103和AH1104的gp85氨基酸序列同源性为95.8%;毒株AH1103与毒株BJ090201J,ev/J的gp85序列同源性最高,毒株AH1104的gp85序列则与国内毒株HuB09JY04的同源性最高。进化分析显示,毒株AH1103和AH1104均与国内毒株NX0101和SD07LK1及美国分离株4817的遗传距离较远。
- 戴银赵瑞宏胡晓苗侯宏艳潘孝成周学利张丹俊
- 关键词：GP85基因
- 鸡MHCⅠ分子二聚体融合基因的构建及表达被引量：1
- 2016年
- 为进一步研究主要组织相容性复合体Ⅰ类分子(major histocompatibility complex,MHCⅠ)的作用机制,提高其抗原呈递的效率,获得生物活性较好的鸡MHCⅠ分子二聚体,采用4个不同长度的连接肽G_4S、(G_4S)_2、(G_4S)_3和(G_4S)_4,通过基因重组技术将MHCⅠα和β2m链基因共价连接,随后插入带有绿色荧光标签蛋白的真核表达载体,成功构建了4个重组质粒pEGFP-MHCⅠβ_2m-α。真核细胞表达后,荧光显微镜观察可见,各重组MHCⅠ二聚体分子均主要分布于真核细胞的内膜系统。此外,Western Blot检测均可见蛋白大小约80.0 k D左右的特异反应带,表达蛋白与鸡MHCⅠ类分子的相应抗体可发生特异性结合反应。研究结果表明各连接肽的重组质粒p EGFP-MHCⅠβ_2m-α均能够在真核细胞中顺利表达,且融合蛋白具有良好的免疫学活性。
- 戴银胡晓苗赵瑞宏侯宏艳沈学怀潘孝成周学利张丹俊
- 关键词：二聚体真核表达
- 黄羽肉鸡J亚群禽白血病肿瘤及相关病变发生规律的研究被引量：3
- 2013年
- 为了解J亚群禽白血病的病变发生规律,对90、180和320日龄3个不同年龄的某品种黄羽肉种鸡群进行了为期90 d的跟踪观察。结果显示:感染J亚群禽白血病病毒而发病的该品种黄羽肉种鸡最早出现肉眼可见肿瘤病变的年龄是107日龄左右;最早出现肉眼可见肿瘤比率最大的组织器官是心脏,肉眼可见肿瘤发生率最高的组织是肝脏,达83.02%,而肺脏未见眼观肿瘤,其他肉眼可以见到肿瘤的组织器官有:脾脏、肾脏、胸骨脏面、腺胃、肋骨、卵巢、肠道、肠系膜、泄殖腔、气管、脂肪、肌肉等,且大多病鸡有腹水病症,其中泄殖腔肿瘤和腹水病症在180日龄后肉眼检测淘汰该病病鸡中具有重要的临床指导意义。
- 张丹俊赵瑞宏沈学怀段世鹏胡晓苗戴银潘孝成侯宏艳周学利朱传民
- 关键词：黄羽肉鸡J亚群禽白血病肿瘤病变
- 禽白血病病毒J亚群感染对五华鸡生产性能和免疫性能的影响被引量：13
- 2012年
- 为了解禽白血病病毒J-亚群(ALV-J)感染对安徽省优良地方品种鸡—五华鸡生产性能和免疫性能的影响,在对五华鸡开展ALV-J血清学感染检测调研的基础上,对进入产蛋高峰期的五华鸡ALV-J血清阳性鸡群和阴性鸡群开展了为期18周的试验对比观察研究。结果表明,ALV-J血清阳性(感染或曾经感染)对五华鸡没有造成明显的发病和死亡增高现象;对鸡群新城疫(ND)、禽流感H5和H9疫苗的免疫效果没有呈现明显抑制;但对鸡群的产蛋率和平均蛋重会造成一定程度的下降(对照组平均产蛋率和蛋重分别为56%和0.055kg,而试验组为53.37%和0.051kg),料蛋比有一定程度的上升(对照组的料蛋比为3.49∶1,试验组为3.92∶1)。目前ALV-J感染虽然不会造成五华鸡明显的发病、死亡及免疫抑制,但可造成明显的生产性能下降和饲养成本的提高,必须引起高度重视,应及早开展原种鸡的ALV-J净化工作。
- 张丹俊戴银赵瑞宏胡晓苗夏松林盛昌树杨文超钟国发
- 关键词：J亚群禽白血病免疫性能
- PCR法检测活毒疫苗中禽白血病病毒污染被引量：8
- 2014年
- 为调查活毒疫苗中禽白血病病毒(ALV)污染情况,随机抽取安徽省鸡群使用的国内外公司(国内7家、国外1家)活毒疫苗(5个品种),先针对ALV各亚群保守的pol基因设计一对引物进行PCR检测,进一步针对env基因设计2对特异性引物,进行ALV J亚型和A^E亚型PCR检测。pol基因结果为鸡传染性囊病病毒(IBDV)B87株国内7个公司为阳性,鸡痘(AP)、鸡传染性喉气管炎(ILT)某国外公司为阳性,鸡新城疫(ND)LaSota株国内某公司为阳性。env基因结果为IBDV-B87株(国内某公司)和AP为J亚型阳性,ILT、ND-LaSota株和IBDV-B87株(国内另6个公司)为A^E亚型阳性。本研究共检测疫苗120份,ALV检出率达28.57%。因此,使用PCR法可作为活毒疫苗中ALV污染检测的有效方法,同时可以进一步鉴定污染的ALV是J亚型或A^E亚型。
- 胡晓苗沈学怀戴银赵瑞宏侯宏艳潘孝成周学利张丹俊朱传明
- 关键词：活毒疫苗禽白血病病毒污染
- 鸡J亚群禽白血病病毒AH-J11株的全基因组感染性克隆构建
- 2013年
- 为探究鸡J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的致病机理,采用PCR方法分4段分别扩增出J亚群禽白血病病毒安徽分离株AH-J11的前病毒cDNA,PCR产物经克隆鉴定,酶切后顺次连接,获得含有完整ALV-J AH-J11株前病毒cDNA的重组质粒,命名为pSK-AH-J11。将AH-J11株全基因序列克隆至pBluescriptⅡSK(+)载体中,得到重组质粒pBl-AH-J11,并将其转染鸡胚成纤维细胞(CEF)。通过间接免疫荧光试验,RT-PCR和Western blot检测,并经测序验证比对拯救前后病毒的gp85基因序列,结果均表明拯救出了1株重组J亚群禽白血病病毒(rALV-J)。本研究成功构建了鸡ALV-J的感染性克隆并救获了其重组病毒,为研究禽白血病的致病机理提供了良好的反向遗传操作技术平台。
- 王蓓刘芳王汉清李宁魏建忠刘光清王桂军
- 关键词：J亚群禽白血病病毒全基因组感染性克隆病毒拯救
- 活毒疫苗中禽白血病病毒污染的检测方法探讨被引量：5
- 2013年
- [目的]探讨活毒疫苗中禽白血病病毒污染的检测方法。[方法]随机抽取安徽省鸡群使用的国内外活毒疫苗,使用对禽白血病病毒(ALV)群特异性p27抗原ELISA检测试剂盒进行检测,同时根据禽白血病病毒各亚群保守的pol基因设计引物,进行PCR检测。[结果]7个国内公司鸡传染性法氏囊B87株检测结果均为阳性,某国外公司鸡痘、鸡传染性喉气管炎检测结果呈阳性,某国内公司为阳性。鸡新城疫lasota株共检测疫苗35份,检出率达28.57%。ELISA检测结果与PCR结果相一致。[结论]使用p27抗原ELISA检测试剂盒和PCR法均可作为活毒疫苗中ALV污染检测的有效方法,说明活毒疫苗中ALV污染是ALV传播的重要因素。
- 胡晓苗张丹俊侯宏艳戴银赵瑞宏潘孝成周学利沈学怀朱传明
- 关键词：活毒疫苗禽白血病病毒污染
- 五华鸡J亚群白血病病毒env部分基因的克隆和序列分析被引量：1
- 2011年
- 本试验通过PCR技术获得了安徽省地方品种五华鸡禽白血病病毒J亚群(avian leukosis virus subgroup J,ALV-J)env部分基因序列ALV-J-env1,并将该序列与GenBank数据库中登录的8条env基因相应序列进行了比对分析。结果表明,五华鸡已经感染了J亚群禽白血病,且部分鸡个体已经发病。通过分析可见,ALV-J-env1与所比较的基因序列同源性介于94.2%～96.6%之间,说明不同毒株之间的env基因有一定变异。但与ALV-J-env1同源性最高的是来自于中国ALV-J毒株的HQ425636和HM235665基因序列,且在进化树中聚集为一组,暗示它们之间亲缘关系较近,由共同的毒株进化而来。与ALV-J-env1同源性最低的是来源于马来西亚毒株的AY312965基因序列,遗传进化分析也进一步证实,两者之间亲缘关系较远。
- 戴银张丹俊胡晓苗赵瑞宏
- 关键词：禽白血病病毒J亚群
- 鸡MHCⅠ类分子信号肽的预测及其序列特征被引量：1
- 2015年
- 旨在进一步研究MHCⅠ类分子作用机制,分析MHCⅠ类分子α链和β2m链的信号肽序列特征。运用信号肽分析软件预测淮南麻黄鸡MHCⅠ类分子的α链和β2m链信号肽区域,通过序列比对,进一步分析鸡MHCⅠ类分子2条链的序列特征。信号肽分析软件预测结果表明,鸡MHCⅠ类分子的α链和β2m链均存在信号肽,且均由21个氨基酸残基组成。序列分析结果表明,鸡MHCⅠ类分子β2m链信号肽区域的氨基酸序列较为保守,但α链信号肽区域则呈现出一定的多态性,有23.8%的氨基酸残基发生突变。此外,将鸡MHCⅠ类分子信号肽序列与鸭、人和鼠的相应区域进行比对,表明鸡与鸭的α链和β2m链分子信号肽相似性均较高,分别为60%和65%,但与人和鼠的相似性均较低。
- 戴银王骏俊沈学怀胡晓苗赵瑞宏张丹俊
- 关键词：信号肽
- 禽白血病和鸡白痢净化与非净化鸡群生产性能差异性研究被引量：14
- 2013年
- 为了解禽白血病和鸡白痢净化与非净化鸡群在生产性能上的差异，在对安徽省某地方品种鸡开展禽白血病和鸡白痢检测净化研究中，对获得的净化鸡群和非净化鸡群在死淘、产蛋、种蛋孵化以及后代生长性能等方面进行了观察比较。结果表明，净化鸡群及其后代的死淘率较非净化组有较大程度降低；6～11月龄间月均产蛋率较非净化组提高5．91个百分点；蛋重显著高于非净化组（P〈0．05），且料蛋比较非净化组低0．46个点；净化组鸡群种蛋在合格率、受精率、出雏率和键雏率指标上均高于非净化组；净化组后代3月龄内体重除1月龄母鸡体重外，其他均高于非净化组，其中2月龄母鸡体重差异显著（P〈0．05）；与非净化组相比，净化组后代的平均日增重有所提高，3月龄总增重较非净化组增加24．80g，料重比降低0．05。综上结果可见，鸡群经过禽白血病和鸡白痢净化后在生产性能上明显优于非净化鸡群，可显著提高养殖效益，开展种鸡群禽白血病和鸡白痢净化对提高养鸡经济效益意义重大。
- 张丹俊沈学怀赵瑞宏胡晓苗潘孝成侯宏艳周学利戴银刘慧芳朱传民
- 关键词：禽白血病鸡白痢
