国家自然科学基金(30600285)
- 作品数：19 被引量：86H指数：5
- 相关作者：苏琦凌晖谭晖文玲吉晓霞更多>>
- 相关机构：南华大学云南省第一人民医院湖南环境生物职业技术学院更多>>
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- LIM激酶与肿瘤被引量：9
- 2009年
- LIM激酶(LIM kinase,LIMK)家族主要有两个成员:LIMK1和LIMK2,它们在癌症的侵袭和迁移过程中起着重要的作用。其通过调节cofilin家族蛋白的活性而影响肌动蛋白细胞骨架结构,对细胞形态、运动、黏附以及迁移都至关重要。LIMK对cofilin蛋白磷酸化与去磷酸化间的平衡进行微调节可能是影响肿瘤细胞迁移侵袭能力的决定性因素。LIMK受多条上游信号通路调控,主要上游信号分子是RhoGTP酶和Slingshot磷酸酶,形成Rho-ROCK/PAK-LIMK-Cofilin和SSH-LIMK-Cofilin信号通路。LIMK分布广泛并对多种组织的正常发育必不可少,在多种肿瘤组织中高表达并参与肿瘤生长、血管形成以及迁移侵袭过程。本文综述了LIMK的结构、功能、组织表达,参与肿瘤细胞迁移侵袭的机制以及信号通路的调控。
- 马艳华史玲苏琦
- 关键词：迁移
- 二烯丙基二硫对人胃癌MGC803细胞JNK、ATR、cyclinB1的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨二烯丙基二硫（DADS）调节JNK和ATR活性、cyclinB1表达与人胃癌MGC803细胞增殖的关系。方法实验分为两组：未处理组和30 mg/L DADS处理组,采用Western blot、免疫细胞化学及图像分析等方法,观察DADS对人胃癌MGC803细胞的JNK、ATR、cyclinB1的影响。结果Western blot结果显示：30mg/L DADS刺激了MGC803细胞中JNK1的活化,刺激后10～20 min作用效果最强,30 min恢复正常（P〈0.05）;磷酸化ATR在MGC803细胞中DADS处理15 min后被激活,并呈时间依赖性（P〈0.05）,而ATR总蛋白表达均无改变。免疫细胞化学及图像分析结果显示,未处理组cyclinB1表达呈弱阳性,而DADS处理组表达呈强阳性,阳性率明显高于未处理组,且DADS处理组光密度值显著高于未处理组（P〈0.05）。结论JNK1与ATR活化及cy-clinB1表达增强与DADS抗人胃癌MGC803细胞增殖有关。
- 凌晖张峰华谭晖何洁张杨吉晓霞苏琦
- 关键词：二烯丙基二硫
- Chk1/2基因沉默对人胃癌MGC803细胞增殖及周期的影响被引量：2
- 2010年
- 目的:观察Chk1/2基因沉默对人胃癌MGC803细胞增殖及周期的影响。方法:采用RNAi技术在MGC803细胞中分别将Chk1和Chk2基因沉默,运用蛋白质印变法验证,然后采用MTT实验、流式细胞术分析Chk1和Chk2基因沉默对人胃癌MGC803细胞增殖及周期的影响。结果:蛋白质印迹法结果显示,转染靶向Chk1和Chk2siRNA24h的Chk1、Chk2蛋白相对灰度值分别为0.09±0.04和0.12±0.01,明显弱于未转染对照组(0.39±0.09)和脂质体转染组(0.38±0.17),P均<0.05,而未转染对照组和脂质体转染组之间比较差异无统计学意义,P=0.458。转染Chk1、Chk2siRNA的MGC803细胞Chk1和Chk2蛋白表达分别下降85.0%和83.4%。MTT实验证明,Chk1蛋白表达缺失导致MGC803细胞增殖活性下降,其增殖抑制率为38.0%(t=26.797,P<0.05);Chk2蛋白表达缺失对细胞增殖无明显抑制作用(t=6.098,P>0.05)。Chk1基因沉默后细胞周期在G0/G1期发生停滞,但并不引发凋亡,而Chk2基因沉默后对细胞周期影响不明显。结论:Chk1基因沉默可明显抑制人胃癌细胞增殖,且其抑制增殖作用与诱导G0/G1期阻滞有关。
- 凌晖文玲陈真伟李振丰夏红苏琦
- 关键词：胃肿瘤RNA干扰细胞周期
- 二烯丙基二硫通过激活Caspase3和释放Cyt-c诱导Raji细胞凋亡被引量：2
- 2009年
- 二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)作为天然植物大蒜中的提取物,能抑制多种肿瘤细胞生长,但其抑瘤的分子机制还不十分清楚。在该研究中,作者采用CCK-8(cell counting ki)t技术检测发现,DADS能有效地抑制人淋巴瘤Raji细胞增殖,形态学观察、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测证实DADS呈时间和浓度依赖性诱导Raji细胞凋亡,DADS处理细胞24h后,MCL1和Bcl-2蛋白表达下降,而Bax和Bak蛋白表达水平无变化,Bid和Caspase3被激活,线粒体中Cyt-c释放增多,用Caspase抑制剂Z-VAD-FMK能部分阻断DADS诱导人淋巴瘤Raji细胞凋亡,提示DADS诱导的Raji细胞凋亡作用通过Bcl-2/MCL1-线粒体-caspase3通路介导。
- 谭晖吉晓霞凌晖罗招阳何洁易岚周建国苏琦
- 关键词：DADSRAJI细胞凋亡CASPASE3
- 二烯丙基二硫化物诱导胃癌BGC823细胞周期G_2/M期阻滞的机制被引量：2
- 2010年
- 目的:以细胞周期作为抗癌药物新靶点的研究,可能是很有前途的。笔者的前期工作发现,二烯丙基二硫化物(diallyl disulfide,DADS)可抑制人胃癌BGC823细胞增殖,其增殖抑制与细胞周期G_2/M期阻滞有关;DADS可能是通过抑制细胞分裂周期蛋白25C(Cell division cycle protein 25C,Cdc25C)、cyclinB1表达使部分BGC823细胞停滞在G_2/M期,但G_2/M期阻滞的机制还未完全阐明。本研究进一步探讨DADS诱导人胃癌BGC823细胞周期G_2/M期阻滞的可能机制。方法:RT-PCR检测Chk1和Chk2在mRNA水平的改变;Western blot检测DADS处理BGC823细胞前后细胞周期相关蛋白ATM-RAD3相关基因(ATM-RAD3-related gene,ATR)、细胞周期检查点蛋白激酶1(checkpoint kinase1,Chk1)、细胞周期检查点蛋白激酶2(checkpoint kinase2,Chk2)表达和ATR、Chk1、Chk2的磷酸化程度:免疫共沉淀检测Chk1、Chk2与Cdc25C结合情况。结果:RT-PCR检测显示,Chk1和Chk2的mRNA水平在处理组与未处理组之间无显著性差异(P>0.05)。Western blot检测显示,总Chk1和Chk2蛋白表达在细胞处理前后均无明显改变,但15mg/L DADS刺激BGC823细胞2h后,处理组细胞Chk1磷酸化程度明显增加,并呈时间依赖性(P<0.05),而Chk2磷酸化程度在处理组与未处理组之间无显著性差异(P>0.05)。15mg/L DADS作用15～120min,ATR磷酸化程度明显增加,呈时间依赖性(P<0.05),而ATR表达无改变。免疫共沉淀分析表明,DADS能促进BGC823细胞Chk1与Cdc25C结合,而对Chk2与Cdc25C结合无影响。结论:DAD诱导人胃癌BGC823细胞G_2/M期阻滞与Chk1的活化有关,DADS可能是通过激活ATR、Chk1,调节Cdc25C的表达引起人胃癌BGC823细胞G_2/M期阻滞。
- 凌晖吉晓霞文玲夏红谭晖何洁唐海林董琳苏琦
- 关键词：胃癌细胞二烯丙基二硫化物细胞周期蛋白
- 子宫内膜癌患者血清hsa-miR-155的表达及其临床意义被引量：32
- 2010年
- 目的 探讨hsa-miR-155在子宫内膜癌患者血清中的表达及其临床意义.方法 选择2008年9月至2009年12月间解放军第一六九医院妇产科收治的44例子宫内膜癌患者,以同期12例健康志愿者作为对照,应用实时荧光定量PCR技术检测子宫内膜癌患者和健康志愿者血清hsa-miR-155的表达水平（以倍数表示）,分析hsa-miR-155表达与子宫内膜癌临床病理指标间的关系.结果 相对于健康志愿者,子宫内膜癌患者血清hsa-miR-155的表达水平为（3.9±0.7）倍,两者比较,差异有统计学意义（P＜0.01）.其中,高、中、低分化子宫内膜癌患者血清hsa-miR-155的表达水平分别为（3.7±0.6）、（3.9±0.6）、（3.7±0.6）倍,3者分别比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）;子宫内膜样腺癌与非子宫内膜样腺癌患者血清hsa-miR-155的表达水平分别为（3.8±0.6）、（3.9±0.6）倍,两者比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;Ⅰ～Ⅱ、Ⅲ～Ⅳ期子宫内膜癌患者血清hsa-miR-155的表达水平分别为（2.1±0.4）、（5.6±0.8）倍,两者比较,差异有统计学意义（P＜0.01）;有、无盆腔淋巴结转移子宫内膜癌患者血清hsa-miR-155的表达水平分别为（5.5±0.5）、（1.9±0.2）倍,两者比较,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 hsa-miR-155与子宫内膜癌的发生、转移密切相关,有可能成为判断子宫内膜癌疗效及预后的潜在生物学指标.
- 谭志琴刘伏香唐海林苏琦
- 关键词：子宫内膜肿瘤微RNAS
- Chk1 siRNA转染对人胃癌BGC823细胞生长及周期的影响
- 目的:观察Chk1 miRNA转染对人胃癌BGC823细胞生长及周期的影响。方法:本研究采用RNAi技术抑制BGC823细胞中Chk1表达,运用Western blot验证,然后采用MTT实验、流式细胞术分析Chk1基因...
- 凌晖文玲刘芳李艳兰陈真伟李振丰苏琦
- 关键词：RNA干扰
- 文献传递
- 二烯丙基二硫化物对人胃癌MGC803细胞G_2/M期检查点激酶Chk1/2的影响被引量：3
- 2009年
- 目的:观察二烯丙基二硫化物(DADS)对人胃癌MGC803细胞的细胞周期检查点激酶1(Chkl)和细胞周期检查点激酶2(Chk2)的影响。方法:RT-PCR检测MGC803细胞的Chk1和Chk2激酶在mRNA水平的改变;Western blotting检测Chk1、Chk2的表达和Chk1、Chk2的磷酸化程度,免疫共沉淀检测Chk1、Chk2与细胞分裂周期蛋白25C(Cdc25C)结合情况。结果:RT-PCR检测显示,Chkl和Chk2 mRNA水平在处理组与未处理组之间无明显差异(P>0.05)。Western blotting检测显示,MGC803细胞分别受30 mg.L-1DADS刺激1 h和2 h后,与未处理组相比,总Chk1和Chk2蛋白表达在细胞处理前后均无明显改变(P>0.05);但处理组细胞Chk1磷酸化程度明显增加,并呈时间依赖性(P<0.01),而Chk2在处理组与未处理组间磷酸化程度无明显差异(P>0.05)。免疫共沉淀分析表明,MGC803细胞中DADS能促进Chk1与Cdc25C结合,而对Chk2与Cdc25C结合无影响。结论:DADS可能是通过激活Chk1引起人胃癌MGC803细胞G2/M期阻滞。
- 凌晖吉晓霞文玲陆丽峰王莉周建国董琳夏红苏琦
- 关键词：MGC803细胞二烯丙基二硫化物
- MCL1蛋白在胃癌中的表达及临床意义被引量：6
- 2008年
- 目的:MCL1(myeloid cell leukemia-1)与多种恶性肿瘤的发生、发展及转移相关。本文从临床样本和细胞水平检测胃癌组织中MCL1蛋白的表达水平,探讨MCL1蛋白在胃癌发生、发展中的作用。方法:采用S-P免疫组化法检测正常胃黏膜、癌旁胃黏膜和胃癌组织芯片中MCL1蛋白的表达,Western blot检测MCL1蛋白在人胃癌BGC823、SGC7901、MKN28细胞中的表达。结果:免疫组化结果显示,MCL1蛋白表达定位于细胞的胞浆,着色呈黄色至棕黄色;正常胃黏膜、癌旁胃黏膜、胃癌中MCL1蛋白阳性表达率分别为18.18%(4/22)、54.17%(26/48)、83.33%(75/90);MCL1蛋白在胃癌中的表达高于癌旁胃黏膜及正常胃粘膜,癌旁胃黏膜与正常胃粘膜MCL1蛋白表达亦具有明显差异(P<0.05);MCL1蛋白阳性表达率在伴淋巴结转移组为93.48%(43/46),无淋巴结转移组为72.72%(32/44),两者差异有显著性意义(P<0.05);而与性别、年龄和肿瘤大小无关。S-P免疫组化法与Western blot结果显示MCL1蛋白表达与胃癌分化程度呈负相关。结论:MCL1蛋白表达与胃癌发生、分化程度和淋巴结转移相关。
- 谭晖吉晓霞陆丽峰石莺凌晖苏琦
- 关键词：组织芯片胃癌
- Mcl-1在二烯丙基二硫诱导人白血病HL-60细胞G_2/M阻滞中的作用被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨Mcl-1在二烯丙基二硫(DADS)诱导人白血病HL-60细胞周期阻滞过程中的作用。方法:CCK-8检测DADS抑制HL-60细胞的作用;流式细胞术观察DADS对HL-60细胞的周期阻滞效应;West-ern blotting分析DADS处理HL-60细胞后Mcl-1、PCNA(细胞核增殖抗原)、CDK1(周期依赖激酶1)表达情况;RNAi干扰Mcl-1观察Mcl-1对白血病细胞周期的影响;免疫共沉淀分析Mcl-1与PCNA、CDK1结合作用。结果:CCK-8比色结果显示,15、30、60、120、240μmol/L DADS处理HL-60细胞,细胞增殖抑制率分别为31.15%、55.88%、66.14%、75.29%、80.35%,呈浓度依赖性增加(P<0.05)。流式细胞术检测显示,60μmol/L和120μmol/L DADS作用HL-60细胞24 h和48 h后,呈时间和浓度依赖性诱导HL-60细胞G2/M期阻滞(P<0.05)。Western blotting分析发现60μmol/LDADS处理HL-60细胞后PCNA、Mcl-1、CDK1表达下调(P<0.05)。Mcl-1基因沉默24 h后G2/M期百分率增加到19.4%,与对照组比较有显著差异(P<0.05)。而Mcl-1基因沉默后加入60μmol/L DADS作用时,G2/M期百分率比60μmol/L DADS处理组增加6.0%(P<0.05)。免疫共沉淀发现,HL-60细胞中存在Mcl-1与PCNA、CDK1的相互结合,DADS处理HL-60细胞后Mcl-1与PCNA、CDK1的结合作用减弱。结论:DADS能诱导HL-60细胞增殖抑制和G2/M阻滞,其抑制增殖作用与PCNA表达下调有关。Mcl-1基因沉默可增强DADS对HL-60细胞G2/M期阻滞作用。
- 吉晓霞谭晖易岚唐章文唐仪文玲苏琦
- 关键词：MCL-1白血病G2/M期阻滞二烯丙基二硫SIRNA
