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贵州省科技厅工业攻关项目(2009): 作品数：18 被引量：66H指数：5; 相关作者：王建怡胡晓万兴娄磊王文平更多>>; 相关机构：贵州省人民医院贵州大学贵州省发酵工程与生物制药重点实验室更多>>; 发文基金：贵州省科技厅工业攻关项目贵州省优秀科技教育人才省长资金项目贵州省农业科学院专项资金项目更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程生物学更多>>

论苗医对股骨头坏死诊疗的认识: 2011年; 股骨头坏死是一种较为常见,致残率极高的疾病,除创伤外,非创伤病例的病因尚未明确,故在保守治疗上难以取得满意的疗效。近年来苗医药以简、便、验、廉的特点逐渐受到世人的关注,其对股骨头坏死的治疗方法逐步受到重视。本文应用苗医理论,阐述苗医对股骨头坏死的病因、病机以及治疗方法的认识,以期为股骨头坏死的治疗提供另一种诊疗方法。; 徐航施文甫郑曙光; 关键词：苗医股骨头坏死病因病机

水泥基浆材室内试验及其边坡加固应用研究: 2015年; 边坡常伴随崩塌、滑坡和泥石流等灾害,严重危害着工程周围群众的生命财产安全,研究边坡加固意义重大。将注浆液压入破碎边坡内部,通过对软弱岩土体的加固可提高边坡稳定性。通过室内试验,确定了5种水泥基注浆材料的最佳配比、物理力学性能和初凝终凝时间。在推导了注浆压力和注浆扩散半径的公式后,结合溆怀高速边坡加固工程实践,提出并实施了具体注浆加固方案。最后,通过数值模拟和现场检测对注浆加固效果进行了验证。结果表明：注浆改善了土层物理力学性质,提高了土体强度及承载力,水泥黄砂粉煤灰注浆加固切实可行,效果显著。; 黄晴饶军应谢涛刘强; 关键词：边坡工程水泥基注浆数值模拟

雌激素对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的治疗作用及对基质金属蛋白酶-9表达的影响: 2011年; 目的探讨雌激素对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠中枢神经系统（CNS）中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的影响。方法用MOG35-55多肽诱发60只EAE小鼠模型，做去卵巢术。分为治疗组和对照组，治疗组予雌激素治疗。比较2组EAE小鼠的临床症状评分。取脑和脊髓，行HE染色观察各组EAE小鼠炎症反应；实时荧光定量PCR及免疫荧光染色法检测各组EAE小鼠CNS中MMP-9的表达。结果治疗组EAE小鼠与对照组相比临床症状减轻（治疗组3．23±0．83，对照组1．62±1．00，t=3．811，P〈0．05）、发病率降低（治疗组8／30，对照组28／30）；HE染色显示治疗组炎症细胞浸润（急性期0．895±0．206，缓解期0．752±0．302，慢性期0．732±0．183）较对照组（急性期3．472±0．635，缓解期2．881±0．662，慢性期1．891±0．482）减少（t=8．622、6．543、5．027，均P〈0．01），实时荧光定量PCR及免疫荧光染色结果示治疗组EAE小鼠CNS中MMP-9表达降低。结论雌激素能抑制EAE小鼠CNS中MMP-9的表达，减轻EAE小鼠临床症状及炎症反应。; 胡晓朱加应黄伟琨万兴王建怡; 关键词：脑脊髓炎雌激素类基质金属蛋白酶9 小鼠

贵州甘薯地方品种的性状鉴定与利用评价被引量：12: 2011年; 为探明贵州甘薯地方品种资源的特性,采用田间比较鉴定、室内检测分析等方法对贵州地方甘薯品种的地上及地下部分性状、产量、烘干率、熟食味和块根成分等方面进行了研究。结果表明:贵州省独特的立体气候,造就了丰富的甘薯资源品种;从熟食味和块根成分看,紫云红心薯、凯里板栗薯的各项指标较好;从鲜薯产量看,道真白皮苕最高。研究结果可为新品种的选育奠定基础。; 李云耿广东涂刚; 关键词：甘薯品种性状

小鼠雌激素受体α基因重组腺病毒载体的构建及鉴定被引量：2: 2009年; 目的:构建C57BL/6小鼠雌激素受体α(Esr1)重组腺病毒表达载体,扩增并纯化重组腺病毒颗粒.方法:采用RT-PCR方法从C57BL/6小鼠卵巢细胞扩增目的Esr1 CDS区基因片段,至pMD19-TSimple载体后测序鉴定.亚克隆Esr1CDS区基因片段至腺病毒穿梭质粒pDNR-CMV,再与骨架质粒pLP-Adeno-X-CMV在感受态大肠杆菌ElectroMAXTMDH10BTMCells中进行同源重组获得腺病毒载体质粒Adeno-Esr1,PacI酶切线性化后脂质体法转染HEK293细胞进行包装、扩增,测定感染性滴度,获得重组腺病毒Ad-Esr1.将病毒感染HEK293细胞,Western Blot检测Esr1蛋白表达.结果:测序证实提取的Esr1 CDS区基因序列完全正确;测序及酶切鉴定均表明重组腺病毒载体构建成功;感染性滴度为6.4×1013(pfu/L),Western Blot检测Ad-Esr1感染的HEK293细胞能表达Esr1蛋白,而未感染的HEK293细胞蛋白不表达.结论:成功构建了C57BL/6小鼠Esr1基因重组腺病毒载体,为进一步研究Esr1在神经系统中生物学功能及对神经系统疾病的基因治疗奠定了基础.; 胡晓万兴娄磊王建怡; 关键词：雌激素受体Α 腺病毒载体基因治疗

小鼠雌激素受体α重组慢病毒的构建及其感染神经细胞的鉴定被引量：3: 2011年; 目的构建携带C57BL/6小鼠雌激素受体α(estrogen receptorα,Erα)的重组慢病毒,感染原代培养的小鼠神经细胞,观察是否能提高Erα的表达,为进一步研究Erα与神经系统疾病的关系奠定基础。方法将Erα基因片段插入慢病毒主体载体LV-GFP-flag,构建重组慢病毒载体LV-Erα-flag。通过琼脂糖凝胶电泳(agarose gel electrophoresis,AGE)、基因测序验证后,将LV-Erα-flag与包装质粒pHelper1.0、pHelper2.0共同转染293T细胞,测定病毒滴度,获得携带Erα基因的重组慢病毒V-Erα-flag。无血清培养C57BL/6小鼠的神经细胞,对照病毒V-GFP-flag感染神经细胞,在荧光显微镜下每天观察荧光表达情况,用流式细胞仪检测感染效率和凋亡率以获得最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)。然后用最佳MOI值的重组慢病毒V-Erα-flag感染神经细胞,采用实时定量PCR、蛋白质印迹方法检测感染后细胞中Erα的转录和蛋白表达水平。结果 AGE及测序鉴定均表明重组慢病毒载体构建成功,包装、扩增后得到V-Erα-flag,感染滴度为2×108 TU/ml;MOI=5的对照病毒V-GFP-flag能感染神经细胞,感染效率达(89.8±4.03)%,而凋亡率仅为(3.6±0.29)%。神经细胞至少能存活8周,在此期间GFP能持续表达,说明慢病毒能有效而稳定感染神经细胞。用MOI=5的V-Erα-flag感染神经细胞后,能显著增强神经细胞中的ErαmRNA和蛋白表达水平。结论成功构建了携带Erα基因的重组慢病毒,其能成功感染神经细胞,使ErαmRNA和蛋白表达水平增高。; 胡晓王建怡袁军万兴黄伟琨秦新月; 关键词：重组慢病毒神经元

选择性雌激素受体调节剂对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的抗炎机制研究被引量：1: 2010年; 目的探讨选择性雌激素受体调节剂(SERM)减轻实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)炎症反应的可能机制。方法用MOG35-55多肽诱发60只EAE小鼠模型,做去卵巢术。分为治疗组和对照组(n=30),治疗组予SERM(雷洛昔芬)治疗。比较2组EAE小鼠的临床症状评分。取脑和脊髓组织,行H-E染色、luxolfastblue(LFB)-H-E染色观察病理学改变;实时荧光定量PCR及ELISA法检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)水平;蛋白质印迹分析检测髓鞘碱性蛋白(MBP)表达量,分析脱髓鞘情况。结果治疗组EAE小鼠与对照组相比,治疗组临床症状减轻(P<0.01)、发病率降低(P<0.05);H-E染色显示治疗组炎细胞浸润减少(P<0.05);LFB-H-E染色结果和MBP表达量显示治疗组脱髓鞘减轻(P<0.05);实时荧光定量PCR及ELISA结果示治疗组脑和脊髓组织中MMP-9、TNF-α、IFN-γ表达降低而IL-4增加(P<0.05,P<0.01)。结论 SERM可能通过降低MMP-9、TNF-α、IFN-γ表达,增加IL-4表达,从而减轻EAE小鼠炎症反应。; 胡晓娄磊袁军万兴王建怡秦新月; 关键词：实验性自身免疫性脑脊髓炎选择性雌激素受体调节剂炎症

贵州甘薯地方品种的生长分析被引量：1: 2014年; 以甘薯品种徐薯18为对照(CK),采用生长分析法,通过田间试验,对贵州6个甘薯地方品种的生长性能进行了分析。结果表明:品种"道真白皮苕"的块根和茎叶鲜重明显高于CK的;品种"道真白皮苕"、"紫云红心薯"的干物质积累量、LAI、RGR及NAR均明显高于CK的。因此在供试的6个甘薯地方品种中,道真白皮苕和紫云红心薯的物质生产性能较优。; 李云周良兴宋吉轩何自强; 关键词：甘薯

野木瓜的资源状况与食用加工研究综述被引量：14: 2010年; 为了对野木瓜这一特色资源的进一步深层次开发利用提供参考,综述了野木瓜种质资源,活性成分和保健功效,介绍了野木瓜饮料、果脯、保健软糖、野木瓜酱菜等几种制品的制作方法。; 吴国卿王文平陈燕; 关键词：野木瓜活性成分保健食用价值

雌激素受体α对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠TIMP-1及TIMP-2表达的影响被引量：4: 2013年; 目的以实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)作为多发性硬化(multiple sclerosis,MS)的动物模型,初步探讨雌激素和雌激素受体α(estrogen receptorα,Erα)在EAE中的抗炎作用及其作用机制。方法在小鼠侧脑室立体定位注射Erα重组慢病毒,鉴定Erα重组慢病毒在体感染中枢神经系统(central nervous system,CNS)的最佳剂量。将雌二醇及Erα重组慢病毒干预EAE小鼠与对照组比较,观察各组小鼠的临床症状及体重的变化,通过H&E染色及Luxol fast blue-H&E染色对比各组炎症反应及脱髓鞘情况,以实时荧光定量PCR及Western blot方法检测金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue-inhibitors of matrix metalloprotein-ase-1,TIMP-1)及TIMP-2。结果 15μl Erα重组慢病毒能感染小鼠CNS。与对照组相比,雌二醇及过表达Erα可以降低EAE小鼠的发病率、体重丢失及临床症状,减轻脑和脊髓中炎性细胞浸润和神经纤维的髓鞘脱失,在发病急性期增加TIMP-1及TIMP-2,减轻在缓解期TIMP-1、TIMP-2的病理性表达增高。结论雌激素及Erα可以抑制EAE的炎症反应,该作用机制可能是通过增加EAE小鼠急性发病期脑组织中TIMP-1及TIMP-2实现的。; 朱加应王建怡李玫瞿浩胡晓; 关键词：多发性硬化实验性自身免疫性脑脊髓炎雌激素雌激素受体Α 金属蛋白酶组织抑制因子

贵州省科技厅工业攻关项目(2009)

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