陕西省科技攻关计划(2007K14-05)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 相关作者：周熙惠史瑞明谢坤霞易小青尹春燕更多>>
- 相关机构：西安交通大学医学院第一附属医院西安交通大学医学院第二附属医院西安交通大学更多>>
- 发文基金：陕西省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 新生儿惊厥相关基因KCNQ2定点突变及其蛋白表达的研究被引量：2
- 2011年
- 目的在收集的1个良性家族性婴儿惊厥家系中发现KCNQ2基因c.812G>T(p.G271V)突变,探讨c.812G>T突变体及其真核表达载体的构建方法,并观察其在人胚肾(HEK)293细胞中的表达。方法利用重叠延伸PCR和限制性内切酶法构建KCNQ2基因c.812G>T突变体真核表达载体pcDNA3.0-c.812G>T-KCNQ2,用脂质体转染法将KCNQ2质粒(野生型pcDNA3.0-KCNQ2或突变型pcDNA3.0-c.812G>T-KCNQ2)与荧光真核表达载体pRK5-GFP共转染HEK293细胞,激光共聚焦显微镜下观察HEK293细胞,免疫荧光化学法检测蛋白质表达。结果构建的突变体经DNA直接测序示KCNQ2基因cDNA第812位碱基G变为T,突变体在HEK293细胞中成功表达,野生型和突变型基因的蛋白质都在细胞膜上表达,提示KCNQ2钾通道孔区的突变c.812G>T并不影响蛋白的正常表达。结论成功构建KCNQ2突变基因真核表达载体,并在HEK293细胞中表达KCNQ2蛋白,为突变型KCNQ2基因的功能研究及癫癎的分子发病机制研究奠定基础。
- 周熙惠惠智艳史瑞明宋红霞张葳刘俐
- 关键词：定点突变真核表达载体
- 高脂饮食对幼鼠肿瘤坏死因子-α、抵抗素及胰岛素受体表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的研究高脂饮食对幼鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、抵抗素水平和胰岛素受体表达的影响及其与胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的相关性。方法 60只SD幼年大鼠随机分为高脂组和对照组,分别采用高脂饲料和普通饲料喂养。分别在喂养3周、6周、9周末测体质量、体长和血糖;放射免疫法测定其血清胰岛素(INS)和TNF-α水平;酶联免疫法测定其抵抗素;免疫组织化学法测定其胰岛素受体(INSR)。结果高脂组INS在3周、6周和9周分别为(16.35±1.77)mIU.L-1、(22.42±2.46)mIU.L-1和(34.25±3.32)mIU.L-1,对照组分别为(10.28±1.49)mIU.L-1、(9.76±1.23)mIU.L-1和(9.87±1.11)mIU.L-1;高脂组HOMA-IR在3周、6周和9周分别为3.57±1.03、4.94±1.86和7.81±1.01,对照组为2.19±0.13、2.12±0.22和2.20±0.19,二组比较差异均有统计学意义(Pa<0.01)。高脂组肝脏细胞INSR表达比对照组显著降低(P<0.05),但肌肉细胞INSR表达与对照组无统计学差异。高脂组TNF-α和抵抗素水平均与HOMA-IR呈正相关。结论高脂喂养可诱导幼年大鼠高胰岛素血症,HOMA-IR增加,胰岛素敏感性下降,其机制与TNF-α、抵抗素分泌增高及INSR表达降低密切相关。
- 肖延风谢坤霞易小青徐尔迪尹春燕常明
- 关键词：高脂膳食胰岛素受体胰岛素肿瘤坏死因子-Α
- 良性家族性婴儿惊厥一家系遗传连锁分析和基因定位研究被引量：4
- 2010年
- 目的对1个良性家族性婴儿惊厥(benign familial infantile convulsions,BFIC)家系进行遗传连锁分析和基因定位,以探讨BFIC的分子发病机制。方法调查一个4代BFIC家系。选择位于染色体19q12～q13.1的D19S245和D19S250,16p12～q12的D16S3131和D16S3133,2q24的D2S156和D2S286,20q13.3的D20S480和D20S481共8个短串连重复序列(shorttandemrepeat,STR)作为遗传标记,应用聚合酶链反应(PCR),变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和银染技术,采用LINKAGE软件包中的MLINK程序计算LOD值,根据LOD值判断连锁关系。结果当重组率在0.000至0.01之间,在染色体19q12～13.1、16p12～q12及2q24区域的遗传标记LOD值均小于-2.0;在20q13.3(D20S481)区域,当重组率为0.000时,LOD值为0.3,当重组率为0.01时,LOD值为0.25。结论排除该家系与染色体19q12～13.1、16p12～q12及2q24区域的遗传标记存在连锁关系的可能;在20q13.3区域,虽然没有显著性意义,但不能排除与20q13.3区域连锁的可能。
- 周熙惠马爱群刘小红黄辰张艳敏史瑞明
- 关键词：惊厥基因型
- 早期高脂膳食对幼鼠胰岛细胞结构和胰岛素敏感性的影响
- 2010年
- 目的研究幼年期高脂饮食对糖代谢、胰岛素敏感性和胰岛β细胞结构的影响。方法 60只雄性幼年SD大鼠随机分为高脂组和对照组,分别采用高脂和普通饲料喂养。在喂养3、6、9周末,测体重、身高,取内脏脂肪称重;测定空腹血糖和空腹血清胰岛素;电镜观察胰腺超微结构变化。结果自4周末高脂组体重显著高于对照组(P<0.05),其内脏脂肪重量自3周末显著高于对照组(P<0.05),均随时间延长其差异更显著(P<0.01);两组空腹血糖于第3、6、9周末比较差异均无统计学意义;高脂组空腹胰岛素水平和HOMA-IR指数均显著高于对照组(P<0.01);高脂饲养6周时,幼鼠胰岛β细胞粗面内质网扩张,线粒体轻度肿胀。结论生命早期高脂膳食可诱导幼鼠胰岛素敏感性下降、胰岛素抵抗;β细胞内质网扩张,可能是肥胖损伤β细胞的早期信号。
- 谢坤霞肖延风徐尔迪尹春燕易小青常明
- 关键词：高脂膳食胰岛素敏感性Β细胞
- 深低温停循环手术中肺部温度变化初步观察被引量：1
- 2009年
- 目的观察深低温停循环过程中肺部温度的变化规律,为深低温停循环过程中肺保护提供参考。方法4例在深低温停循环下行主动脉弓部手术的患者纳入本研究,全麻完成后,经右侧颈外静脉穿刺置入Swan-Ganz导管,导管气囊漂入肺动脉,测试可以测定肺毛细血管嵌压后,气囊充气,远端温度探头可以测定手术过程中肺深部温度,同时监测鼻咽温度和直肠温度。结果4例深低温停循环手术患者的肺部温度可降低到16.6℃,接近鼻咽温度16.4℃,在降温过程中比鼻咽温略低,在复温过程中比鼻咽温略高。结论深低温停循环过程中,肺部温度可达到深低温要求。
- 赵璧君金振晓陈敏朱萧玲雷兰萍周和平易定华
- 关键词：体外循环深低温停循环
