国家重点基础研究发展计划(G200016201)
- 作品数：12 被引量：130H指数：7
- 相关作者：康振生王金生曹丽华黄丽丽郑文明更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学南京农业大学南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 植物抗真菌病害基因工程研究进展被引量：4
- 2004年
- 在寄主与病原互作的研究中,通过分子生物学与生物技术成功分离和克隆了大量植物防御相关基因,这些基因的表达产物——蛋白、肽或抗菌素直接对病菌有毒害作用或在侵入位点抑制病菌的生长;直接抑制病菌的毒性产物或增强植物结构抗性基因,直接或间接活化植物整体防御反应;增强过敏性坏死反应中与无毒基因互作的抗性基因。将这些基因引入植物,转基因植物显示出对病原真菌明显的抑制作用,在提高植物抗性方面具有广阔的发展前景。
- 景岚康振生左豫虎
- 关键词：植物抗性基因真菌病害基因工程
- 从水稻白叶枯病菌分离的avr Bs3家族新成员avr Xa3是具双重功能的无毒基因被引量：10
- 2004年
- 以转座子标签法从水稻白叶枯病菌 (XanthomonasoryzaepvoryzaeDye ,Xoo)JXOⅢ基因组文库中筛选到两个阳性克隆 pUAV4 5和pUAV4 7,其中 pUAV4 5与avrXa10探针进行Southern印迹杂交后显示出同源性 .pUAV4 5携带2 5 .4kb的Xoo基因组DNA .将具有与avrXa10有杂交信号的亚克隆 pUAV5K(5 .7kb)转入PXO99中发现 ,接合子PXO99/ pUAV5K与PXO99/ pUAV4 5一样在水稻WaseAikoku 3(Xa3)上表现为致病性明显降低 ;而在含Xa10抗病基因的水稻Cas2 0 9上 ,则致病性增强 .携 5 .7kb的亚克隆 pUAV5K经序列测定和分析后发现 ,其中含有一个全长2 5 98bp的开放阅读框 (ORF) ,包含有 8.5个 34个氨基酸的直接重复单元 ,1个亮氨酸拉链结构域(LZ) ,3个细胞核定位信号 (NLSs)序列以及C端的酸性转录激活区域 (AAD) ,与avrXa10高度同源 .据此认为 ,该ORF是水稻白叶枯病菌JXOⅢ菌株中具双重功能即无毒性功能和侵袭力 (症状表达 )功能的无毒基因avrXa3,为avrBs3(avr/ pth)家族的一个新成员 .
- 李平龙菊英黄迎春张燕王金生
- 关键词：水稻白叶枯病菌转座子标签法
- 小麦条锈菌条中31号生理小种SCAR检测标记的建立被引量：31
- 2005年
- 建立小麦条锈菌Pucciniastriiformisf.sp.tritici生理小种的快速分子检测技术对我国小麦条锈病的监测和防治策略的制定具有重要价值,本文首次报道了利用SCAR—PCR技术进行条锈菌生理小种分子检测的方法。通过对我国目前主要优势小种条中31号RAPD片段的规模筛选,在对特异片段回收、克隆、测序的基础上,设计特异PCR引物,成功获得了条中31号生理小种专化的SCAR检测标记。
- 曹丽华康振生郑文明黄丽丽李振岐
- 关键词：生理小种小麦条锈菌SCAR种条特异片段小麦条锈病
- 小麦条锈菌条中29号生理小种SCAR检测标记的建立被引量：23
- 2005年
- 用210条随机引物对中国小麦条锈菌(Pucciniastriiformisf.sp.tritici)5个主要生理小种进行了RAPD分析,寻找到了2个条中29号特异性的RAPD标记。根据其中一个特异片段的测序结果,设计了特异PCR引物,成功获得了条中29号小种专化的SCAR标记。
- 康振生曹丽华郑文明黄丽丽李振岐
- 关键词：小麦条锈菌RAPDSCAR生理小种条锈病
- 水稻黄单胞细菌的无毒基因被引量：5
- 2004年
- 水稻黄单胞细菌白叶枯致病变种与水稻品种的互作关系符合基因 基因假说。病菌无毒基因 (A)与寄主抗病基因(R)显性互作表现抗性反应。许多黄单胞细菌的无毒基因属于avrBs3/ pth家族。已报道的avrxa5、avrXa7、avrXa10以及本实验室从水稻白叶枯病菌菌株JXOⅢ克隆的avrXa3均属于avrBs3/ pth家族。最近的研究还发现 ,PR6菌株中有2个硫同化基因簇成员raxP和raxQ对决定avrXa2 1活性是必需的。笔者在研究无毒基因avrXa3时 ,从JXOⅢ的基因组文库克隆中发现一个与甘蓝黑腐黄单胞菌烯醇化酶 磷酸酶基因的同源序列也具有无毒基因活性。在介绍黄单胞细菌无毒基因类群和avrBs3/ pth家族基因结构与功能的同时 。
- 李平龙菊英张燕高学文王金生
- 关键词：水稻植物病原细菌水稻白叶枯病菌无毒基因
- 水稻条斑病细菌dsp基因的克隆被引量：1
- 2004年
- 用硫酸二乙酯 (DES)化学诱变水稻条斑病细菌RS1 0 5菌株 ,获得一株dsp基因突变体AM1 1。该突变体的菌落形态、颜色、胞外多糖产生能力以及胞外酶 (淀粉酶、蛋白酶、果胶酶和纤维素酶 )的活性与野生型菌株RS1 0 5无明显差异。将水稻条斑病细菌RS1 0 5基因文库 1 2 0 0个克隆逐个导入dsp基因突变体AM1 1中 ,致病性测定结果表明 ,dsp基因阳性克隆pC1 0 1可以恢复AM1 1在水稻上的致病性。酶切分析显示 ,克隆pC1 0 1携 4 4 92kb的dsp基因片段。亚克隆和功能互补结果显示 ,克隆pE4 6和pE4 7均具有恢复dsp突变体AM1 1致病性的能力 ,这表明决定水稻条斑病细菌dsp表型的基因位点至少有 2个。
- 赖志兵邵敏宋从凤陈功友王金生
- 关键词：条斑病条斑病菌基因克隆致病机理化学诱变
- 小麦条锈菌基因组DNA的分离及其RAPD分析体系的建立被引量：12
- 2004年
- 对小麦条锈菌基因组DNA分离的氯化苄法和CTAB/SDS法进行了比较分析,认为后者无降解,质量高,可用于RAPD分析。试验对小麦条锈菌RAPD反应条件进行了优化,建立了标准化的小麦条锈菌RAPD反应体系,即10×ReactionBuffer2.5μL,MgCl22mmol/L,dNTPs0.15mmol/L,模板DNA40ng,引物10ng,Taq1U,ddH2O15.76μL。
- 曹丽华康振生魏国荣
- 关键词：小麦条锈菌RAPD反应体系优化条锈病
- 中国小麦条锈菌4个流行小种的RAPD标记被引量：24
- 2004年
- 以210条随机引物,对目前中国小麦条锈菌(Pucciniastriiformisf.sp.Tritici)的主要优势菌系进行了RAPD片段的规模筛选,寻找到了条中31号、条中29号、条中23号、水源类型4个流行生理小种的特异性RAPD标记。此结果表明,通过寻找小麦条锈菌生理小种的特异性RAPD片段,能够建立起中国小麦条锈菌生理小种的分子检测体系。
- 曹丽华康振生赵杰黄丽丽魏国荣
- 关键词：小麦条锈菌RAPD
- U-1分解草酸的检测及其降低草酸毒性的研究
- 2007年
- 草酸是油菜菌核病病菌(Sclerotinia sclerotiorum)致病的重要因子。以实验室分离得到的草酸分解菌U-1为材料,研究U-1分解草酸的能力及其降低草酸对油菜毒性的作用机理。检测U-1分解草酸的能力,即以草酸、U-1+草酸分别培养24 h后,利用高效液相色谱仪检测草酸的含量;研究U-1抑制草酸对油菜毒害的作用机理,即分别以清水、U-1、草酸、U-1+草酸处理油菜叶片,检测不同处理对油菜叶片中防卫反应0相关酶(PAL酶、PPO酶和PO酶)变化的影响。研究结果表明,与草酸单独处理组相比,U-1+草酸处理组草酸含量显著降低;U-1可以显著抑制草酸对油菜中PAL酶、PPO酶和PO酶活性的作用。
- 王婷王金生
- 关键词：防卫反应
- 草酸分解细菌U-1的鉴定及其分解草酸的生物学测定被引量：2
- 2007年
- 从油菜菌核病常年发病较轻的油菜根围土中分离得到1株草酸分解菌U-1。通过对这株菌株的菌落形态观察、革兰染色镜检及生理生化反应的检测,初步确定菌株为节杆菌属(Arthrobacter)的细菌。以水稻出苗实验作为体系检测U-1对草酸解毒的生物学反应,研究结果表明,U-1可以显著解除草酸对水稻出苗的抑制作用。
- 王婷王金生
