国家自然科学基金(30872462)
- 作品数：8 被引量：31H指数：3
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- 相关机构：中山大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部医药卫生科技发展研究中心项目广州市科技计划项目更多>>
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- 结直肠癌组织中GINS复合物的表达及其临床意义被引量：2
- 2011年
- 目的探讨GINS复合物在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法运用实时荧光定量PCR方法检测76例结直肠癌标本中GINS复合物4个基因PSF1、PS砣、PSF3和SLD5的mRNA表达情况．并分析其与结直肠癌患者临床病理特征及预后的关系。结果结直肠癌组织中PSF1、PSF2、PSF3和SLD5mRNA的相对表达量（0．001853±0．000651、0．007757±0．004260、0．000967±0．000481、0．003248±0．001721）均明显高于正常黏膜组织（0．000352±0．000169、0．002951±0．001216、0．000472±0．000271和0．001675±0．001156）（均P〈0．01）。PSF1mRNA表达与肿瘤大小（p〈0．01）有关；PSF2mRNA表达与患者年龄（P〈O．05）和淋巴结转移（P〈0．05）有关；PSF3mRNA表达与患者临床病理特征无关（P〉0．05）；SLD5mRNA表达与患者淋巴结转移（P〈0．01）有关。PSFl、PSF2和SLD5高表达组患者的5年生存率分别为57．1％、54．3％和54．3％，均明显低于低表达组患者的77．1％、80．O％和80．0％，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。Cox回归分析结果提示，PSFlmRNA表达是影响结直肠癌患者预后的独立因素之一（P〈0．05）。结论GINS复合物在结直肠癌组织中高表达，且与患者临床病理特征有密切关系．其中PSFlmRNA表达可作为预测结直肠癌患者预后的生物学指标。
- 卫洪波温机智魏波韩晓燕张实
- 关键词：结直肠肿瘤预后实时荧光定量PCR
- 塞来昔布增加人结肠癌细胞维甲酸敏感性的机制研究
- 2009年
- 为探讨塞来昔布对人结肠癌细胞维甲酸敏感性的作用和环氧化酶2及维甲酸受体beta在其中的作用,本研究应用MTT法和流式细胞仪分别检测细胞的增殖抑制和凋亡率,ELISA检测培养液PGE2的浓度,Westernblotting检测胞核维甲酸受体beta和环氧化酶2的表达。结果显示,塞来昔布可增强ATRA对高表达环氧化酶2的HT-29细胞和低表达环氧化酶2的SW480细胞的增殖抑制作用,增加细胞的凋亡率,提高胞核维甲酸受体beta的表达。此作用不能被外源性PGE2拮抗,也不能被另一种环氧化酶2特异抑制剂NS398复制。因此,塞来昔布可通过非环氧化酶2依赖途径增加结肠癌细胞维甲酸受体beta的表达和细胞对维甲酸的敏感性。此结果有望为临床提供可行的联合用药方案,推广维甲酸的诱导分化和凋亡治疗。
- 刘健培卫洪波郑宗珩郭卫平方佳峰
- 关键词：结肠肿瘤维甲酸塞来昔布敏感性
- 无血清培养人结肠癌球囊样细胞生物学特性研究被引量：1
- 2011年
- 目的采用无血清培养方法从人结肠癌细胞株中分选出富含肿瘤干细胞的球囊样细胞，并分析其增殖和迁移特性。方法人结肠癌细胞株HCTll6、HT29细胞在特殊配制的无血清培养基（SFM）中悬浮培养，观察球囊样细胞的生成。流式细胞仪检测结肠癌干细胞分子标记CDl33表达，利用CCK一8比色法以及Transwell小室法研究结肠癌球囊样细胞的增殖情况和迁移能力。采用成组设计资料的t检验分析检测数据。结果HCTl16、HT29细胞在SFM培养条件下可以获得可稳定传代的球囊样细胞，SFM培养下HCTll6球囊样细胞CDl33阳性细胞占75．44％±11．41％，HT29球囊样细胞CDl33阳性细胞占76．22％±14．23％。与常规含血清培养基（SSM）培养的同系细胞比较，HCTll6及HT29球囊样细胞中结肠癌干细胞分子标记CDl33阳性细胞数明显增多（t：11．43，9．17，P〈0．05），其持续增殖能力和运动迁移能力均增强。结论无血清培养获得的结肠癌球囊样细胞高表达结肠癌干细胞分子标记CDl33，且具有更强的增殖和迁移能力。它可作为进一步研究结肠癌干细胞的良好模型。
- 张实魏波黄勇韩晓燕陆慧琼卫洪波
- 关键词：结肠肿瘤肿瘤干细胞无血清培养
- 腹腔镜右半结肠癌扩大切除术意义的纷争被引量：14
- 2018年
- 随着全结肠系膜切除(CME)及扩大淋巴结清扫(D3)理念在结肠癌手术中的推广,CME及D3淋巴结清扫上取得了良好的肿瘤学和手术结果,提高生存率及无病生存率,降低局部复发率。CME手术与直肠癌术中直肠系膜全切除相似,是切除肿瘤引流区域的所有淋巴、血管和神经组织以及完整的肠系膜,腹膜和包围的筋膜。而D3淋巴结清扫也是基于相似的原则。但是,目前有证据表明CME和D3淋巴结清扫的预后获益受限于方法缺陷和一些潜在的混杂因素,需要大宗病例的前瞻随机对照临床实验进一步验证。
- 卫洪波黄江龙
- 关键词：结肠肿瘤结肠系膜淋巴结切除术
- PSF1在结肠癌组织中的表达及其对结肠癌细胞增殖的影响被引量：4
- 2013年
- 目的检测PSF1在结肠癌组织中的表达，探讨RNA干扰沉默PSF1表达对人结肠癌细胞增殖的影响及其可能的机制。方法收集2004年5月至2006年12月间经病理确诊的40例结肠癌标本．采用Westerllblot检测标本中PSF1蛋白表达水平；应用脂质体法将靶向PSF1的短发夹RNA（shRNA）干扰质粒转染人结肠癌细胞株LOVO、HT．29和HCT116，Westernblot法检测PSF1蛋白表达变化．分别应用MTY法、软琼脂克隆形成实验及荧光定量PCR检测转染PSF1shRNA干扰质粒对结肠癌细胞增殖活性、锚定非依赖性生长能力及PSF2、PSF3和SLD5mRNA表达的影响。结果结肠癌组织中PSF1蛋白相对表达量为0．485±0．113，显著高于正常黏膜组织的0．056±0．014（P〈0．01）。转染PSF1sbRNA干扰质粒后，LOVO、HT-29和HCT116细胞中PSF1蛋白表达水平均显著下降（P〈0．05），细胞增殖能力显著降低，软琼脂克隆形成率明显下降。与阴性对照组及正常生长组细胞比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。转染PSF1shRNA干扰质粒后．LOVO、HT-29和HCT116细胞中PSF2、PSF3和SLD5mRNA表达均明显下降（P〈0．05）。结论PSF1与结肠癌的发生发展具有一定关系。利用RNA干扰技术能有效抑制结肠癌细胞中PSF1表达。并抑制结肠癌细胞增殖。PSF1基因有望成为结肠癌靶向治疗的新靶点。
- 温机智韩晓燕魏波张实卫洪波
- 关键词：结肠肿瘤RNA干扰细胞增殖
- 全反式维甲酸提高人结肠癌LoVo细胞对奥沙利铂敏感性被引量：8
- 2009年
- 目的探讨全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,AT-RA)提高人结肠癌LoVo细胞对奥沙利铂的药物敏感性和机制。方法MTT法筛选ATRA和奥沙利铂实验浓度。流式细胞仪检测ATRA对细胞周期的影响。分别用ATRA、奥沙利铂、ATRA联合奥沙利铂作用LoVo细胞;MTT法检测药物抑制率,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率,原子光谱吸收仪检测细胞DNA含铂(Pt)量。结果奥沙利铂抑制LoVo细胞作用呈量效依赖;其GI50(GI,inhibit net cell growth by%)为6.5mg.L-1,主要阻滞肿瘤细胞在S期。ATRA抑制LoVo细胞作用呈时效和量效依赖。1.0μmol.L-1ATRA作用12h后G1期细胞增多;48h后伴S期、G2/M期细胞减少并明显抑制肿瘤细胞增殖;作用12h至48h后联合奥沙利铂,两药联合由相加作用转变为协同作用;联合用药后S期细胞明显增多,细胞DNA含Pt量明显增加,但不提高奥沙利铂凋亡率。结论小剂量ATRA通过改变LoVo细胞周期和提高细胞DNA含Pt量,明显增加肿瘤细胞对奥沙利铂的药物敏感性。
- 吕会增陈图锋郑宗珩韩晓燕黄勇张富城卫洪波
- 关键词：全反式维甲酸奥沙利铂人结肠癌细胞药物敏感性
- 全反式维甲酸对结肠癌Lovo细胞VEGF及其受体表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对结肠癌Lovo细胞血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体的影响,为其临床应用提供理论依据。方法 MTT法观察不同浓度ATRA对结肠癌Lovo细胞株生长的抑制作用以及对外源性VEGF刺激Lovo细胞生长的抑制作用。流式细胞仪分析ATRA作用后Lovo细胞周期变化以及细胞凋亡情况。ELISA法检测ATRA作用前后细胞培养上清液中VEGF含量变化。流式细胞仪测定Lovo细胞VEGF受体表达。结果 ATRA对Lovo细胞的生长具有抑制作用,呈时间与剂量依赖性。外源性VEGF165能刺激Lovo细胞生长,ATRA能够抑制VEGF165对细胞生长的刺激作用。随ATRA作用浓度增加,细胞周期G0/G1期细胞比例从(60.10±1.27)%增加至(84.80±1.40)%;细胞凋亡率增加至(39.79±3.96)%。ATRA能抑制Lovo细胞表达VEGF及VEGF受体,呈时间与剂量依赖性。结论 ATRA具有抑制结肠癌Lovo细胞株VEGF及其受体表达的作用,抑制肿瘤细胞的生长,可能机制为阻断VEGF自分泌及旁分泌,与促进肿瘤细胞凋亡及阻滞细胞周期有关。
- 黄江龙卫洪波韩晓燕黄勇张富程
- 关键词：全反式维甲酸LOVO细胞株血管内皮生长因子细胞周期
- 3D与2D腹腔镜直肠癌根治术中对膜解剖优势所在被引量：2
- 2020年
- 全直肠系膜切除术(TME)是治疗中低位直肠癌的金标准,要求是直视下锐性分离,将直肠连同直肠固有筋膜包被的脂肪组织、神经血管和淋巴结整体完整切除。强调脏壁层之间锐性分离,而膜解剖理论与其不谋而合。外科膜解剖概念的提出,明确了人们常说的“间隙”或“层面”,结合腹腔镜放大作用和3D腹腔镜的纵深感,将膜解剖应用于直肠手术,对系膜认识更加深刻,辨认盆底自主神经更加有效。腹膜筋膜融合退化后,在直肠后方形成疏松结缔组织所填充,在S4椎体前方融合增厚形成Waldeyer筋膜,同时将直肠后方间隙分为上方的直肠后间隙和下方的肛提肌上间隙。直肠侧方的膜解剖的关键结构是侧韧带,侧韧带正好是直肠系膜固有筋膜“门”,由髂内动脉发出的直肠中动脉,盆丛发出的直肠支与及淋巴管共同形成。Denonvilliers筋膜是腹膜的融合产物,是直肠前方膜解剖关键结构。保留Denonvilliers筋膜对降低直肠癌术后排尿和性功能障碍发生率有非常重要的意义,切开腹膜返折如位于最低处标志性“卫”氏线后方,则进入Denonvilliers筋膜的后方,可保留Denonvilliers筋膜。
- 卫洪波黄江龙
- 关键词：直肠肿瘤腹腔镜肠系膜全直肠系膜切除术
