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胃癌组织来源MSC以旁分泌方式促进胃癌细胞系HGC-27增殖、迁移及上皮-间质转化被引量：2: 2014年; 目的研究胃癌组织来源的间充质干细胞(GC-MSC)培养上清液对胃癌细胞系HGC-27的作用。方法以GC-MSC培养的上清液和HGC-27常规培养基等体积混合配制后培养的HGC-27作为处理组;GC-MSC培养基与高糖DMEM培养基等体积混合配制后培养的HGC-27作为对照组。收集处理组与对照组中HGC-27细胞,用平板克隆形成和MTT增殖试验检测细胞增殖能力;Transwell法检测细胞迁移能力;western blot检测细胞中上皮-间质转化(EMT)相关蛋白质的表达。结果处理组HGC-27细胞的克隆形成能力、细胞增殖活力和迁移能力均明显强于对照组(P均<0.01)。EMT相关蛋白检测分析显示,处理组HGC-27细胞中vimentin、N-cadherin和α-SMA蛋白表达水平显著增高,E-cadherin蛋白表达显著降低(P均<0.01)。结论GC-MSC可通过旁分泌的作用方式促进胃癌细胞的增殖、迁移及EMT。; 王梅黄锋朱梦楚蔡洁杨婷婷张强钱晖许文荣; 关键词：旁分泌胃癌上皮-间质转化

miR-1288调控骨髓间质干细胞促进胃癌细胞迁移被引量：3: 2016年; 目的探讨miR-1288在胃癌细胞培养上清诱导后骨髓间质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cell,BMMSC)中的表达情况及其调控BMMSC对胃癌细胞迁移能力的影响。方法采用SGC-7901、MGC-803和HGC-27 3种胃癌细胞培养上清分别处理BMMSC,实时荧光定量PCR检测处理前后BMMSC中miR-1288的表达水平。采用寡核苷酸片段NC-mimics和miR-1288-mimics转染BMMSC,Transwell试验检测转染后BMMSC对HGC-27细胞迁移能力的影响。收集胃炎和胃癌组织标本,实时荧光定量PCR检测组织中miR-1288的表达水平。结果经SGC-7901、MGC-803和HGC-27胃癌细胞上清处理后BMMSC中miR-1288的表达水平分别是对照组的(5.91±0.25)倍(t=15.55,P<0.01)、(9.69±0.62)倍(t=13.34,P<0.01)和(24.29±2.69)倍(t=8.631,P<0.01)。miR-1288-mimics转染组迁移细胞数量为(623.3±26.03)个,明显高于NCmimics对照组[(326±32.08)个],差异有统计学意义(t=7.197,P<0.01)。胃癌组织中miR-1288的表达水平显著高于胃炎组织(P<0.05)。结论胃癌上清诱导后BMMSC和胃癌组织中异常高表达miR-1288,其可参与调控胃癌细胞的迁移。; 田伊卿曹晓莉李权王姣姣许文荣王梅; 关键词：骨髓间质干细胞胃癌迁移

DiO标记对人骨髓间充质干细胞生物学功能的影响: 2016年; 目的用细胞膜绿色荧光探针Di O标记人骨髓间充质干细胞(h BMMSCs),探讨其对h BMMSCs生物学功能的影响。方法采用Ficoll密度梯度离心法分离、培养h BMMSCs;流式细胞术检测Di O对h BMMSCs的标记效率;通过Transwell迁移实验、平板克隆实验、生长曲线分析、成脂及成骨诱导实验分别检测Di O对h BMMSCs迁移、增殖和多向分化能力的影响。结果Di O对h BMMSC的标记效率可达(99.5±0.4)%;Transwell迁移实验、平板克隆实验、生长曲线分析、成脂及成骨诱导实验结果表明,与未标记h BMMSCs相比,标记后的h BMMSCs迁移、增殖及成脂、成骨分化能力未见明显改变,差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论经Di O处理未见明显影响h BMMSCs的生物学功能,可做为安全、有效的h BMMSCs体外标记绿色荧光染料。; 朱梦楚高健蔡静王哲钱晖许文荣王梅; 关键词：骨髓间充质干细胞细胞标记

青年教师实验诊断学课程的教学体会被引量：5: 2014年; 青年教师作为实验诊断学教学的后备力量,在教学过程中发现教学内容、教学方法与师资队伍方面存在着问题。针对这些问题,结合教学实践,从教学的各个环节展开探讨,不断寻找并探索适合教与学的方法与途径,以期提高实验诊断学的教学质量和教学水平。; 王梅胡嘉波许文荣王婷周红孙晓春; 关键词：实验诊断学青年教师

巨噬细胞活化的huc-MSC对胃癌细胞PDGFD的调控作用: 2014年; 目的探讨巨噬细胞(THP-1)活化的人脐带间充质干细胞(huc-MSC)对胃癌细胞系HGC-27中血小板源性生长因子(PDGFD)的调控作用。方法将THP-1与huc-MSC直接共培养,观察共培养前后细胞的形态变化;western blot检测huc-MSC中肿瘤相关成纤维细胞(CAF)相关指标;将HGC-27分为阴性对照组、huc-MSC间接共培养组及THP-1活化的huc-MSC间接共培养组,ELISA法检测各组上清液中PDGFD含量;免疫荧光法检测HGC-27中PDGFD的表达;western blot检测HGC-27中JAK1-STAT3通路活化情况。结果与huc-MSC直接共培养后THP-1细胞部分呈纤长形。huc-MSC中E-cadherin蛋白表达下调(P<0.01),N-cadherin(P<0.01)和vimentin(P<0.01)表达上调,呈现CAF样活化。与阴性对照组比较,huc-MSC和THP-1活化后huc-MSC均促进HGC-27中PDGFD的表达,THP-1活化的huc-MSC较huc-MSC促进作用更显著(P<0.01)。与阴性对照组比较,huc-MSC和THP-1活化后huc-MSC处理组HGC-27中JAK1和STAT3蛋白水平均显著增加(P<0.01),THP-1活化后huc-MSC组较huc-MSC组增加更显著(P<0.01)。结论 THP-1促进huc-MSC呈CAF样活化,可上调胃癌细胞HGC-27中PDGFD的表达,可能与JAK-STAT3通路活化有关。; 王梅杨婷婷蔡洁黄锋朱梦楚钱晖许文荣; 关键词：脐带间充质干细胞巨噬细胞胃癌血小板源性生长因子

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江苏省自然科学基金(BK20130540)