国家自然科学基金(30472259)
- 作品数：31 被引量：120H指数：7
- 相关作者：李大金王文君周文江王凌朱影更多>>
- 相关机构：复旦大学上海医学院复旦大学上海交通大学附属第六人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科委科技攻关项目上海市卫生局中医药科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 细胞因子对骨代谢的调节作用被引量：1
- 2008年
- 近年来人们对免疫学及骨代谢中的关键细胞及分子机制的研究有了长足的发展。本文就骨免疫学中细胞因子的研究进展作一综述，旨在为骨与免疫系统相关疾病的防治提供新的策略。
- 王凌李大金
- 关键词：细胞因子成骨细胞破骨细胞
- 脱氢表雄酮抑制成骨细胞凋亡的实验研究被引量：5
- 2005年
- 王玉东罗来敏童剑倩李大金
- 关键词：成骨细胞凋亡脱氢表雄酮绝经后骨质疏松胰岛素样生长因子1雌激素水平肾上腺皮质
- Toll样受体在成骨细胞和破骨细胞中的表达及作用被引量：1
- 2005年
- Toll样受体(TLRs)在早期固有免疫中对入侵病原微生物的识别发挥重要作用,并在固有免疫和适应性免疫中起着枢纽作用。近来研究发现,TLRs在成骨细胞(OB)及破骨细胞(OC)分化、成熟及其功能中具有重要的调控作用。OC骨吸收与OB骨形成构成了持续不断的骨重建过程。阐明TLRs在OB和OC发生和功能中的作用,可加深对骨代谢相关疾病发生机制的认识并为开发针对性药物提供新的方法。
- 王凌李大金
- 关键词：TOLL样受体成骨细胞破骨细胞代谢相关疾病固有免疫TLRS
- 补肾宁心方药物血清对鼠成骨细胞的增殖周期与凋亡的影响被引量：7
- 2006年
- 目的：探讨补肾宁心方药物血清对成骨细胞（osteoblast，OB）增殖周期与凋亡的调控作用。方法：颅骨酶解法培养OB，体外模拟雌激素撤退现象，分别予以5％～30％系列浓度的对照鼠血清或中药血清培养，流式细胞仪分析DNA含量，Annexin V—FITC／PI双标记流式细胞仪分析细胞早期凋亡，透射电镜观察OB超微结构。结果：DNA含量分析显示与相应对照组相比，10％-20％药物血清组的S期和G2／M期细胞百分比明显增加，G0／G1期细胞百分比明显下降，细胞增殖指数（PI）显著增加（分别为P〈0．05和P〈0．01）；10％-20％的药物血清还具有显著的抗凋亡作用（分别为P〈0．05和P〈0．01）；透射电镜可见经20％药物血清诱导后的OB细胞出现典型的细胞器明显增多，内质网扩张，线粒体丰富等形态学改变。结论：补肾宁心方药物血清在体外可有效地促进鼠OB的增殖周期，从而促进OB增殖并抑制其凋亡。
- 王凌王玉东李大金王文君朱影
- 关键词：细胞周期凋亡补肾宁心方成骨细胞
- 中药更年春方通过ERβ及PI3K/Akt信号通路对Aβ25-35致大鼠胎鼠海马神经元损伤的保护作用被引量：15
- 2020年
- 目的观察中药更年春方(Gengnianchun formula,GNC)通过雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)及PI3K/Akt信号通路对β淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)致大鼠胎鼠海马神经元细胞损伤的保护作用。方法采用Aβ25-35作用人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系,通过CCK-8法检测细胞活力摸索Aβ25-35及GNC含药血清(GNC serum,GS)处理神经细胞的合适浓度及时间。采用Aβ25-35作用大鼠胎鼠海马神经元构建阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的体外模型,分为无血清对照组、模型组、GS组、空白血清对照(normal saline serum,NS)组和PHTPP(选择性ERβ拮抗剂)组。利用正置显微镜观察细胞形态、CCK-8法检测细胞活力及LDH释放法检测细胞损伤。利用Hoest33258/PI双重荧光染色实验、qRT-PCR及Western blot实验检测细胞凋亡相关指标。结果与无血清对照组相比,模型组大鼠胎鼠海马神经元胞体及突触出现明显的收缩崩解和细胞碎片、细胞活力下降、LDH释放升高。与模型组和NS组相比,GS组大鼠胎鼠海马神经元胞体及突触的收缩崩解和细胞碎片减少、细胞活力上升、LDH释放减少、PI阳性神经元细胞数目下降、神经元bax/bcl-2mRNA、cyt-c mRNA水平及bax/bcl-2、cleaved-caspase 3、cyt-c蛋白表达水平下降、p-Akt蛋白表达水平上升。与GS组相比,PHTPP组大鼠胎鼠海马神经元bax/bcl-2 mRNA、cyt-c mRNA水平及bax/bcl-2、cleaved-caspase3、cyt-c蛋白表达水平上升、p-Akt蛋白表达水平下降。结论GNC对Aβ25-35致大鼠胎鼠海马神经元的损伤具有保护作用,此作用是通过ERβ及PI3K/Akt信号通路介导的。
- 张阳高玲芸王文君
- 关键词：PI3K/AKT信号通路
- 更年春方对破骨细胞的分化与凋亡及骨吸收活性的影响被引量：7
- 2008年
- 目的探讨更年春方对破骨细胞的分化、凋亡及骨吸收活性的影响。方法分离培养大鼠破骨细胞,加入含不同浓度的"更年春"药物血清培养液培养,生理盐水作为阴性对照组,尼尔雌醇作为阳性对照组,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色对TRAP阳性多核破骨细胞计数;用显微摄影结合计算机图像分析测定骨吸收造成的陷窝面积;采用Annexin V-FITC凋亡荧光染色结合TRAP染色法计数破骨细胞的凋亡率。结果与生理盐水组相比,尼尔雌醇组和更年春高剂量组TRAP染色阳性的破骨细胞数量显著减少(P<0.01);破骨细胞的凋亡率明显增加(P<0.01);尼尔雌醇组,更年春高、中剂量组骨吸收陷窝的面积明显减少(P<0.01)。与尼尔雌醇组相比,更年春高剂量组差别无显著性。结论更年春可抑制破骨细胞的形成和分化及骨吸收活性,促进破骨细胞的凋亡,从而发挥其抗骨质疏松的作用。
- 杨晓莉王文君李大金金慰芳周文江
- 关键词：更年春方破骨细胞细胞分化细胞凋亡骨吸收
- 脱氢表雄酮增强去势鼠Th1型偏移及成骨细胞增殖能力被引量：5
- 2007年
- 目的:探讨脱氢表雄酮(DHEA)对去势鼠CD4+T细胞Th1/Th2型细胞因子表达和成骨细胞(OB)增殖的影响。方法:建立小鼠绝经后骨质疏松(PMO)模型,分为OVX组、OVX+DHEA组、OVX+E2组。另设Sham组为假手术对照。取腰椎和股骨行骨组织形态计量分析;流式细胞术(FCM)检测各组鼠脾脏CD4+T细胞内IL-2、IFN-γ(Th1型)和IL-4、IL-10(Th2型)的表达;并取椎骨植块法培养OB,FCM分析增殖细胞核抗原(PCNA)表达。结果:OVX组与Sham组相比,椎骨和股骨骨小梁面积显著下降(P<0.01),说明PMO模型成功建立;与OVX组相比,OVX+DHEA组腰椎、股骨及OVX+E2组腰椎、股骨骨小梁面积都明显增加(P<0.01)。OVX组IL-2及IFN-γ表达显著低于Sham组(P<0.05);而OVX+DHEA组和OVX+E2组显著高于OVX组(分别为P<0.01和P<0.05)。OVX+DHEA组IL-4及IL-10表达显著低于OVX组(P<0.01)。OVX组IFN-γ/IL-4比值明显低于Sham组(P<0.05);OVX+DHEA组和OVX+E2组IFN-γ/IL-4比值均显著高于OVX组(P<0.01)。OVX组OB的PCNA表达与Sham组相比显著增高(P<0.05);与OVX组相比,OVX+DHEA组OB核内PCNA的平均表达强度和阳性细胞百分率皆显著增高(分别为P<0.05和P<0.01)。OVX+DHEA组OBPCNA表达与CD4+T细胞IFN-γ水平呈明显正相关(r=0.931,P<0.05);与IL-4水平呈负相关(r=-0.815,P<0.05)。结论:DHEA可通过细胞免疫调节作用形成Th1型免疫偏移,从而显著改善PMO的免疫状态;并有效促进OB增殖,显著改善骨形态。
- 王凌王玉东李大金王文君朱影
- 关键词：脱氢表雄酮CD4+T细胞TH1/TH2型细胞因子成骨细胞增殖
- 细胞因子对破骨细胞生物学功能的调控作用被引量：6
- 2008年
- 破骨细胞(osteoclast,OC)是一种多核巨细胞,主要来源于骨髓造血干细胞的单核巨噬细胞谱系。在促进OC生成的细胞因子、激素、PGE2等的作用下,脾细胞、人外周血单核细胞、骨髓细胞被诱导成OC。OC是维持骨代谢平衡和稳定的一种重要的细胞;其分化、产生及活性增加参与骨质破坏有关的疾病如骨质疏松、类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)、牙周病和Paget病。在这些疾病中均存在细胞因子的改变;这些细胞因子对破骨细胞分化的调控作用是这些疾病发生发展的关键。
- 孙婵王凌李大金
- 关键词：破骨细胞细胞因子细胞分化
- 更年春方对去卵巢大鼠胶原纤维作用的研究被引量：1
- 2008年
- 目的观察更年春方(GNC)对去卵巢大鼠皮肤组织胶原纤维的作用并探讨可能发生的机制。方法10～12月龄SD雌性大鼠60只随机分为假手术组(S组)、生理盐水组(N组)、GNC高剂量组(H组)、GNC低剂量组(L组)、尼尔雌醇组(E组),每组12只。除S组做假性手术外,其余各组均行双侧卵巢切除术。术后2 w开始给予灌药,N组灌服生理盐水,H组灌服GNC 2 ml/d、L组灌服GNC 1 mg/d、E组灌服尼尔雌醇1盯ml,1次/w。3个月后测定大鼠血清雌二醇(E_2)的水平,取大鼠背部皮肤组织进行组织学及免疫组织化学观察,测定皮肤组织羟脯氨酸(HYP)水平,RealTime-PCR定量分析皮肤组织表皮细胞生长因子受体(EGFR)、ER亚型mRNA的表达。结果GNC及尼尔雌醇均能提高大鼠皮肤组织HYP含量,提高皮肤组织EGFR、ERα、ERβmRNA的表达,血清E_2水平均未升高。结论更年春方能增加去卵巢大鼠皮肤组织胶原纤维的表达,此作用与GNC影响胶原蛋白合成途径有关。其机制可能与提高皮肤组织ERmRNA的表达有关。
- 袁怡清王文君周文江李大金
- 关键词：更年春方雌激素受体亚型
- 补肾宁心方对小鼠绝经后骨质疏松的影响被引量：10
- 2005年
- 目的探讨补肾宁心方防治绝经后骨质疏松的作用。方法建立BALB/c小鼠绝经后骨质疏松模型,灌服补肾宁心方浓缩液(简称补肾方组),并以17β-雌二醇为阳性对照(简称E2组),以生理盐水为阴性对照(简称模型组)。12周后处死,取血测Th1/Th2型细胞因子;取椎骨(L3-4)和左股骨测骨密度(BMD);取右股骨行骨组织形态计量分析;胫骨提取总RNA,半定量RT-PCR分析护骨素(OPG)的mRNA表达。计算子宫对体重的比值,并行子宫组织切片观察。结果补肾方组的IFN-γ水平较模型组明显升高(P<0.01),而IL-4水平低于模型组(P<0.05)。补肾方组与E2组小鼠的BMD均改善,骨小梁面积增加,OPG mRNA表达增加;但补肾方组小鼠的子宫明显小于E2组(P<0.05),与模型组比较差异无显著性。结论补肾方能够选择性地防治绝经后骨质疏松,对子宫无或仅有轻微的刺激作用。其机制可能与调节Th1/Th2的偏移及提高OPG的表达,抑制破骨细胞的活性有关。
- 王玉东李大金王文君朱影
- 关键词：补肾宁心方绝经后骨质疏松护骨素TH1/TH2MRNA表达
