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国家自然科学基金(30500490)
作品数:
2
被引量:6
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相关作者:
倪泉兴
金忱
傅德良
龙江
陈卫
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聚乳酸羟基乙酸-泊洛沙姆纳米微粒作为siRNA载体的可行性
被引量:4
2009年
目的探讨聚乳酸羟基乙酸-泊洛沙姆(PLGA—Poloxamer)纳米微粒作为siRNA载体的可行性。方法乳剂溶解扩散法制备PLGA—Poloxamer纳米微粒,观察纳米微粒的物理特征,探讨不同制备条件对纳米微粒物理特征的影响,测定其对含siRNA片段的质粒DNA的包裹效率,检测释放的质粒DNA的结构稳定性,验证纳米微粒对质粒DNA的保护作用,测定其作为载体的基因转染效率。结果PLGA—Poloxamer纳米微粒呈球形,粒径约为(210.1±24.3)nm,zeta电位为(-0.43±1.43)mv,包裹效率为31%。该微粒对质粒DNA有保护作用,释放的质粒DNA结构稳定,转染效率达28%。结论PLGA—Poloxamer纳米微粒有望成为较理想的siRNA载体。
金忱
罗国培
陈卫
龙江
傅德良
倪泉兴
关键词:
纳米微粒
RNA干扰
聚乳酸羟基乙酸
泊洛沙姆
小干扰RNA阻断MBD1基因对胰腺癌抑癌基因表达的影响
被引量:2
2008年
目的观察阻断MBD1基因对胰腺癌抑癌基因表达的影响,探讨MBD1基因在胰腺癌发生发展中的作用。方法设计并合成2条MBD1小干扰RNA(siRNA)序列,克隆进入pGCsi—U6/Neo/绿色荧光蛋白(GFP)构建重组质粒。重组质粒和空质粒转染人胰腺癌细胞系BxPC-3,将3组细胞(转染MBD1-siRNA重组质粒组、转染空质粒组和未转染组)接种于裸鼠,8周后取移植瘤行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测MBD1基因和甲基化相关抑癌基因的表达情况。结果成功构建MBD1-siRNA重组质粒并稳定转染胰腺癌细胞系BxPC-3,转染组中MBD1基因表达明显低于空质粒组和未转染组,而CDH1、RASSF1A、TIMP3、P14ARF、Rb等甲基化相关抑癌基因的mRNA水平转染组(179.7±8.1、155.6±10.0、256.7±15.7、199.0±7.9、210.1±9.4)要高于空质粒组(21.0±6.8、22.0±2.7、99.4±10.3、86.0±5.4、15.0±4.9)和未转染组(11.4±6.0、15.3±1.9、110.7±14.1、74.3±4.8、17.4±7.8,均P〈0.05)。结论通过RNA干扰技术,可降低MBD1在胰腺癌中的表达,上调抑癌基因的转录,MBD1介导的转录抑制作用可能在胰腺癌的发生发展中起重要作用。
徐近
刘辰
虞先浚
金忱
傅德良
倪泉兴
关键词:
胰腺肿瘤
RNA干扰
基因
抑癌基因
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