湖南省卫生厅科研基金(B2003-041)
- 作品数:5 被引量:18H指数:3
- 相关作者:邹明祥夏忠弟王冬梅齐素文王勇更多>>
- 相关机构:中南大学河南科技大学更多>>
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- 淋球菌IR区基因突变及mtrF表达水平与多重耐药的相关性研究被引量:2
- 2008年
- 目的探讨淋球菌多传递耐药系统回文序列(IR)区基因突变及mtrF表达水平与多重耐药的相关性。方法采用纸片扩散法测定菌株的耐药性,琼脂稀释法检测菌株的耐药水平,PCR法扩增mtrR编码基因和IR区基因并进行测序分析,同时用RT-PCR测定mtrF基因的表达。结果5株敏感菌及6株仅耐红霉素的菌株mtrR和IR区基因均未发生突变,21株多重耐药菌均发生了突变(8株低~中等水平耐药株发生mtrR编码基因突变,13株高度多重耐药株IR区发生基因突变或同时存在mtrR单位点突变)。高度多重耐药株mtrF基因表达量(1.019±0.161)显著高于敏感组(0.595±0.064)(P<0.01)和低~中等水平多重耐药组(0.671±0.073)(P<0.01),而后两者间mtrF基因表达量无明显差异。结论在介导产生多重耐药过程中,淋球菌IR区基因突变及mtrF基因的高表达可能发挥着十分重要的作用。
- 王冬梅夏忠弟齐素文邹明祥
- 关键词:淋病奈瑟菌多重耐药
- 淋球菌gyrA基因突变检测在氟喹诺酮快速药敏试验中的初步应用被引量:2
- 2006年
- 目的探讨利用分子生物学方法直接快速检测临床标本中淋球菌gyrA基因突变的可行性。方法设计针对淋球菌gyrA基因的特异扩增引物,运用聚合酶链反应-单链构象多态性技术(PCR-SSCP)对95份泌尿生殖道标本直接进行基因及突变检测,并与测序及药敏试验结果进行对比分析。结果32份分离培养阴性的标本无特异性扩增产物,而63份分离培养阳性标本以及对应的分离菌株均能扩增出168 bp片断。以淋球菌标准株ATCC19424为对照,分离菌株对环丙沙星敏感的5份临床标本与标准株SSCP带型相同;分离菌株对环丙沙星中介或耐药的58份临床标本与标准株SSCP带型均不同,共出现5种突变带型。5份SSCP分析显示,无突变的标本gyrA基因序列未发生改变;16份SSCP分析显示,有突变的标本gyrA基因序列均有改变;具有相同突变的标本SSCP带型完全相同,具有不同突变类型的标本SSCP带型不同。结论PCR-SSCP银染技术可简便、快速、准确地检测临床标本中淋球菌对氟喹诺酮类药物的敏感性。
- 邹明祥范学工夏忠弟刘红军刘文恩李宪
- 关键词:DNA突变分析
- 外排系统与膜通透性的改变对淋球菌高水平多重耐药的影响被引量:3
- 2009年
- 目的探讨外排系统与膜通透性的改变对淋球菌多重耐药的影响。方法PCR扩增淋球菌mtrR启动子区域包含13 bp回文序列在内的157个碱基片段并进行DNA测序分析;提取外膜蛋白,利用SDS-PAGE进行组成型的分析。结果5株敏感株的mtrR启动子区域未发生突变,3株高水平多重耐药株的mtrR启动子区域13 bp回文序列均发生了单个A/T碱基的缺失,且均存在外膜孔蛋白表达的缺失。结论mtrR启动子区域13 bp回文序列单个A/T碱基的缺失引起的mtrCDE外排泵表达增加与外膜孔蛋白表达的缺失或下降导致的膜通透性降低,在介导淋球菌产生高水平多重耐药中起一定的作用。
- 王冬梅王勇夏忠弟田峰邹明祥
- 关键词:淋球菌多重耐药MTR孔蛋白
- 淋球菌多重耐药调节基因(mtrR)突变与多重耐药关系的研究被引量:6
- 2004年
- 目的 研究淋球菌多重耐药调节基因mtrR突变与淋球菌多重耐药的关系。 方法 ①纸片扩散法检测 5 2株淋球菌对四种抗生素的敏感性 ;②PCR扩增mtrR基因中最常发生突变的 2 5 0个碱基进行SSCP(单链构象多态性 )分析 ;③根据SSCP的结果选取 11株标本 ,扩增其mtrR基因、测序 ,将其核苷酸序列与标准敏感株ATCC1942 4进行比较。结果 5 2株细菌中有 8株对四种抗生素都敏感 ;对一种抗生素耐药的有 19株 ,只有一株mtrR基因发生点突变 ;对两种抗生素耐药的有 16株 ,其中有两株mtrR基因发生了点突变 ;对三种抗生素和四种抗生素耐药的株菌分别是 7株和 2株 ,它们的mtrR基因都发生了点突变。在这 11株标本中 ,发生 45位gly(GGC)→ (GAC)asp突变的为 5株 ,10 5位his(CAC)→(TAC)tyr突变的为 6株。 结论 ①mtrR基因突变介导淋球菌的多重耐药 ;②mtrR基因 45位 gly(GGC)→ (GAC)asp和 10 5位his(CAC) (TAC)tyr的突变与淋球菌多重耐药的关系密切。
- 齐素文夏忠弟邹明祥王冬梅
- 关键词:淋病奈瑟菌多重耐药点突变
- 淋球菌不同耐药水平中mtrF基因的表达被引量:7
- 2007年
- 目的探讨mtrF基因在多重耐药淋球菌中的表达及其与高水平多重耐药淋球菌的关系。方法①纸片扩散法检测58株淋球菌对5种抗生素的敏感性;②试管稀释法测定淋球菌对红霉素的最小抑菌浓度(MIC);③采用RT-PCR技术测定敏感组、低-中等水平多重耐药组及高水平多重耐药组中mtrD、mtrF基因的表达。结果①58株淋球菌中对2种或者2种以上抗生素耐药的有30株,占待测淋球菌的51.7%;②红霉素MIC为敏感、中介、耐药,分别为7株、21株和30株,有17株MIC值≥32.0μg/mL;③高水平多重耐药组mtrF基因表达量升高,与低-中等水平耐药组和敏感组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);但后两者之间无明显差异。耐药组mtrD基因表达量升高,与敏感组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);但两个耐药组之间无明显差异。结论mtrF基因在高水平多重耐药组中表达均高于敏感组和低-中等水平多重耐药组,表明其在介导淋球菌产生高水平多重耐药过程中可能发挥着十分重要的作用。
- 王冬梅夏忠弟邹明祥齐素文
- 关键词:淋病奈瑟菌多重耐药