国家教育部博士点基金(20050631005)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
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- nesprin-1基因在小鼠心脏发育过程中的表达被引量：1
- 2010年
- 目的检测小鼠心脏发育过程中nesprin-1基因mRNA和蛋白的表达及亚细胞定位。方法取小鼠胚胎12.5 d(embryo 12.5day,E12.5)、E14.5、E16.5、E18.5以及新生鼠、成年小鼠心脏,应用RT-PCR、Western blot、免疫荧光技术检测胚胎各时间点、新生鼠、成年鼠心脏nesprin-1基因mRNA和蛋白表达及细胞定位。结果在小鼠胚胎E12.5、E14.5、E16.5、E18.5以及新生鼠、成年小鼠心脏组织中,nesprin-1基因mRNA及蛋白均有表达,其表达量随着心脏的发育而逐渐增加,E16.5和E18.5表达最高,成年鼠表达最低。免疫荧光显示,nesprin-1的分布在各个时期均位于核被膜及核周间隙中。结论nesprin-1在小鼠心脏发育过程中表达呈动态变化,在心脏传导系统和心肌细胞发育成熟时期呈高表达,因此推测nesprin-1可能在心脏传导系统和心肌细胞的发育中有重要作用。
- 李小莉易岂建张秋萍李娅莎
- 关键词：小鼠心脏发育心肌细胞
- nesprins与某些人类疾病研究进展被引量：2
- 2011年
- nesprins是新发现的-组核膜蛋白，有nesprin-1、nesprin-2、nesprin-3和nesprin-4四种表型，在保持细胞核的形态与细胞器的迁移中起重要作用。其与emerin及laminA／C相连，共同定位于核膜上。在各种组织中广泛表达，尤其在心肌、骨骼肌、平滑肌及神经系统中高度表达，提示其在这些组织中可能具有重要作用，并可能与这些组织疾病发生有关，如Emery—Dreifuss肌营养不良综合征、Meckel—Gruber综合征等。
- 高放易岂建
- 关键词：NESPRINS疾病
- Nesprin-1在C_2C_(12)肌原细胞系分化过程中的作用被引量：1
- 2010年
- 目的探讨Nesprin-1在肌细胞分化过程中的作用。方法将C2C12肌原细胞分化成肌小管,采用Western blot和免疫荧光技术检测Nesprin-1蛋白表达水平和亚细胞定位在肌小管分化成熟过程中的改变;同时利用RNA干扰技术抑制Nesprin-1蛋白的表达,观察其对C2C12肌原细胞分化的影响。结果 Nesprin-1各亚型在C2C12肌原细胞系分化过程中表达水平以及在细胞中的定位有明显改变。Nesprin-1 siRNA组与对照组相比,分化前后C2C12细胞中Nesprin-1蛋白表达明显降低,同时分化后肌组织分化成熟的蛋白标志肌球蛋白(myosin)的表达量以及肌小节的数量比对照组均明显减少(P<0.001)。结论本文证实Nesprin-1了对骨胳肌细胞分化至关重要,不同分子大小Nesprin-1亚型在C2C12肌原细胞分化过程中发挥各自的特殊作用,在该细胞质与细胞核中的也有不同的作用。
- 高放易岂建李晨田运娇王芳洁Catherine M.Shanahan张秋萍
- 关键词：分化RNA干扰
- Nesprin-1对小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞的影响
- 2012年
- 目的探讨nesprin-1在胚胎干细胞分化为心肌细胞过程中的作用。方法采用悬滴-悬浮-贴壁三步法,5-氮杂胞苷(5-aza)与丹参共同诱导胚胎干细胞分化为心肌细胞,用Western blot与免疫荧光技术检测nesprin-1蛋白表达水平和在分化成熟过程中的改变。同时利用RNA干扰(RNAi)技术抑制nesprin-1蛋白的表达:Ⅰ组(RNA干扰目的序列AAAGCCAAGCACGCAACTA),Ⅱ组(RNA干扰目的序列GGGAACCAACAGTGAGATT),Ⅲ组(RNA干扰目的序列ACCAGGACATTGCGTACTA),对照组(使用无意义的ShRNA干扰序列),观察对胚胎干细胞分化的影响。结果 Nesprin-1各亚型在胚胎干细胞分化为心肌细胞过程中的表达水平有所变化。RNAi后,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组和对照组心肌细胞分化率分别为(17.78±1.92)%、(36.67±3.34)%、(44.42±5.08)%和(77.78±1.92)%,各干扰组与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05),且各干扰组分化后心肌组织分化成熟的蛋白标志肌球蛋白(myosin)的表达量减少。结论 Nesprin-1在胚胎干细胞分化为心肌细胞过程中发挥重要作用,不同分子大小的nesprin-1亚型在此分化过程中可能有着不同的功能。
- 高放易岂建田运娇王芳洁刘官信
- 关键词：胚胎干细胞分化心肌细胞RNA干扰
- 小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞的体外实验被引量：5
- 2009年
- 目的:探索提高胚胎干细胞(ESC)体外诱导分化为心肌细胞的实验方法.方法:采用悬滴—悬浮—贴壁三步法(悬滴三步法)和悬浮—贴壁两步法(悬浮两步法),按诱导剂的不同分为Ⅰ组:丹参+5-氮杂胞苷(5-aza)组;Ⅱ组:丹参+维甲酸(RA)组;Ⅲ组:5-aza组;Ⅳ组:丹参组;Ⅴ组:RA组;Ⅵ组:阴性对照组6组进行诱导培养,比较在2种培养方法下各组心肌细胞的分化率.结果:Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ,Ⅵ组采用悬滴三步法培养的心肌细胞分化率分别为(77.78±5.09)%,(66.67±8.82)%,(51.11±1.92)%,(44.44±5.09)%,(23.33±3.34)%;采用悬浮两步法培养的心肌细胞分化率分别为(42.22±6.94)%,(36.67±8.82)%,(25.55±10.71)%,(17.78±5.09)%,(10.00±2.84)%.各组心肌细胞分化率悬滴三步法较悬浮两步法高,差异具有统计学意义(P<0.05).采用悬滴三步法培养Ⅰ组心肌细胞分化率最高可达78%,与其它各组相比较差异具有统计学意义(P<0.05).结论:悬滴三步法联合采用中药丹参与5-aza为诱导剂,可为体外ESC分化为心肌细胞的实验方法提供理论依据.
- 王芳洁易岂建郭鹏飞
- 关键词：胚胎干细胞分化心肌细胞5-氮杂胞苷
