山东省自然科学基金(Y2007D32)
- 作品数：3 被引量：13H指数：2
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- 鸡肉中氟苯尼考ELISA检测方法的建立及应用
- 引言氟苯尼考(Florfenicol,FFC)是一种新型的氯霉素类广谱抗生素,主要用于治疗鱼、猪、牛及家禽的细菌性疾病。氟苯尼考在安全性和有效性方面比氯霉素和甲砜霉素有明显的优势,已在养殖业中大规模使用。但是最近研究表明...
- 孙法良刁有祥孙宁马艳芳纪巍王明亮
- 文献传递
- 氟苯尼考人工抗原的合成与鉴定被引量：2
- 2009年
- 采用混合酸酐(MA)法,将氟苯尼考(FFC)分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)连接,制备人工免疫抗原FFC-HS-BSA和包被原FFC-HS-OVA,经紫外扫描(UV)、凝胶电泳(SDS-PAGE)、红外扫描光谱(IR)和动物免疫试验证实人工抗原合成成功。
- 孙法良刁有祥刘悦竹孙宁马艳芳
- 关键词：氟苯尼考人工抗原凝胶电泳
- 鸡肉中氟苯尼考ELISA检测方法的建立及应用被引量：8
- 2009年
- 【目的】制备抗氟苯尼考(FFC)的高亲和力特异性抗体,建立检测氟苯尼考的间接竞争ELISA新方法。【方法】氟苯尼考分别与牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HSA)经混合酸酐法偶联,得到免疫抗原和包被抗原,其偶联比分别为14.4和14.7。用免疫原FFC-HS-BSA免疫新西兰大白兔获得了效价较高的特异性抗体。建立并优化了间接竞争ELISA检测方法。【结果】抗血清效价为1:102400。最佳包被抗原浓度为0.5μg·ml-1,最佳抗体工作浓度为1:6400,酶标二抗的工作浓度为1:20000。回归方程Y=-0.1516X+0.788(R2=0.9859),检测范围为0.18～500ng·ml-1,检出限为0.18ng·ml-1,批内和批间平均变异系数分别为4.86%和7.77%。交叉反应试验中,抗血清与FFC结构相似的氯霉素和甲砜霉素交叉反应率分别为0.094%和0.098%,与其它药物交叉反应率均小于0.01%,表明该方法具有很强的特异性。FFC以浓度0.18～500ng·g-1在鸡肉中添加,回收率为84.14%～106.1%,变异系数为2.1%～5.6%。【结论】成功获得了高效价、高特异性的抗FFC抗体,建立了鸡肉中氟苯尼考残留检测的ELISA方法。结果表明,所建立的检测方法具有灵敏、准确、简便、快速的特点。
- 孙法良刁有祥孙宁马艳芳纪巍
- 关键词：氟苯尼考ELISA鸡肉食品安全
- 氟苯尼考人工抗原的制备与鉴定被引量：3
- 2009年
- 将氟苯尼考(FFC)进行化学修饰引入羧基活性基团,合成具有半抗原结构特征的氟苯尼考半琥珀酸酯(FFC-HS).采用混合酸酐(MA)法将FFC-HS与牛血清白蛋白(BSA)偶联合成人工抗原BSA-FFC-HS.通过紫外(UV)、凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定,证明BSA-FFC-HS偶联成功,得到了结合比较好的人工抗原,为进一步制备抗FFC抗体提供了良好的免疫原.
- 刘悦竹刁有祥孙法良孙宁马艳芳
- 关键词：氟苯尼考半抗原人工抗原凝胶电泳
