国家高技术研究发展计划(2011AAl00905)
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
- 相关作者：堵国成陈坚李江华张娟刘松更多>>
- 相关机构：江南大学教育部更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程更多>>
- 定点突变提高碱性果胶酶热稳定性被引量：3
- 2015年
- 碱性果胶酶(PGL,E.C.4.2.2.2)是一种重要的工业酶,在碱性条件下催化聚半乳糖醛酸的α-1,4糖苷键裂解,广泛应用于食品、纺织和造纸等行业。为提高酶热稳定性,将Bacillus sp.WSHB04-02 PGL与3种耐热酶进行氨基酸序列比对,确定7个在耐热酶中保守但在PGL中不保守的位点(158、N189、G191、S229、K314、S315和I325)作为改造的目标位点,单独突变为耐热酶中的保守氨基酸。酶学性质分析显示,PGL突变体热稳定性均有提高。与野生酶相比,N189E、S229K和I325F的55℃半衰期分别提高2.32倍、2.11倍和1.89倍;I58V和K314M 55℃半衰期分别提高19.4%和38.9%,比酶活分别提高65%和91%。结构分析显示,除S315G外的PGL突变体的分子内的多种作用力数量均发生改变。上述结果表明,定点突变能有效提高PGL热稳定性,分子间作用力的变化可能是酶学性质变化的重要原因之一。
- 刘松汪明星堵国成陈坚
- 关键词：碱性果胶酶定点突变热稳定性
- 包埋固定化酶降解牛奶αs1-酪蛋白过敏性研究被引量：6
- 2016年
- 利用海藻酸钠固定化蛋白酶,探求其对牛奶过敏原αs1-酪蛋白的特异性降解。以固定化酶的活力回收率为指标,探究了固定化的条件、固定化酶的部分性质以及固定化酶在去除牛奶过敏原蛋白的应用。结果表明:最优固定化条件为,海藻酸钠质量分数为4.0%,Ca Cl2的质量分数为3.0%,固定化时间0.5 h,固定化酶量为V(海藻酸钠)∶V(酶液)为1∶3,固定化效率达到67.5%;固定后的酶最适反应温度70℃,最适反应p H 10.0,连续使用6次后剩余酶活达到40.0%以上;将固定化酶作用于2.0%脱脂奶粉溶液中,60℃条件下反应25 min过敏原αs1-酪蛋白得到特异性降解。
- 汝成业张娟堵国成陈坚李江华
- 关键词：海藻酸钠固定化酶
- 搅拌转速和通气量对黑曲霉生产β-甘露聚糖酶深层发酵培养的影响被引量：2
- 2013年
- 采用7L搅拌式发酵罐研究黑曲霉生产β-甘露聚糖酶的扩大培养条件,主要考察了搅拌转速和通气量对黑曲霉WB6002生长、β-甘露聚糖酶酶活、溶氧以及残糖的影响。研究结果表明,搅拌转速和通气量能够显著影响黑曲霉的生长以及β-甘露聚糖酶的合成,并得出了较为优化的培养条件:温度35℃,pH 4.5,搅拌转速900 r/min,通气量1.5 vvm,装液量50%。在此条件下,黑曲霉WB6002的产酶能力最强,甘露聚糖酶的酶活力达到1117.26 U/mL,最大细胞得率达到43.98g/L。
- 史祥才李江华刘龙堵国成陈坚
- 关键词：黑曲霉Β-甘露聚糖酶搅拌转速酶活
