哈尔滨市科技攻关计划项目(2010AA6AN034)
- 作品数:10 被引量:30H指数:3
- 相关作者:高玉龙王笑梅秦立廷高宏雷祁小乐更多>>
- 相关机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所山东农业大学东北林业大学更多>>
- 发文基金:哈尔滨市科技攻关计划项目国家肉鸡产业技术体系建设专项公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 东北地区野生鸟类B亚群禽白血病的分子流行病学调查及env基因的序列分析被引量:3
- 2013年
- 为掌握我国东北地区野生鸟类感染禽白血病病毒(ALV)的情况,从黑龙江、吉林和辽宁三省采集了300份野生鸟类样品,经PCR检测,4份野生鸟类样品为ALV-B阳性,并扩增了这4份样品的env基因,对其序列进行了遗传进化分析。结果显示,4份ALV-B阳性样品的env基因与原型毒株RAV-2的同源性为99.1%~99.4%,与美国的另外2株代表毒株Schmidt-Ruppin B和Prague subgroup B的同源性为93.3%~98.4%,而与2株中国蛋鸡分离株SDAU09C2和SDAU09E3的同源性为90.2%~90.6%。以上结果表明,目前我国野生鸟类已经存在禽白血病。env基因序列分析结果表明,这4份阳性样品的env基因部分位点发生了变异,并且在多处位点存在突变。
- 李德龙刘婉思杨波高奇曾祥伟秦立廷高宏雷刘思当高玉龙王笑梅
- 关键词:野生鸟类流行病学调查
- 禽白血病病毒双抗体夹心ELISA方法的建立
- 为建立一种快速有效的检测禽白血病病毒的方法,以原核表达的HLJ09MDJ-1(ALV-J)p27蛋白制备的单克隆抗体作为包被抗体,p27蛋白制备的多克隆抗体作为检测抗体建立了检测ALV的双抗体夹心ELISA(DAS-EL...
- 负炳岭刘文李德龙秦立廷刘在斯吴关祁小乐王永强高宏雷高玉龙王笑梅
- 关键词:禽白血病病毒单克隆抗体多克隆抗体双抗体夹心ELISA
- 文献传递
- 禽白血病病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量:6
- 2012年
- 为建立一种快速有效的检测禽白血病病毒(ALV)的方法,以原核表达的HB09JY03(ALV-J)p27蛋白制备的单克隆抗体作为包被抗体,p27蛋白制备的多克隆抗体作为检测抗体建立了检测ALV的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)方法。该方法对p27的最小检出量为1.25ng/mL,且与禽类常见的病毒鸡传染性支气管炎病毒、马立克病病毒、鸡传染性喉气管炎病毒等无交叉反应。动物感染试验结果表明,用该方法可在感染动物12d后有效检测泄殖腔分泌物中的禽白血病病毒。利用该方法检测了491份蛋清样品和180份肛拭子样品,与PCR方法的符合率分别为96.5%和93.8%。证实,该方法具有方便、快速、敏感等优点,该方法的建立为ALV的早期诊断及种鸡场的净化提供了有效工具。
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- 关键词:禽白血病病毒单克隆抗体多克隆抗体双抗体夹心ELISA
- 我国部分地区蛋鸡ALV-J分离株gp85基因遗传进化分析被引量:3
- 2011年
- 为了解我国蛋鸡J亚型白血病病毒(ALV-J)株来源及其遗传进化关系,本研究对2009年从我国6个省区蛋鸡场分离到的19株ALV-J的gp85基因进行克隆和测序,并与11个ALV-J参考株gp85基因作了比较分析。结果表明:19个ALV-J分离株的gp85基因长度为894bp~924bp不等,分别编码298~308个氨基酸;各病毒株间gp85推导氨基酸的同源性为71.3%~100%。遗传进化分析表明,目前我国蛋鸡ALV-J分离株来源复杂,其中13个分离株与英国原型株HPRS-103、国内麻黄肉鸡株SCAU-0901亲缘关系较近;3个分离株与美国株ADOL-7501及国内白羽肉鸡株HN0001处在同一大的分支;而另外3个分离株则各自形成独立的分支,表明其gp85基因发生了较大变异。本研究表明,19个分离株与国内早期肉鸡分离株亲缘关系较远,提示我国当前蛋鸡ALV-J株可能并非源自国内早期肉鸡ALV-J株,其来源有待进一步研究。
- 潘伟高玉龙刘超男秦立廷王永强祁小乐高宏雷王笑梅
- 关键词:蛋鸡J亚群禽白血病病毒GP85基因遗传进化
- 我国部分地区蛋鸡ALV-J流行毒株gp85基因遗传进化分析
- 本研究对2009年从我国6个省区蛋鸡场分离到的19株ALV-J gp85基因进行了克隆,并与11株已公布ALV-J株gp85基因作了比较分析。结果表明,19个蛋鸡ALV-J分离株的gp85基因长度为894 bp~924 ...
- 潘伟高玉龙刘超男孙芬芬秦立廷王永强祁小乐高宏雷王笑梅
- 关键词:蛋鸡禽白血病病毒J亚群禽白血病病毒GP85基因
- 文献传递
- 蛋鸡J亚群禽白血病病毒3′非编码区序列特征分析被引量:8
- 2012年
- 蛋用型鸡虽在试验条件下可以感染ALV-J,但自然感染时很少引起发病。然而,近年来在中国蛋鸡群中ALV-J发病严重,本研究对2008年以来ALV-J蛋鸡分离株的3′非编码区(3′UTR)进行了系统的分析。结果表明,89.5%(17/19)的ALV-J蛋鸡分离株的3′UTR出现了205bp的缺失,94.7%(16/17)ALV-J蛋鸡分离株保留了完整的E元件。84.2%(16/19)的ALV-J蛋鸡分离株的U3区序列与肉鸡分离株的相似性低于92.5%,所有转录调控元件高度保守。ALV-J蛋鸡分离株的E元件和U3区均出现了多个碱基的突变。这些结果表明,ALV-J蛋鸡分离株的E元件和U3区正在迅速的演化,明显不同于肉鸡分离株的序列特征。这些发现有助于更好地了解ALV-J引起蛋鸡群发病的致病机理。
- 高玉龙贠炳岭秦立廷潘伟王永强高宏雷祁小乐王笑梅
- 关键词:J亚群禽白血病病毒分子特征
- 我国蛋鸡群禽白血病流行病学调查
- 为近年来我国禽白血病(AL)流行情况及流行毒株的分子特征,从湖北、黑龙江、内蒙古、山东、辽宁、吉林、广东、宁夏、安徽9个省区48个鸡场采集疑似禽白血病病料样品233份,用ALV-A、ALV-B和ALV-J特异性引物,通过...
- 高玉龙秦立廷潘伟王永强祁小乐高宏雷王笑梅
- 关键词:禽白血病J亚群白血病血管瘤ENV基因流行病学调查
- 文献传递
- 东北地区野生鸟类J亚群禽白血病分子流行病学调查及部分基因组序列分析被引量:7
- 2013年
- 为了解野生鸟类感染禽白血病(AL)的情况,于2010—2011年采集300份野生鸟类样品进行试验。用PCR方法先后检测到7株ALV-J阳性样品。分别扩增了env基因和3′UTR区段,并对其进行了序列测定和比较分析。结果显示,7株ALV-J阳性样品的env基因遗传进化与原型毒株HPRS-103和代表株不在同一个分支上,在3′UTR区段没有太大差异,与原型毒株HPRS-103相比,E元件部分位点存在变异。以上结果表明,目前中国野生鸟类已存在禽白血病的感染,虽然检出率较低,但是由于野生鸟类活动范围比较大,给AL的防控增加了难度。通过对J亚群阳性样品进行序列分析和比对,发现env基因和3′UTR区段部分位点发生变异。这些都提醒注意防控白血病在野生鸟类中进一步传播。
- 李德龙高玉龙曾祥伟杨波刘婉思高奇秦立廷高宏雷王笑梅刘思当
- 关键词:野生鸟类禽白血病流行病学调查
- J亚群禽白血病病毒gp85基因在杆状病毒中的表达及鉴定
- 为获得J亚群禽白血病病毒的gp85蛋白,将ALV-J的gp85基因克隆至载体pFastBac-HTA中,构建重组转座载体pFgp85,并将其转化DH10大肠杆菌感受态细胞,使gp85基因整合到Bacmid穿梭载体中,获得...
- 倪伟秦立廷高玉龙潘伟祁小乐高宏雷王永强王笑梅
- 关键词:J亚群禽白血病病毒GP85基因杆状病毒表达
- 文献传递
- J亚群禽白血病病毒gp85基因在杆状病毒中的表达及鉴定
- 为获得J亚群禽白血病病毒的gp85蛋白,将ALV-J的gp85基因克隆至载体pFastBac-HTA中,构建重组转座载体pFgp85,并将其转化DH10BacTM大肠杆菌感受态细胞,使gp85基因整合到Bacmid穿梭载...
- 倪伟秦立廷高玉龙潘伟祁小乐高宏雷王永强王笑梅
- 关键词:J亚群禽白血病病毒GP85基因杆状病毒表达
- 文献传递