国家自然科学基金(90209049) 作品数:12 被引量:63 H指数:5 相关作者: 涂胜豪 胡永红 陈红波 盛冬云 熊日波 更多>> 相关机构: 华中科技大学 中南大学 浙江省中医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
雷公藤甲素抑制外周血单个核细胞分泌IL-1β及其基因多态性的关系 被引量:4 2005年 目的探讨雷公藤甲素抑制外周血单个核细胞(PBMC)分泌白细胞介素-1β(IL-1β)及其基因多态性的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法,对31名健康志愿者IL-1β基因启动子区-511位点C-T多态性进行基因型检测,同时进行PBMC培养,用脂多糖(LPS)刺激培养细胞,并予以雷公藤甲素处理PBMC,收集培养上清液,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清液中IL-1β的含量。结果携带IL-1β-511T/T纯合子基因型PBMC经LPS刺激后,IL-1β的分泌量明显较非T/T纯合子为高(P<0.05);雷公藤甲素能显著抑制LPS诱导的C/C和C/T基因型PBMC分泌IL-1β(P<0.05),但对T/T基因型的抑制作用不明显(P>0.05)。结论IL-1β基因-511C-T多态性与IL-1β的分泌量相关,雷公藤甲素对不同基因型的IL-1β抑制作用有差异,这可能是导致雷公藤药理作用出现个体差异的原因之一。 涂胜豪 盛冬云 陈红波 胡永红关键词:雷公藤甲素 外周血 单个核细胞 细胞分泌 IL-1Β 基因多态性 Relationship between Single Nucleotide Polymorphism in TNF-α Gene Promoter Region and Inhibitory Effects of Triptolide on TNF-α Production in Peripheral Blood Mononuclear Cells of Healthy Humans 被引量:1 2006年 The relationship between tumour necrosis lactose (TNF-α) gene polymorphism and inhibitory effects of triptolide on TNF-α production from peripheral blood mononuclear cells (PBMC) of healthy humans was investigated. Genomic DNA from 41 healthy people was typed for TNF-α- 308 polymorphism by allele-specific polymorphism chain reaction (AS-PCR). The TNF-α concentration in the supernatant was measured by ELISA. The results showed that the production of TNF-α from TNF-α -308 non-G/G genotype PBMC was higher than that from TNF-α-308 G/G genotype PBMC after stimulated by LPS. Triptolide could lower the production of TNF-α from G/ G genotype PBMC, but had no effect on the level of TNF-α from non-G/G genotype PBMC. It was concluded that TNF-α gene polymorphism was related to the TNF-α production from triptolide-inhibited PBMC culture in healthy humans. 涂胜豪 陈红波 盛冬云 胡永红 刘沛霖关键词:TRIPTOLIDE 雷公藤甲素对携带不同IL-1β-511基因的RA患者外周血单个核细胞分泌IL-1β的抑制作用 2006年 目的:观察雷公藤甲素对类风湿性关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌白细胞介素(IL)1β抑制作用及其与基因多态性的关系。方法:采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCRRFLP)法,对37名RA患者IL-1β基因启动子区511位点CT多态性进行基因型检测,同时进行PBMC培养,用脂多糖(LPS)刺激培养细胞,并给予不同浓度的雷公藤甲素处理PBMC,收集培养上清液并抽提细胞中总RNA,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-1β蛋白。结果:携带IL1β511T/T纯合子基因型PBMC经LPS刺激后,IL1β的分泌量明显较非T/T纯合子为高(P<0.05);雷公藤甲素能显著抑制IL-1β蛋白的分泌;并且,低剂量雷公藤甲素能显著抑制LPS诱导的非T/T基因型PBMC分泌IL-1β(P<0.05),但对T/T基因型的抑制作用不明显(P>0.05)。结论:I-L1β基因511CT多态性与IL-1β的分泌量相关,雷公藤甲素能抑制IL-1β分泌,但对不同基因型的IL-1β抑制作用有差异,这可能是导致雷公藤药理作用出现个体差异的原因之一。 涂胜豪 盛冬云 熊日波 胡永红关键词:类风湿 单个核细胞 白细胞介素-1 雷公藤甲素 TNF-α基因多态性对雷公藤甲素抑制PBMC分泌TNF-α的影响 被引量:3 2007年 目的TNF-α基因多态性对雷公藤甲素刺激PBMC分泌TNF-α的影响。方法采用等位基因特异引物PCR法对41名健康志愿者TNF-α基因启动子区-308位点基因多态性进行检测,同时进行外周血单个核细胞(PBMC)培养,用脂多糖(LPS)或雷公藤甲素刺激培养细胞,收集上清液,ELISA法检测上清液中TNF-α的含量。结果TNF-α-308非G/G纯合子基因型健康志愿者PBMC经LPS刺激后TNF-α的分泌量明显较TNF-α-308G/G纯合子高;雷公藤甲素能够抑制TNF-α-308G/G纯合子基因型健康志愿者PBMC分泌TNF-α,而对TNF-α-308非G/G纯合子基因型健康志愿者PBMC没有明显的抑制作用。结论肿瘤坏死因子基因多态性与雷公藤甲素刺激外周血单个核细胞分泌TNF-α的量存在一定的联系,推测该基因多态性可能与临床雷公藤治疗类风湿关节炎所产生的个体疗效差异有一定关联。 陈红波 涂盛豪 盛冬云 胡永红关键词:雷公藤甲素 肿瘤坏死因子 外周血单个核细胞 基因多态性 雷公藤甲素抑制PBMC分泌IL-1β蛋白量与IL-1β基因多态性有关(英文) 被引量:1 2007年 目的:探讨雷公藤甲素对外周血单个核细胞(PBMC)分泌白细胞介素-1β(IL-1β)的抑制作用与IL-1β基因多态性的关系。方法:采用PCR-RFLP法对31名健康志愿者IL-1β基因启动子区-511位点C-T多态性进行基因型检测,同时进行PBMC培养,用脂多糖(LPS)刺激培养细胞,并予以雷公藤甲素处理PBMC,收集培养上清液,ELISA法检测上清液中IL-1β的含量。结果:携带IL-1β-511T/T纯合子基因型PBMC经LPS刺激后IL-1β的分泌量明显较非T/T纯合子为高(P<0.05);雷公藤甲素能显著抑制LPS诱导的C/C和C/T基因型PB-MC分泌IL-1β(P<0.05),但对T/T基因型的抑制作用不明显(P>0.05)。结论:IL-1β基因-511C-T多态性与IL-1β的分泌量相关,雷公藤甲素对不同基因型的IL-1β抑制作用有差异,这可能是导致雷公藤药理作用出现个体差异的原因之一。 盛冬云 涂胜豪 陈红波 胡永红关键词:白细胞介素1 雷公藤属 雷公藤治疗类风湿关节炎的疗效和生活质量评价 被引量:16 2006年 目的以甲氨喋呤(MTX)为对照,观察接受雷公藤治疗的类风湿关节炎患者的生活质量和疗效,旨在科学地评价雷公藤在治疗类风湿关节炎中的作用。方法80例活动性类风湿关节炎患者按1∶1比例随机分入雷公藤组和MTX组,分别服用雷公藤片6片d/,MTX10mg/周,共12周,治疗前后分别测定临床指标及填写类风湿关节炎生活质量量表。结果74例病人完成治疗,雷公藤组总有效率为84.2%,副反应发生率为25.6%,M TX组总有效率为86.6%,副反应发生率为22.2%,两组差异无统计学意义。雷公藤能明显提高患者生活质量,但与MTX比较差异无统计学意义。结论雷公藤治疗类风湿关节炎疗效肯定,并且能改善患者生活质量。 涂胜豪 胡永红关键词:雷公藤 类风湿关节炎 临床疗效 生活质量 单核苷酸多态性在类风湿关节炎中的研究进展 被引量:12 2004年 陈红波 涂胜豪 胡永红关键词:单核苷酸多态性 类风湿关节炎 肿瘤坏死因子 肿瘤坏死因子受体 白细胞介素 雷公藤甲素对健康人外周血单个核细胞分泌TNF-α的抑制作用与TNF-α基因多态性的关系 被引量:3 2006年 目的探讨雷公藤甲素对外周血单个核细胞(PBM C)分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的抑制作用与TNF-α基因多态性之间的关系。方法采用等位基因特异引物PCR法对健康人TNF-α基因启动子区-308位点基因多态性进行检测,EL ISA法检测TNF-α的量。结果TNF--α308非G/G纯合子基因型健康志愿者PBM C经脂多糖(LPS)刺激后TNF-α的分泌量明显较TNF--α308 G/G纯合子基因型的志愿者高;雷公藤甲素能够抑制TNF--α308 G/G纯合子基因型健康志愿者PBM C分泌TNF-,α而对TNF--α308非G/G纯合子基因型健康志愿者PBM C分泌TNF-α没有明显的抑制作用。结论雷公藤甲素抑制外周血单个核细胞分泌TNF-α的量与TNF-α基因多态性有关。 涂胜豪 陈红波 盛冬云 胡永红 刘沛霖关键词:基因多态性 雷公藤甲素 外周血单个核细胞 雷公藤甲素抑制类风湿关节炎患者外周血单个核细胞分泌TNF-α及其基因多态性的关系 被引量:5 2007年 目的探讨雷公藤甲素(TP)抑制类风湿性关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)及其基因多态性的关系。方法采用特异基因等位引物PCR法,对RA患者TNF-α基因启动子区-308位点G-A多态性进行基因型检测,同时进行PBMC培养,用脂多糖(LPS)刺激培养细胞,并予以1.0,5.4和15.0 ng.mL-1雷公藤甲素处理PBMC,收集培养上清液,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清液中TNF-α的含量。结果低剂量TP处理后,与单纯用LPS处理比较,AA,AG基因型组TNF-α分泌量的下降幅度分别为3.80%,4.91%和20.74%(P>0.05),而GG基因型组TNF-α的下降幅度达20.74%(P<0.05)。中剂量TP处理后,与单纯用LPS处理比较,AA,AG和GG基因型组TNF-α的下降幅度分别为20.42%,34.73%和41.69%(P<0.05)。但用高剂量TP处理后,TNF-α的分泌量略有升高,但在这三种基因型组中差异无显著性(P>0.05)。结论RA患者TNF-α基因-308位点多态性与TNF-α的分泌量相关,不同浓度的TP对不同基因型的TNF-α抑制作用有差异,这可能是导致TP药理作用出现个体差异的原因之一。 熊日波 涂胜豪关键词:雷公藤甲素 单核细胞 基因多态性 雷公藤甲素人血浆浓度的液质联用测定方法探讨 被引量:7 2005年 目的:建立高效液相色谱/质谱联用测定人血浆中雷公藤甲素浓度的方法.方法:应用Thermo-keystone Hypurity G18柱(150 mm× 2.1 mm,5μm);流动相为甲醇-水(30:70);流速为0.2 mL·min-1;柱温为40℃,自动进样瓶温10℃;进样量为10μL.采用LCQ Deca XP TM液质联用仪,离子源为APCI源,源电压4.0 kV;加热毛细管温度200℃;氮气(N2)流速50 mL·min-1;辅助气流速15 mL·min-1;正离子方式检测;扫描方式为选择反应监测(SRM),用于定量分析的离子质荷比(m/z)分别为343和246.结果:雷公藤甲素的线性范围为4.1~262.0μg·L-1,最低检测浓度为2.0 μg·L-1.日内、日间精密度分别为1.5%~5.6%和4.1%~7.8%.结论:液质联用方法适用于临床人体血浆雷公藤甲素浓度监测. 涂胜豪 陈红波 谭志荣 胡永红关键词:高效液相色谱-质谱法 雷公藤甲素 血浆浓度