广东省粤港关键领域重点突破项目(YG20905059)
- 作品数:1 被引量:0H指数:0
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- 血管内皮生长因子-2抑制剂细胞筛选模型的构建及应用
- 2011年
- 目的建立针对以血管内皮生长因子受体-2(vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2)为靶标的特异及灵敏的细胞模型体系,用于酪氨酸激酶受体(receptor tyrosine kinase,RTK)抑制剂的筛选和研究。方法构建人源VEGFR-2真核表达载体pcDNA3.1-VEGFR-2,将其转染至NIH 3T3细胞,获得稳定转染的细胞克隆,并对其进行功能学鉴定及应用;应用瞬时转染VEGFR-2的HeLa细胞,建立VEGF依赖性的受体磷酸化细胞模型及应用。结果在无血清培养条件下,稳定转染VEGFR-2的NIH 3T3细胞获得VEGF依赖性的细胞增殖特征;HeLa细胞经瞬时转染VEGFR-2后,可以检测出明显的VEGF依赖性的受体酪氨酸磷酸化。通过应用已知VEGFR-2抑制剂及自行合成化合物,确证以上细胞模型具有较高机制针对性的特征。结论所构建并确证的细胞模型具有较高特异性和灵敏性,可适用于VEGFR-2和其他RTK抑制化合物的体外筛选与研究。
- 付水袁远张苗苗褚邦勇宁志强
- 关键词:血管内皮生长因子血管内皮生长因子受体NIH3T3细胞HELA细胞酪氨酸激酶受体