江苏省卫生厅科技发展基金(H200508)
- 作品数:4 被引量:11H指数:3
- 相关作者:张馥敏陈建梅马文珠姚永伟李勇更多>>
- 相关机构:江苏省人民医院泰州市高港人民医院更多>>
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- 辛伐他汀对过氧化氢诱导的骨髓间充质干细胞凋亡的影响
- 2010年
- 目的研究辛伐他汀对过氧化氢(H2O2)诱导的骨髓间充质干细胞(BMSCs)凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法采用全骨髓贴壁培养法培养SD大鼠BMSCs,随机分成7组:正常对照组(A组)、H2O2处理组(B组)和不同浓度辛伐他汀处理组(C1、C2、C3、C4组,分别为辛伐他汀0.001、0.01、0.1、1μmol/L)及LY294002干预组(D组)。流式细胞术检测各组细胞凋亡率,并用Western blot检测BMSCs中p-Akt、Akt表达。结果与B组比较,辛伐他汀处理组均抑制H2O2诱导的BMSCs凋亡,以C2组抗凋亡作用最为显著(P<0.05);而LY294002(D组)能明显阻断辛伐他汀的抗凋亡效应(P<0.01)。辛伐他汀处理组p-Akt活性显著高于A、B组(P<0.01),而LY294002(D组)阻断p-Akt水平(P<0.01)。结论一定浓度范围内的辛伐他汀能抑制H2O2诱导的BMSCs凋亡,其机制可能与PI3K/Akt信号通路有关。
- 陈建梅姚永伟李勇张馥敏
- 关键词:辛伐他汀过氧化氢骨髓间充质干细胞凋亡
- 辛伐他汀对内皮祖细胞增殖、迁移及凋亡影响的研究被引量:4
- 2007年
- 目的:细胞水平观察不同浓度辛伐他汀对内皮祖细胞(endothelial progenitorcells,EPCs)功能的影响。方法:采用密度梯度离心法从人外周血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被培养板上,培养7天后,收集贴壁细胞,通过激光共聚焦显微镜鉴定,FITC-UEA-I和DiI-acLDL双染色阳性细胞为正在分化EPCs。以不同浓度辛伐他汀(分别为0.0001、0.0010、0.0100、0.1000、1.0000 μmol/L)或PI3K阻断剂(LY294002)+0.01 μmol/L辛伐他汀和EPCs培养。分别采用MTT比色法、改良的Boyden小室和碘化丙啶(PI)标记观察辛伐他汀对EPCs的增殖、迁移和凋亡影响。结果:辛伐他汀显著提高了外周血EPCs的迁移能力、增殖能力与抗凋亡能力(P<0.05)。辛伐他汀浓度在0.01 μmol/L时对EPCs功能影响达到最大。随着药物浓度的继续增大,EPCs的上述功能反呈下降趋势,但0.1 μmol/L组仍高于对照组。辛伐他汀对EPCs的功能影响能被LY294002阻断。结论:辛伐他汀能增加EPCs的增殖、迁移、抗凋亡功能,其机制可能与磷酸酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号途径有关。
- 杨乃全张馥敏胡政力张定国马文珠
- 关键词:他汀类药物内皮祖细胞增殖迁移凋亡
- 骨髓间充质干细胞的分离、培养及生物学特性被引量:3
- 2010年
- 目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的体外分离培养方法并鉴定其生物学特性。方法采用全骨髓贴壁细胞培养法进行BMSCs的分离培养,倒置相差显微镜下观察细胞形态及生长特性,绘制细胞生长曲线,并检测细胞在不同诱导条件下向成脂肪细胞和成骨细胞分化的能力。结果原代大鼠BMSCs培养24h后镜下观察大部分细胞已经贴壁,传至第三代,细胞形态均一,呈梭形、螺旋样排列。经过约2d的适应期,3~7d进入对数生长期,7d后进入平台期;成骨细胞诱导18d,茜素红染色可见明显钙结节,成脂肪细胞诱导2周后油红O染色可见明显脂质沉淀。结论全骨髓贴壁细胞培养法操作简单、快速,可以获取形态均一、纯度较高的BMSCs。
- 陈建梅姚荣伟李勇张馥敏
- 关键词:骨髓间充质干细胞
- 辛伐他汀对骨髓间充质干细胞增殖及分泌功能影响的研究被引量:4
- 2010年
- 目的:细胞水平观察不同浓度的辛伐他汀对骨髓间充质干细胞(bone marrow-drived mesenchymal stem cells,BMSCs)的增殖及旁分泌功能的影响并探讨其可能的机制。方法:采用全骨髓贴壁培养法培养SD大鼠的骨髓间充质干细胞,取3代对数生长期细胞,无血清培养12h,不同剂量的辛伐他汀(0、0.001、0.010、0.100、1.000μmol/L)与MSCs共培养24h,采用CCK-8试剂盒检测各浓度组BMSCs增殖情况,通过半定量RT-PCR检测不同浓度的辛伐他汀诱导BMSCs中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)的mRNA表达。采用Western blot检测PAkt、AKt的表达。结果:辛伐他汀在一定浓度范围内(0.001~0.100μmol/L)显著提高了BMSCs增殖和VEGF和HGF的mRNA表达水平(与对照组比较,P<0.01)。辛伐他汀浓度在0.010μmol/L时对BMSCs的增殖和分泌功能的影响最为显著,随着药物浓度的加大,BMSCs的上述功能呈下降趋势。与对照组比较,1.000μmol/L辛伐他汀对BMSCs无显著的促增殖作用,但却明显上调了VEGF和HGFmRNA的表达。0.010μmol/L辛伐他汀组pAKt表达及pAKt/AKt比值显著高于对照组(P<0.01)。结论:辛伐他汀在一定浓度范围内对骨髓间充质干细胞的增殖及分泌功能有促进作用,其机制可能与Akt信号通路有关。
- 陈建梅张馥敏王连生姚永伟赵强马文珠
- 关键词:他汀类药物骨髓间充质干细胞旁分泌