吉林省科技厅国际合作项目(20050703-6)
- 作品数：12 被引量：44H指数：4
- 相关作者：谭岩方艳秋段秀梅刘力华姜艳芳更多>>
- 相关机构：吉林大学第一医院吉林大学吉林大学第四医院更多>>
- 发文基金：吉林省科技厅国际合作项目吉林省科技厅重点项目吉林省杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 待产妇与不同疾病患者血清蛋白电泳图谱的鉴别分析被引量：1
- 2007年
- 目的:了解待产妇和肾病型、慢性肝损伤型及异常浆细胞克隆增殖型患者血清蛋白电泳图谱特征。方法:采用国产全自动琼脂糖电泳系统对待产妇女和肾病、肝病、多发性骨髓瘤等患者新鲜血清标本进行血清蛋白电泳分析。结果:待产妇血清白蛋白的相对值、γ球蛋白的相对值降低,而α2、β球蛋白相对增加,不同生理条件或不同疾病下其血清蛋白组分变化均不同。结论:新鲜血清蛋白质经电泳后,可精确地显示并定量不同生理及病理条件下血清蛋白成分的变化。
- 钟兰林瑜蔡玉玲齐亚灵徐立方艳秋谭岩
- 关键词：待产妇电泳图谱
- 5-氮杂胞苷对骨髓间充质干细胞向肌细胞增殖及分化的影响被引量：4
- 2006年
- 目的:探讨在不同浓度5-氮杂胞苷(5-Aza)诱导间充质干细胞(MSCs)分化为成肌细胞过程中, 其对干细胞增殖及分化的影响。方法:分离纯化鉴定4周龄Wistar大鼠骨髓MSCs,以不同浓度5-Aza作用,用四唑盐(MTT)法测定细胞生长活力,观察细胞形态变化,通过RT-PCR及电泳测定诱导后大鼠的MSCs中骨骼肌肌动蛋白的表达。结果:0和1 μmol·L-1 5-Aza对细胞增殖无明显影响;随着5-Aza浓度的增高,MSCs 的增殖逐渐减弱;20～30 μmol·L-1 5-Aza对细胞有毒性作用,影响其增殖。3和6 μmol·L-1 5-Aza,MSCs有骨骼肌肌动蛋白的表达;9和12 μmol·L-1 5-Aza,MSCs有骨骼肌肌动蛋白的表达,该浓度作用9 d后有部分细胞体明显增粗,12 d有肌管样细胞出现。结论:5-Aza影响干细胞分化,调控基因的表达及调控MSCs向肌细胞定向分化为肌管样细胞的过程。
- 陈伟王丽娜姜艳芳王金成段德生
- 关键词：骨髓祖代细胞骨髓间充质于细胞5-氮杂胞苷细胞分化
- 三硝基苯磺酸和噁唑酮诱导肠炎小鼠脾脏中Th1/Th2类细胞因子基因表达的动态研究被引量：4
- 2006年
- 目的对比研究三硝基苯磺酸(TNBS)和唑酮(OXZ)诱导的实验性小鼠肠炎模型脾脏中Th1/Th2类细胞因子基因表达的动态变化。方法雌性BALB/c小鼠,随机分为50%乙醇对照组,OXZ诱导肠炎模型组,TNBS诱导肠炎模型组(保证每组小鼠取材时6只以上)。采用RT-PCR方法观察OXZ和TNBS诱导肠炎后小鼠脾脏于3及7dIFN-γ、IL-4mRNA的表达变化。结果TNBS模型组小鼠在造模后3及7d脾脏中IFN-γmRNA的表达量均高于OXZ模型组(P<0.05),IL-4mRNA的表达量低于OXZ模型组(P<0.05)。结论在造模后3和7dTNBS模型小鼠的外周免疫皆以Th1型为主,OXZ模型小鼠的外周免疫以Th2型为主,可代表肠道局部免疫类型。
- 赵颖杨世忠谭岩姜喆王岚方艳秋
- 关键词：炎症性肠病细胞因子
- 去氢表雄酮及其代谢产物对人肿瘤细胞系的抗增殖作用被引量：3
- 2008年
- 目的:研究去氢表雄酮(DHEA)及其代谢物去氢表雄酮硫酸酯(DHEAs)对HepG2和HT-29细胞增殖的抑制作用及其机制。方法:HepG2和HT-29细胞分别分为对照组、不同浓度(1、10、50、100及200μmol·L-1)DHEA组和DHEAs组,孵育8、24、48及72h后,分别采用噻唑蓝(MTT)比色法和BrdU测定法检测DHEA对肿瘤细胞的生长抑制率,同时测定3-羟基-3-甲基戊二酸单酰A还原酶(HMGR)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)及乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果:①MTT法结果显示,与对照组比较,不同浓度DHEA组HepG2和HT-29细胞增殖抑制率均显著增加(P<0.05)。作用24h时,100μmol·L-1DHEA组细胞增殖抑制率降低最显著(P<0.05),而DHEAs组差异无显著性(P>0.05)。②BrdU法结果显示,当DHEA浓度在50、100和200μmol·L-1时细胞的生长均显著受到抑制,尤其以HepG2细胞的生长抑制率最高(P<0.05)。③DHEA对HepG2细胞HMGR活性抑制率为62%,对HT-29细胞HMGR活性抑制率为51%,而DHEAs则无明显作用。④100μmol·L-1DHEA抑制G6PD的效力为85%,而DHEAs的抑制效力仅为6%。⑤DHEA和DHEAs对细胞LDH的活性影响组间比较差异无显著性(P>0.05)。结论:DHEA对HepG2和HT-29两种肿瘤细胞系均具有较强的抗增殖作用,能明显降低细胞的G6PD或HMGR活性,DHEAs则无明显作用。
- 姜艳芳赵平伟谭岩方艳秋松崎静司
- 关键词：去氢表雄酮葡萄糖-6-磷酸脱氢酶
- 人肝细胞癌相关抗原661基因在大肠杆菌中的克隆、表达及产物纯化被引量：1
- 2007年
- 目的:构建人肝细胞癌相关抗原661(Hepatocellular carcinoma-associated antigens661,HCA661)原核表达载体并诱导其表达,纯化及鉴定目的蛋白。方法:人肝细胞癌SMMC7721细胞基因组DNA经PCR扩增HCA661基因,克隆到pGEM-Teasy中进行酶切、PCR和测序鉴定;构建重组质粒pQE-HCA661,并转化大肠杆菌M15[pREP4],经IPTG诱导表达目的蛋白;镍离子亲和层析柱(Ni2+-NTA)纯化靶蛋白后进行Western blot鉴定。结果:目的基因经酶切和PCR鉴定结果与预期相符,测序结果显示目的基因与GeneBank登录的序列完全一致;工程化大肠杆菌M15[pREP4]经IPTG诱导表达约39kD的目的蛋白。Western blot鉴定结果显示,纯化重组蛋白能够分别与抗His单克隆抗体和抗HCA661多克隆抗体特异性结合。结论:本实验成功地构建了重组原核表达质粒pQE-HCA661,工程菌表达的重组HCA661带有6×His标签,并具有免疫原性,可以用于制备单克隆抗体,或用于检测患者血清中肝细胞癌抗体以预测肿瘤恶性程度。
- 李树蕾谭岩刘力华段秀梅方艳秋许淑芬
- 关键词：基因克隆原核表达蛋白纯化免疫原性
- C-MYC癌基因与消化系统肿瘤关系的研究被引量：1
- 2005年
- 目的:研究消化系统肿瘤中的C-MYC基因扩增的情况。方法:用聚合酶链式反应(PCR)测定84例老年患者恶性肿瘤中的C-MYC基因,通过激光密度扫描仪对EB染色后的琼脂糖凝胶进行积分光密度分析。结果:正常组织无C-MYC扩增,C-MYC/N+L-MYC比值95%可信区间为0.0869～0.6257,胃癌组织C-MYC基因扩增阳性率为69.5%,直肠癌组织的C-MYC基因扩增阳性率为62.2%,肝癌组织C-MYC基因扩增阳性率为55.6%,145例肿瘤组织C-MYC扩增总阳性率为65.5%。结论:癌组织C-MYC扩增高于正常组织,在不同消化系统肿瘤组织中扩增程度不同,与细胞潜在的增殖能力成正相关,对消化系统肿瘤的发生、发展及预后,特别是指导临床基因治疗提供有用的资料。
- 卞隽方艳秋谭岩段秀梅许淑芬刘力华姜艳芳赵平伟
- 关键词：癌基因直肠癌肝癌
- 凋亡抑制蛋白Survivin在原发性肝细胞癌中的表达及其意义被引量：5
- 2008年
- 目的:通过研究凋亡抑制蛋白Survivin在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达情况及其与临床病理特征之间的关系,探讨Survivin在HCC发生、发展中的作用。方法:采用流式细胞术(FCM)及免疫组化(SP)法对30例肝癌组织、20例癌旁组织及10例正常肝组织中的Survivin蛋白进行定量检测,并结合临床资料进行分析。结果:①Survivin在HCC组织中的表达率显著高于癌旁组织及正常肝组织(P<0.05);②Survivin蛋白在癌旁正常组织中无表达;③Survivin蛋白的表达与肿瘤的大小、部位、包膜、AFP无关联(P>0.05),而与镜下门静脉癌栓形成有关联(P<0.05)。结论:Survivin基因蛋白在HCC组织中过表达是反应HCC生物学行为的有效指标,Survivin基因蛋白表达的特异性有望成为HCC基因诊断与治疗的靶点。
- 齐亚灵方艳秋段秀梅谭岩陈东
- 关键词：凋亡抑制蛋白SURVIVIN免疫组织化学流式细胞术
- 构建人肝细胞癌相关抗原HCA661和mtHSP70刺激表位的融合基因疫苗被引量：2
- 2007年
- 目的:构建人肝细胞癌相关抗原661(HCA661)与牛型结核分枝杆菌热休克蛋白70(mtHSP70)刺激表位的融合基因疫苗。方法:通过PCR技术扩增HCA661基因,定向克隆至真核表达质粒pCI-neo后测序。通过PCR技术从牛型结核分支杆菌基因组中扩增包含mtHSP70刺激表位的DNA片段,亚克隆至pGEM-Teasy后测序。将该刺激表位片段插入pCI-HCA661中HCA661下游,利用PCR和酶切方法鉴定重组真核表达质粒pCI-HCA661-mtHSP70E。结果:HCA661 PCR扩增产物为1040 bp,mtHSP70表位PCR产物为312 bp,测序结果均分别与GenBank登记的序列完全相同。PCR和酶切鉴定结果表明,构建的重组真核表达质粒pCI-HCA661-mtHSP70刺激表位中含有正确编码的融合基因片段。结论:成功构建含有人肝细胞癌相关抗原HCA661-mtHSP70刺激表位的融合基因疫苗。
- 李玉琴谭岩李树蕾刘力华段秀梅方艳秋许淑芬
- 关键词：分枝杆菌热休克蛋白70表位
- COX-2和VEGF蛋白在HCC组织中表达及其与HCC血管形成的关系被引量：2
- 2008年
- 目的:通过检测COX-2蛋白与VEGF蛋白在肝细胞癌(HCC)中的表达情况,探讨COX-2对HCC血管形成的影响。方法:应用免疫组织化学(SP)法对30例肝癌组织、10例正常肝组织中的COX-2、VEGF蛋白进行定量检测。同时应用CD34标记肿瘤新生血管,根据CD34阳性的血管内皮细胞计数来测定微血管密度(MVD)值。结果:HCC组织中COX-2和VEGF表达阳性率明显高于对照组(P<0.001),COX-2表达与VEGF表达显著相关(r=0.632,P<0.01),且COX-2和VEGF均阳性的HCC组织MVD值明显高于两者均为阴性的组织(P<0.01)。结论:VEGF的表达随着COX-2表达增高而增高,提示COX-2可能通过诱导VEGF表达而促进HCC血管形成。
- 方艳秋齐亚灵刘婷段秀梅谭岩陈东
- 关键词：环氧合酶-2微血管密度
- 基因佐剂结核杆菌HSP70增强HCA661基因疫苗免疫应答被引量：7
- 2008年
- 目的:评价结核分枝杆菌HSP70(Mycobacterium tuberculosis heat shock protein 70,mtHSP70)羧基端作为基因佐剂对HCA661(Hepatocellular carcinoma associated antigens 661)基因疫苗免疫效果的影响。方法:将HCA661及与mtHSP70羧基端的串联体分别克隆到pCI-neo中构建基因疫苗;将eGFP及与mtHSP70羧基端的串联体分别克隆到pCI-neo,体外转染φA细胞,根据eGFP的表达评价重组质粒中靶基因的转录表达效率。基因疫苗免疫BALB/c小鼠,SABC、Western blot检测免疫血清中特异性HCA661抗体;流式细胞术、ELISA法检测免疫血清中特异性HCA661抗体水平。结果:重组质粒构建成功;80%φA细胞转染eGFP后呈现绿色荧光;单基因和融合基因疫苗组动物均产生了针对HCA661的特异性抗体,融合疫苗组诱导的抗体水平较单基因疫苗组显著增高,融合基因疫苗组未产生针对mtHSP70的抗体。结论:mtHSP70羧基端作为基因佐剂增强机体对HCA661融合基因疫苗的特异性免疫应答。
- 李树蕾谭岩刘力华段秀梅方艳秋许淑芬车媛媛
- 关键词：融合基因疫苗基因佐剂
