湖北省自然科学基金(2007ABA254)
- 作品数：8 被引量：16H指数：3
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- 相关机构：武汉大学天津医科大学总医院更多>>
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- 钠钙离子交换体介导的钙超载对造影剂诱导NRK52E细胞损伤的影响被引量：3
- 2008年
- 目的:本研究探讨钠钙离子交换体(NCX)是否参与了造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤及反向模式钠钙离子交换体抑制剂KB-R7943对造影剂诱导的肾小管上皮损伤的影响。方法:鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)被分成6组:正常对照组、造影剂组、甘露醇组、钙离子拮抗剂(CCB)组、KB-R7943(10-5mol/L)和KB-R7943(10-6mol/L)组。造影剂作用1 h后,细胞损伤采用LDH检测,细胞形态变化及细胞凋亡分别由倒置显微镜和流式细胞仪检测;细胞内钙采用共聚焦微镜测定;钠钙离子交换体mRNA表达采用RT-PCR测定。结果:造影剂作用1 h后,细胞损伤、细胞凋亡、细胞内钙进行性增加,显著高于相同渗透压甘露醇组;KB-R7943显著改善了上述异常,且较相同浓度CCB具有更好的效果并显示出剂量效应;钠钙离子交换体mRNA表达没有变化。结论:经反向模式钠钙离子交换体导致的细胞内钙超载参与了造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤;反向模式钠钙离子交换体抑制剂KB-R7943以呈剂量方式对造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤发挥保护作用。
- 杨定平贾汝汉丁国华杨红霞
- 关键词：造影剂肾小管上皮细胞钙超载
- 非洛地平减轻造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤被引量：4
- 2008年
- 目的探讨钙通道拮抗药非洛地平是否对造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤具有保护作用及其机制。方法培养大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)与非洛地平(10-5mol.L-1)作用12 h后,加入造影剂(110 mgI.L-1)作用0.5,1.0 h,采用乳酸脱氢酶(LDH)检测细胞损伤,倒置显微镜观察细胞形态变化,流式细胞仪检测细胞凋亡,共聚焦显微镜测定细胞内钙和反应氧产物水平。相同渗透压甘露醇作对照。结果泛影葡胺作用0.5,1.0 h明显诱导细胞损伤或细胞凋亡,造影剂组细胞内钙和反应氧产物随时间进行性增加,显著高于相同渗透压甘露醇组和对照组;非洛地平降低细胞内钙和反应氧产物水平,同时降低细胞损伤和细胞凋亡。结论非洛地平通过降低细胞内钙超载和氧化应激对造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤发挥保护作用。
- 杨定平贾汝汉丁国华杨定位
- 关键词：非洛地平造影剂肾小管上皮细胞
- KB-R7943对造影剂诱导NRK52E细胞凋亡及p38MAPK信号通路的影响被引量：1
- 2008年
- 目的探讨经钠钙离子交换体介导的细胞内钙超载及p38MAPK信号通路是否参与了造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤及反向模式钠钙离子交换体抑制剂KB—R7943对造影剂诱导的肾小管上皮细胞凋亡及p38MAPK信号通路的影响。方法鼠肾小管上皮细胞（NRK52E）被分成6组：A正常对照组；B造影剂组；C甘露醇组；DCCB（1×10^-5mol／L）；EKB—R7943（1×10^-5mol／L）；FKB—R7943（1×10^-6mol／L）。造影剂作用1h后，细胞损伤采用LDH检测，细胞形态变化及细胞凋亡分别由倒置显微镜和流式细胞仪检测；细胞内钙通过Fluo-4染色共聚焦微镜测定；钠钙离子交换体mRNA表达采用RT—PCR测定；p38蛋白的表达采用Westernblot测定。结果造影剂作用1h后，细胞损伤、细胞凋亡、细胞内钙明显增加，显著高于相同渗透压甘露醇组；p-p38表达30min时增加、60min时下降。KB—R7943显著降低细胞损伤、细胞凋亡、细胞内钙水平、抑制p—p38的高表达述并显示出剂量效应；钠钙离子交换体mRNA表达没有变化。结论经反向模式钠钙离子交换体导致的细胞内钙超载诱导了造影剂诱导的肾小管上皮细胞凋亡及p-p38蛋白的高表达；KB—R7943以呈剂量方式降低造影剂诱导的肾小管上皮细胞凋亡及p—p38蛋白的表达。
- 杨定平贾汝汉丁国华张杰
- 关键词：造影剂肾小管上皮细胞P38MAPK
- 高糖加重造影剂诱导的肾小管上皮细胞凋亡
- 2010年
- 目的探讨高糖对造影剂诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响及其分子机制。方法将NRK52E细胞分成6组：正常对照组（A组）；造影剂组（B组）；葡萄糖（5mmol／L）＋造影剂组（C组）；葡萄糖（15retool／L）＋造影剂组（D组）；葡萄糖（30mmol／L）＋造影剂组（E组）；8]3203580＋葡萄糖（30mmol／L）＋造影剂组（F组）。F组SB203580（20μmol／L）在造影剂加入30min前加入。结果C组细胞葡萄糖作用6、12、24h及D、E组细胞葡萄糖作用6h，未见造影剂诱导的肾损伤和肾小管上皮细胞凋亡加重。D、E组细胞葡萄糖作用12h，造影剂肾损伤和肾小管上皮细胞凋亡重于B组，葡萄糖作用24h，肾损伤和肾小管上皮细胞凋亡重于葡萄糖作用12h，且E组重于D组（P〈0．05）。高糖显著增加造影剂诱导的肾小管上皮细胞ROS水平及p-p38和caspase3蛋白表达，SB203580抑制1〉p38和caspase3蛋白表达。ROS与p-p38、caspase3及p-p38与caspase3呈显著正相关（r分别为0．70、0．68和0．65，P〈0．05）。结论高糖以时间和剂量依赖方式加重造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤，其分子机制与高糖显著增加细胞内ROS水平及上调p-p38、caspase3表达有关。
- 杨定平贾汝汉丁国华杨定位
- 关键词：高糖造影剂肾小管上皮细胞凋亡
- 反向模式钠钙离子交换体抑制剂降低造影剂诱导的肾小管上皮细胞凋亡被引量：3
- 2008年
- 目的探讨反向模式钠钙离子交换体抑制剂KB-R7943是否对造影剂肾损伤具有保护作用。方法培养大鼠肾小管上皮细胞分别与不同浓度KB-R7943（10^-5，10^-6 mol／L）作用12h后，加入造影剂作用1h，采用LDH检测细胞损伤，倒置显微镜观察细胞形态变化，流式细胞仪检测细胞凋亡，共聚焦显微镜测定细胞内钙和反应氧产物水平，RT-PCR检测钠钙离子交换体mRNA表达。相同渗透压甘露醇作对照。数据以均数±标准差（x±s）表示，统计采用方差分析和q检验，简单直线相关分析两者相关性，以P〈0．05为差异具有统计学意义。结果造影剂作用1h诱导了明显细胞损伤和细胞凋亡，细胞内钙和反应氧产物增加，KB-R7943降低了细胞内钙和反应氧产物水平，同时降低了细胞损伤和细胞凋亡并呈剂量效应；钠钙离子交换体mRNA表达无变化。结论KB-R794对造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤具有保护作用。
- 杨定平贾汝汉丁国华杨定位熊晓玲
- 关键词：造影剂细胞凋亡
- 选择性抑制钠钙交换蛋白反向转运对造影剂致急性肾损伤大鼠的影响被引量：5
- 2013年
- 目的观察钠钙交换蛋白（Na^＋／Ca^2＋exchanger，NCX）抑制剂KB—R7943对造影剂致急性肾损伤（Cl—AKI）大鼠的影响。方法雄性Wistar大鼠24只，计算机随机法分成4组：正常对照组、CI＋AKT组及5、10mg/kgKB—R7943治疗组，每组6只。造影刹注射后1d测定大鼠肾功能及。肾血流动力学变化；TUNEL法检测肾小管上皮细胞捌亡；放免法测定肾组织内皮素1（ET—1）水平。肾组织丙二醛（MDA）及过氧化氢酶（CAT）水平作为肾组织氧化指标。反转录PCR检测肾组织NCXlmRNA表达。结果CI—AKI组大鼠血肌酐湿著高于对照组及5、10mg／kgKB—R7943治疗组[（149±35）比（55±4）、（69±11）、（60±3）μmol／L，均P〈0．05]。CI—AKI组大鼠肾血管阻力指数、肾组织盯一1、MDA及CAT水：平均显著高于对照组及5、10mg／kgKB—R7943治疗组。病理及TUNEL结果显示5、10mg／kgKB—R7943治疗组的肾小管上皮细胞坏死与凋亡显著轻。对照组、CI—AKI及10mg／kgKB—R7943治疗组大鼠NCXlmRNA表达差异无统计学意r艾。结论肾小管上皮细胞NCX反向转运介导的肾组织氧化应激增加及ET-1过度生成参与CI—AKI的发病；抑制肾小管上皮细胞NCX反向转运对CI—AK1有保护作用。
- 杨定位杨定平贾汝汉林珊
- 关键词：钠钙交换蛋白肾衰竭造影剂氧化性应激凋亡
- 内质网应激在对比剂诱导肾小管上皮细胞凋亡中的作用被引量：5
- 2013年
- 目的:探讨内质网应激(ERS)在对比剂诱导的肾小管上皮细胞凋亡中的作用及N-乙酰半胱氨酸(NAC)的保护作用。方法:将不同浓度(50,100,150mgI/ml)碘普罗胺分别加入体外培养的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)中孵育1h;10mmol/L NAC预处理细胞1h后,加入100mgI/ml碘普罗胺共孵育1h。Hoechst-33342染色法检测肾小管上皮细胞凋亡率;荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)的产生;Western印迹法检测细胞内内质网功能调节蛋白GRP78、内质网源性转录因子CHOP表达水平。结果:对比剂呈浓度依赖性诱导NRK-52E细胞凋亡,且呈浓度依赖性诱导NRK-52E细胞内ROS生成及GRP78、CHOP蛋白表达上调(P<0.05);经NAC预处理后,细胞内ROS生成及细胞凋亡率明显下降(P<0.05),且GRP78、CHOP蛋白表达下调(P<0.05)。结论:碘普罗胺能诱导肾小管上皮细胞凋亡,其机制可能与细胞内ROS生成增加,诱发ERS,上调GRP78、CHOP蛋白表达有关。抗氧化剂NAC通过降低NRK-52E细胞内ROS介导的ERS,减少肾小管上皮细胞凋亡。
- 杨一菲杨定平贾汝汉丁国华
- 关键词：对比剂内质网应激肾小管上皮细胞细胞凋亡活性氧N-乙酰半胱氨酸
- N-乙酰半胱氨酸对碘普罗胺诱导足细胞氧化应激损伤的保护作用被引量：2
- 2012年
- 随着介入影像学的深入发展，对比剂肾病的发生率逐年增高，成为院内获得性急性肾损伤的第3位原因。目前大多的研究主要集中在对比剂对肾小管上皮细胞的损伤，而尚未检索到对肾小球滤过屏障之一的足细胞的研究报道。我们通过体外足细胞培养来探究对比剂对足细胞氧化应激的影响，以及抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）对足细胞的保护作用。
- 李飞杨定平贾汝汉丁国华
- 关键词：N-乙酰半胱氨酸氧化应激损伤足细胞碘普罗胺对比剂肾病肾小球滤过屏障
