国家自然科学基金(30771606)
- 作品数：22 被引量：50H指数：5
- 相关作者：丁壮丛彦龙母连志李少丽王昌庆更多>>
- 相关机构：吉林大学军事医学科学院吉林农业科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- RNAi靶向NP、L基因抑制鹅源副黏病毒在CEF中的复制
- 前言:本试验将已构建好的针对GPMV NP及L基因的表达shRNA的载体:NP14、NP18、L60、L145转染CEF细胞后接种GPMV,观察RNAi在CEF中对GPMV的抑制作用。接毒后36 h RealTime R...
- 刘美李少丽王昌庆吴昊邱蜜蜜尹仁福丛彦龙丁壮
- 文献传递
- 拯救NA-1株GPMV微型基因组的构建及鉴定
- 前言:本研究用反向遗传操作技术拯救NA-1株GPMV,用pVAX-1载体作骨架,构建了包含病毒两个末端及.HdvRz序列的微型基因组。材料与方法:首先用.PCR方法将CMV启动子
- 李少丽王昌庆丛彦龙丁壮孙玉章
- 文献传递
- 猪源副粘病毒的分子鉴定被引量：7
- 2008年
- 参照GenBank发表的相关猪源副粘病毒和禽源副粘病毒融合蛋白F基因核苷酸序列,设计并合成了4对引物,采用RT-PCR技术对本研究室分离的猪源副粘病毒JL-1株F基因进行探索性扩增、序列测定,在此基础上设计引物扩增HN基因、进行序列测定,分析F、HN基因序列,对该病毒进行分子鉴定。结果显示,扩增出了JL-1株F、HN基因目的条带,序列分析表明其与猪源副粘病毒病家族其他成员即蓝眼病病毒、尼帕病毒、梅那哥病毒同源性很低,与禽副粘病毒1型(APMV-1)具有高度同源性。初步确定分离的猪源副粘病毒为禽副粘病毒1型。
- 毕玉海丛彦龙李志杰吴昊丁壮
- 关键词：分子鉴定融合蛋白基因
- RNAi靶向新城疫病毒M和P基因在CEF细胞中抑制新城疫病毒复制的研究
- 前言新城疫(Newcastle disease,ND)是由副黏病毒科腮腺炎病毒属的禽副黏病毒Ⅰ型(即新城疫病毒)引起的高度接触性禽类烈性传染病。以呼吸道症状为特征,同时伴发神经症状、胃肠道病变和头部肿大。国际兽疫局(Of...
- 尹仁福刘新鑫丁壮刘美王昌庆李少丽吴昊邱蜜蜜
- 文献传递
- 鹅源副黏病毒NA-1株反向遗传操作体系的建立被引量：5
- 2010年
- 应用cRACE等方法扩增鹅源副黏病毒NA-1株cDNA5′末端和3′末端,分6段扩增得到病毒的结构基因序列,而后连接本室构建的TLH-T转录载体,构建其cDNA全长克隆。在引入分子标签和验证辅助质粒的功能后,4质粒系统共转染VT7细胞系,成功拯救出了具有感染性的鹅副黏病毒。鹅源副黏病毒NA-1株反向遗传操作体系的建立为进一步深入研究该病毒基因组的功能以及新型疫苗的研发奠定了基础。
- 孙玉章丁壮孟柯音丛彦龙母连志王昌庆李少丽
- 关键词：鹅副黏病毒病毒拯救
- 一例鹅副黏病毒病的诊断与防治
- 2012年
- 2010年春季,吉林市某珍禽养殖场饲养的2月龄莱茵鹅1 200只暴发了副黏病毒病,并引起大量死亡,现将该病的诊断及防治情况介绍如下。
1临床症状
患鹅发病初期拉白色稀粪,其后粪便呈水样,暗红色或墨绿色;患鹅精神不振、羽毛蓬松、两肢无力而蹲地，有的单脚提起。
- 张秀峰刘佳旭丁壮刘玉茹
- 关键词：鹅副黏病毒病临床症状白色稀粪莱茵鹅养殖场
- RNAi靶向NP、L基因抑制鹅源副黏病毒在鸡胚成纤维细胞中的复制被引量：2
- 2009年
- 构建了针对鹅源副黏病毒(GPMV)NA-1株NP及L基因的RNA干扰质粒;将转染质粒36 h后的鸡胚成纤维细胞接种病毒,通过病毒滴度、实时荧光定量RT-PCR、细胞病变以及间接免疫荧光结果分析,表明均能抑制GPMV在CEF中复制和增殖。本试验对研究GPMV复制和抗病毒治疗提供了技术基础。
- 刘美母连志孟轲音丁壮丛彦龙尹仁福李志杰
- 关键词：鹅源副黏病毒RNA干扰鸡胚成纤维细胞
- 稳定表达T7RNA聚合酶的细胞系的构建及鉴定被引量：3
- 2011年
- 设计1对特异性引物扩增痘苗病毒VTF7-3株的T7RNA聚合酶基因并连接真核表达载体,利用Lipo-fectamineTM2000将重组质粒转染BHK-21细胞,G418筛选2周后,转入验证质粒pT7-HN,经Western-blot和间接免疫荧光鉴定后证实获得了1株能稳定表达T7RNA聚合酶的VT7细胞系。构建的VT7细胞系传30代还能够稳定的表达T7RNA聚合酶,为下一步建立有效的鹅源副黏病毒病毒反向遗传操作平台奠定了基础。
- 母连志孙玉章丛彦龙李少丽张晓东王广美王晓莉丁壮
- 关键词：克隆病毒拯救
- 鹅源副黏病毒NA-1株全长cDNA克隆的构建及鉴定被引量：4
- 2009年
- 应用cRACE法扩增鹅源副黏病毒NA-1株cDNA 5′末端。参照Peter等的方法设计引物,扩增鹅源副黏病毒NA-1株cDNA的3′末端。根据GenBank上发表的鹅源副黏病毒序列设计6对引物,应用RT-PCR方法分6段扩增此病毒结构基因序列,并将其连接完成后与连接有鹅源副黏病毒NA-1株末端序列的转录载体连接,构建得到全长cDNA克隆。鹅源副黏病毒NA-1株全长cDNA克隆成功构建,为下一步病毒的拯救奠定坚实的基础。
- 王昌庆丛彦龙李少丽丁壮尹仁福吴昊刘美邱蜜蜜母连志
- 关键词：鹅源副黏病毒RACE全长CDNA拯救
- “拯救”NA-1株鹅源副黏病毒微型基因组的构建被引量：3
- 2009年
- 根据GenBank上已发表的NA-1株GPMV全序列设计并合成2对特异性引物,克隆得到GPMV的Leader及Tralier序列,与T7启动子、丁肝病毒核酶序列及T7终止子重叠PCR连接后,将连接产物克隆至改造的pVAX-1载体中,并用增强型绿色荧光蛋白基因代替GPMV的整个编码区,只保留与病毒复制、转录和病毒包装相关的调控序列,酶切、测序及荧光鉴定后,与pCI-NP、pCI-P及pCI-L等3个辅助质粒共转染可表达T7RNA聚合酶的VT7细胞系,结果绿色荧光蛋白得到表达,表明成功构建了"拯救"病毒的微型基因组。
- 李少丽丛彦龙王昌庆丁壮尹仁福孙玉章母连志
- 关键词：病毒拯救
