国家自然科学基金(39870676)
- 作品数:5 被引量:53H指数:3
- 相关作者:陈系古钟女奇黄文革陈颖青黄冰更多>>
- 相关机构:中山医科大学中山大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生更多>>
- 小鼠胚胎干细胞在六种培养体系的培养观察被引量:29
- 2000年
- 目的 观察小鼠胚胎干细胞在六种培养体系中的生长情况。方法 小鼠胚胎干细胞 (ESD3细胞株 )在以下六种培养体系中培养 :1 .原代小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF)有血清培养 ,2 .MEF无血清培养 ,3.SNL细胞有血清培养 ,4.LIF(白血病抑制因子 )有血清无饲养层培养 ,5.LIF无血清无饲养层培养 ,6.大鼠肝细胞 (BRL)条件培养基培养。经体外培养 1 0代后 ,观察其克隆形态 ,同时进行碱性磷酸酶检测并将ES细胞接种于裸小鼠皮下 ,观察ESD3的未分化状态和多潜能性。结果 六种培养体系培养的ESD3具有典型的ES细胞克隆形态 :巢状 (集落状 )隆起生长 ,边缘清楚 ,表面平滑 ,结构致密 ;AKP强阳性 ;裸小鼠体内形成了由多种组织构成的畸胎瘤。结论 六种培养体系均能支持ESD3生长 ,并能保持其未分化性和多潜能性 ,为ES细胞的应用研究奠定了良好的基础。
- 黄冰黄文革钟女奇陈颖青陈系古
- 关键词:干细胞血清培养ES细胞裸小鼠饲养层集落小鼠胚胎
- 基于四环素调控系统的HD1BEL-7402 Tet-on细胞模型的建立被引量:2
- 2006年
- 目的:建立表达四环素调控系统(Tet-on)的人肝癌细胞模型(HD1 BEL-7402 Tet-on),为研究四环素调控系统对基因的表达与调控提供一种细胞模型。方法:用四环素调控表达系统(Tet-on),通过脂质体法转染BEL-7402细胞,经G418筛选出高表达Tet-on的细胞株,PCR检测Tet-on基因整合,TRE-luc质粒瞬时转染含有Tet-on的细胞克隆,Dox诱导表达后,检测荧光素酶活性,筛选高诱导表达的抗性克隆,定名为HD1BEL-7402 Tet-on细胞。结果:建立了高效诱导表达的HD1 BEL-7402 Tet-on细胞模型。结论:建立的细胞模型为以后转染TER-x质粒(如GFP),研究任何感兴趣的目的基因的调控打下了基础。
- 钟女奇杨国柱陈系古
- 关键词:BEL-7402细胞转染基因TET-ON