国家自然科学基金(21307163)
- 作品数:5 被引量:8H指数:2
- 相关作者:毛健张建勋王丁众孙世豪洪广峰更多>>
- 相关机构:中国烟草总公司郑州烟草研究院北京理工大学郑州大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中国烟草总公司郑州烟草研究院院长基金郑州烟草研究院院长科技发展基金更多>>
- 相关领域:农业科学轻工技术与工程更多>>
- UPLC-HRMS法定量分析小鼠组织中的6-氧-甲基鸟嘌呤被引量:2
- 2017年
- 为评价4-(N-甲基-N-亚硝氨基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)的器官致癌性,建立了一种定量分析C57BL/6小鼠组织中DNA甲基化加合物6-氧-甲基鸟嘌呤(6-O-MeG)的超高效液相色谱-高分辨质谱(UPLC-HRMS)方法,并分别对NNK染毒后生理盐水对照组、吡唑处理组和5-甲氧基补骨脂素(5-MOP)处理组小鼠肝脏和肺中6-O-MeG的含量进行了测定。用试剂盒提取组织样品DNA,提取物在80℃下酸解后加入内标6-氧-甲基-d3-鸟嘌呤([CD_3]6-O-MeG),经过HLB固相萃取柱净化后进行UPLC-HRMS分析。结果表明:(1)6-O-MeG在0.05~10.00 ng/mL内线性良好(R^2=0.999 8),检出限0.011ng/mL,回收率92.1%~102.2%,日内和日间精密度分别为1.10%~4.34%和1.89%~6.58%。(2)给药4 h后,吡唑处理组小鼠肝脏和肺中6-O-MeG的含量分别为对照组的2.09和1.87倍,5-MOP处理组则分别为对照组的0.32和0.67倍,表明小鼠体内的CYP2A5在NNK的代谢活化过程中起到重要作用。该方法样品前处理简单、选择性好、灵敏度高,适用于小鼠组织中6-O-MeG的测定。
- 李琛王荣浩毛健霍现宽王丁众张建勋
- 关键词:NNKC57BL/6小鼠
- DNA甲基转移酶活性对NNK α-亚甲基羟基化代谢的影响被引量:1
- 2017年
- 为准确评价DNA甲基转移酶(DNMT)的活性对4-(甲基亚硝氨基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)通过α-亚甲基羟基化代谢途径产生O^6-甲基鸟嘌呤(O^6-mG)的影响,采用超高效液相色谱-高分辨质谱(UPLC-HRMS)方法,分别对100 mg/kg NNK染毒后的生理盐水处理组、地西他滨处理组小鼠肝脏和肺中DNMT的活性、DNA甲基化程度,以及4-(3-吡啶基)-4-氧代丁酸(OPBA)、4-(3-吡啶基)-4-羟基丁酸(HPBA)和O^6-mG的质量分数进行了测定。结果表明:(1)地西他滨能够抑制DNA甲基转移酶活性,降低DNA甲基化水平。(2)地西他滨对NNK通过α-亚甲基羟基化代谢产生OPBA和HPBA的途径无显著影响。(3)抑制DNA甲基转移酶的活性,能减少NNK通过α-亚甲基羟基化代谢产生O^6-mG的量。
- 王荣浩李琛毛健刘帅东王丁众张启东霍现宽张建勋
- 关键词:地西他滨
- LC-HRMS法检测C57BL/6小鼠血液中NNK及其7种代谢物被引量:3
- 2016年
- 为准确测定小鼠血液中4-(N-甲基-N-亚硝氨基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)及其代谢物,了解小鼠体内NNK的代谢途径,利用Q Exactive轨道阱高分辨质谱仪,建立了一种同时检测C57BL/6小鼠血液中NNK及其7种代谢物[4-(N-甲基-N-亚硝氨基)-1-(3-吡啶基)-1-丁醇(NNAL)、NNK-N-氧化物(NNK-N-oxide)、NNAL-N-氧化物(NNAL-N-oxide)、4-羟基-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(HPB)、1-(3-吡啶基)-1,4-二醇(PBD)、1-(3-吡啶基)-1-丁酮-4-羧酸(吡啶基丁酮酸)和1-(3-吡啶基)-1-丁醇-4-羧酸(吡啶基羟基酸)]的液相色谱-高分辨质谱(LC-HRMS)方法。以NNK-d4、NNAL-d3和HPB-d4为内标,小鼠血清样品经乙腈沉淀蛋白后,直接进行亲水相互作用色谱(HILIC)柱分离和质谱分析,质谱扫描模式采用一级全扫描和数据依赖二级扫描(Full MS/dd MS2)模式。结果表明:各目标物的定量限在0.042-0.263 ng/m之间,线性相关系数为0.999 1-1.000 0,加标回收率在89.2%-116.5%之间,日内精密度在1.54%-8.06%之间。该方法选择性好,分析效率高,目标物线性范围大,适合于小鼠血液中NNK及其代谢物检测与分析。
- 刘帅东王丁众冯明飞孙世豪刘俊辉洪广峰毛健张建勋
- 关键词:C57BL/6小鼠代谢物
- 微透析-UPLC-MS/MS法同时测定活体大鼠脑内烟碱及其代谢物被引量:2
- 2014年
- 建立了同时测定活体大鼠脑内烟碱(Nic)及其5种代谢物可替宁(Cot)、降烟碱(NNic)、烟碱氮氧化物(NNO)、降可替宁(NCot)和反-3'-羟基可替宁(3-HC)的微透析-超高效液相色谱-串联质谱(UPLC—MS/MS)联用方法。采用微透析系统采集大鼠脑组织样品,加入内标Nic—d3,Cot—d3,NNic-d。和3-HC—d,后直接进行亲水相互作用色谱(HILIC)分离和多反应监测(MRM)分析。结果表明:Nic及其5种代谢物的日内和日间精密度及准确度均小于11%,检出限和探针回收率分别为0.012~0.029ng/mL和4.7%~9.3%。该方法快速简单、灵敏稳定,适合用于活体分析大鼠脑内的Nic及其代谢物。
- 毛健卢剑清徐妍洪广峰卢斌斌孙世豪宗永立张建勋
- 关键词:烟碱代谢物微透析MS鼠脑
- 微透析-HPLC-ECD联用在线测定烟碱暴露大鼠脑内单胺神经递质的动态变化被引量:2
- 2017年
- 为探讨烟碱依赖的形成机理,实时评价烟碱引起的单胺神经递质变化效应,采用在线微透析和高效液相色谱-电化学检测器(HPLC-ECD)联用方法测定了大鼠脑纹状体中多巴胺(DA)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、5-羟色胺(5-HT)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的含量。以2.0μL/min灌流,每15 min收集1次透析液并自动注入五氟苯基柱,在梯度洗脱条件下分离检测。结果表明:方法的线性范围为0.2~500.0 ng/m L,日内和日间精密度均≤9.7%,加标回收率为86.2%~105.9%,体外透析探针回收率为25.3%~28.3%。以2.0 mg/kg烟碱进行腹腔注射后,大鼠纹状体中DA和5-HT的释放增加但未见持续增强,而HVA和5-HIAA的量明显升高。该方法简便快速,灵敏度高,选择性好,适合于烟碱作用下活体动物脑内单胺类神经递质变化的动态分析。
- 徐妍毛健庆宏
- 关键词:纹状体单胺神经递质烟碱
- 微透析-HPLC-ECD联用在线测定烟碱暴露大鼠脑内单胺神经递质的动态变化
- 为探讨烟碱依赖的形成机理,实时评价烟碱引起的单胺神经递质变化效应,采用在线微透析和高效液相色谱-电化学检测器(HPLC-ECD)联用方法测定了大鼠脑纹状体中多巴胺(DA)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(H...
- 徐妍毛健庆宏
- 关键词:纹状体单胺神经递质烟碱
- 文献传递