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国家科技重大专项(2009ZX09102-224)
作品数:
2
被引量:3
H指数:1
相关作者:
高向东
姚文兵
许向阳
童玥
仲恺
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相关机构:
中国药科大学
江苏先声药物研究有限公司
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发文基金:
国家科技重大专项
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相关领域:
医药卫生
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恩度
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氨酸
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苯丙
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苯丙氨酸
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N末端
1篇
丙氨酸
机构
2篇
中国药科大学
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江苏先声药物...
作者
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姚文兵
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高向东
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尹骏
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田浤
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刘静娴
1篇
王西龙
1篇
仲恺
1篇
童玥
1篇
许向阳
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陈海
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中国药科大学...
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2012
1篇
2010
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聚乙二醇N末端定点修饰恩度的性质
被引量:3
2010年
对聚乙二醇(PEG)化恩度的性质进行了研究。肽图法用以验证PEG修饰位点,结果表明PEG修饰在恩度的N末端。圆二色谱和色氨酸荧光谱分别用于检测PEG化恩度的二级结构和三级结构,分析结果显示PEG修饰并没有改变蛋白质本身的结构。尿素诱导的解折叠和酶孵育法用以检测修饰后蛋白的体外稳定性,结果表明修饰后蛋白抗尿素解折叠和抗酶解的能力提高。细胞抗增殖法检测表明修饰后蛋白保留了原有的生物学活性。研究结果表明PEG N末端修饰可以增加恩度的体外稳定性并且保留原有的体外活性。
童玥
仲恺
王西龙
姚文兵
许向阳
高向东
关键词:
恩度
N末端
聚乙二醇
含有对叠氮苯丙氨酸的人内皮抑素的表达及纯化
2012年
优化定点引入对叠氮苯丙氨酸的詹氏甲烷球菌属正交酪氨酰tRNA合成酶/tRNA系统,使用优化后的正交系统在大肠杆菌内表达并纯化在特定氨基酸位点引入对叠氮苯丙氨酸的人内皮抑素突变体。首先将正交酪氨酰tRNA合成酶启动子-15区的TATAA序列突变为TTAA序列,同时将正交酪氨酰tRNA合成酶的第286位天冬氨酸突变为精氨酸以提高对抑制型tRNA反密码子CUA的识别力。然后将质粒pST和pET32a-mhEn转化到大肠杆菌DH10BDE3中得到重组工程菌。该重组菌在含有对叠氮苯丙氨酸的培养基中培养,并经IPTG诱导表达人内皮抑素突变体。利用镍亲和色谱纯化获得人内皮抑素突变体,纯度大于90%。通过对正交酪氨酰tRNA合成酶/tRNA系统的优化,有效提高了系统引入对叠氮苯丙氨酸的效率,人内皮抑素突变体的表达量有了显著提高。
刘静娴
田浤
姚文兵
陈海
尹骏
高向东
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