国家教育部博士点基金(20120061110038)
- 作品数:5 被引量:3H指数:1
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- 相关领域:生物学农业科学化学工程更多>>
- 人参DS和D12H基因的异源共表达
- 2016年
- 利用RT-PCR技术和酶切连接技术克隆得到人参皂苷生物合成关键酶DS和D12H基因,并构建出两种基因的表达载体DS-pAUR123和D12H-pAUR123。通过热转化法将两个表达载体转化到酿酒酵母中,得到重组工程菌。两种基因在重组工程菌中能够表达出具有催化功能的活性蛋白质,实现了人参DS和D12H基因的异源共表达。
- 王雪松李躬军赵寿经安岩曲庆玲卢超
- 关键词:原人参二醇酵母表达系统
- MVA与MEP途径抑制剂对人参皂苷合成能力的影响研究被引量:1
- 2013年
- 通过MVA与MEP途径的抑制剂洛伐他汀和膦胺霉素不同浓度及作用时间对人参发根生长影响的研究,确定洛伐他汀和膦胺霉素对人参总皂苷合成的最高抑制率发生在接种后第3天,分别为57.94%和42.17%。通过对人参发根中单体皂苷Rg1、Re和Rb1含量的HPLC测定发现,洛伐他汀(50μmol/L)对上述单体皂苷合成的最高抑制率依次为50.38%、66.66%和40.11%;膦胺霉素(15μmol/L)对上述单体皂苷的最高抑制率依次为38.53%、38.85%和19.46%,与抑制剂对人参总皂苷含量的影响规律基本一致。推断人参皂苷的生物合成可能同时存在MVA和MEP途径,而MVA途径在人参皂苷的生物合成中可能起主导作用。
- 钱延春刘丽曹豪杰吴明庄园曲庆玲赵寿经
- 关键词:人参皂苷洛伐他汀
- 干扰环阿乔醇合成酶基因的表达对人参皂苷含量的影响被引量:1
- 2014年
- 通过RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)调控人参发根中环阿乔醇合成酶(CS)的表达,实现了在分子水平上对人参皂苷合成途径进行调控,并获得了人参总皂苷含量提高82.17%的可遗传人参发根系。同时,证明了RNAi可成功调控植物次生代谢产物。
- 赵寿经安岩孟洋何沐阳曲庆玲郝东云
- 关键词:生物工程人参皂苷RNAI
- 人参3-O-UGT1基因RNAi表达载体工程菌的构建
- 2018年
- 人参3-O-UGT1基因(Pg3-O-UGT1)是控制人参中二醇型单体皂苷合成的关键酶基因,而二醇型皂苷和三醇型皂苷具有相反的药理活性。本文利用RT-PCR技术和酶切连接技术成功构建人参3-O-UGT1基因RNAi(RNA interference)植物表达载体,通过热转化法将重组表达载体转化进发根农杆菌A4中,得到含有人参3-O-UGT1基因RNAi植物表达载体的工程菌,为诱导人参外植体转化和人参皂苷合成机理奠定了基础。
- 卢超赵寿经张晓佳杜芃川王雪松
- 关键词:生物工程人参皂苷糖基转移酶工程菌
- 人参发根长期冷冻保存方法的研究被引量:1
- 2013年
- 本试验对人参发根长期冷冻保存方法进行了研究。首先对人参发根预培养的培养基成分进行了选择;然后通过对人参发根预培养时间、玻璃化前处理时间和玻璃化脱水时间的正交试验,确定主次因素:玻璃化脱水时间>预培养时间>玻璃化前处理时间;最后对人参发根长期冷冻保存3种具体方式进行了研究,确定了先将人参发根在预培养基上培养7d,然后经玻璃化处理90min(前处理30min+脱水90min)后,在液氮中超低温(-196℃)速冻1d,最后转移到-80℃冰箱中长期冷冻保存的有效方法,为深入开展相关研究奠定了基础。本试验还对冷冻保存前后人参发根的生长活力、总皂苷、总蛋白和总糖的含量,以及过氧化氢酶等主要生理生化指标进行了测定。利用PCR技术对冷冻保存前后人参发根T-DNA上的主要基因进行了分析,确定该冷冻保存方法对人参发根遗传稳定性无影响。
- 钱延春王迪梁彦龙曹豪杰赵寿经