湖南省科技厅科技计划项目(2008FJ2006)
- 作品数：2 被引量：26H指数：2
- 相关作者：唐志晗刘录山姜志胜武春艳谢闵更多>>
- 相关机构：南华大学更多>>
- 发文基金：湖南省科技厅科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PCSK9调控氧化型低密度脂蛋白诱导的THP-1源性巨噬细胞凋亡的机制被引量：3
- 2009年
- 武春艳江璐唐志晗姜志胜刘录山
- 关键词：PCSK9THP-1源性巨噬细胞凋亡
- pcsk9 siRNA对oxLDL诱导的THP-1源性巨噬细胞凋亡的影响被引量：25
- 2009年
- 为研究pcsk9基因沉默后对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导THP-1源性巨噬细胞凋亡的影响,用不同浓度oxLDL处理THP-1源性巨噬细胞48h,Hoechst33258染色检测细胞凋亡,RT-PCR、Western blot分别检测pcsk9 mRNA、NARC-1蛋白的表达.应用Lipofectamine 2000转染3对pcsk9 siRNAs进THP-1源性巨噬细胞中,筛选出最有效的siRNA再转染入THP-1源性巨噬细胞,24h后加入oxLDL处理48h,Hoechst33258染色观察细胞评价细胞凋亡,流式细胞术计数检测细胞凋亡率.结果发现,75mg/LoxLDL处理THP-1源性巨噬细胞48h后,Hoechst33258染色可见大量凋亡细胞.同时RT-PCR、Western blot检测发现,pcsk9 mRNA和NARC-1蛋白质表达量均随oxLDL浓度的增加而增加,75mg/LoxLDL组增加最明显.不同浓度siRNA转染THP-1源性巨噬细胞后,RT-PCR筛选出3对siRNAs的终浓度为80nmol/L均可出现明显的沉默效应.选取此浓度在蛋白质水平检测基因抑制情况,筛选出最有效的一对siRNA.将筛选出来的siRNA转染细胞24h后,再用oxLDL处理48h,Hoechst33258染色及流式细胞计数结果显示,转染siRNA组凋亡明显被抑制.结果表明,在本研究的浓度范围内,随着oxLDL浓度增加pcsk9的表达随之增加,同时,THP-1源性巨噬细胞凋亡也明显增加,75mg/LoxLDL最明显,pcsk9 mRNA和蛋白质的表达也在该浓度最高.提示pcsk9 siRNA能有效抑制pcsk9基因的表达,从而有效抑制由oxLDL诱导的THP-1源性巨噬细胞的凋亡.
- 刘录山谢闵姜志胜杨琼潘利红武春艳唐志晗唐朝克危当恒王佐
- 关键词：凋亡小分子干扰RNA
