国家高技术研究发展计划(2006AA10Z136) 作品数:16 被引量:53 H指数:4 相关作者: 徐银学 张宝乐 方威 王少兵 杨彤彤 更多>> 相关机构: 南京农业大学 太仓广东温氏家禽有限公司 徐州医学院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 江苏省普通高校研究生科研创新计划项目 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
小鼠卵巢中Frizzled家族基因的表达研究 被引量:1 2013年 本研究通过实时定量PCR方法检测了小鼠动情周期卵巢中Frizzled 1-Frizzled 10的表达;结果显示,除Frizzled 8外,其他都有不同程度的表达。在四个动情时期中,Frizzled 1、Frizzled 2仅在动情前期高表达;动情前期和间情期Frizzled 3高表达量;Frizzled 4在动情周期中表达水平都较高,以动情期最高;其他Frizzleds都低水平表达。这表明Frizzleds在四个动情时期卵巢中广泛而差异表达;推测Frizzled 1-Frizzled 4可能在动情周期卵泡发育过程中具有重要作用,这将为揭示Wnt信号通路在卵巢发育过程的作用和机制提供依据。 王少兵 庞训胜 陶显娣 季慕寅 徐银学关键词:FRIZZLED 动情周期 卵巢 小鼠 大约克猪和二花脸猪SLA-DRB基因外显子2的PCR-RFLP多态性分析 被引量:2 2009年 采用PCR-RFLP方法分析大约克猪和二花脸猪SLA-DRB外显子2的多态性。结果显示:RsaⅠ酶切后得到3种等位基因条带,分别为A(141/93/11 bp)、B(111/69/54/11 bp)、D(93/48/39/54/11 bp)。χ2检测表明:二花脸猪SLA-DRB基因外显子2处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),而大约克猪处于非平衡状态(P<0.01)。两品种A等位基因均为优势等位基因,AA型为主要基因型,其频率在品种间无显著差异。首次发现等位基因B、D分别出现在二花脸猪和大约克猪中,有望用于区分两品种。 杨彤彤 张婷婷 赵族 徐银学关键词:大约克猪 二花脸猪 Cloning and Characterization of Porcine TSARG7 Gene and Analysis of Its Tissue-Specific Expression 被引量:1 2009年 TSARG7 is a novel member of the acyltransferase family since its sequence possesses the highly conserved phosphate acyltransferase (PlsC) domain existing in all acyltransferase-like proteins. The porcine TSARG7 had been identified by cloning in silico but had not been confirmed experimentally. The full-length mRNA of porcine TSARG7 gene was sequenced and two splice variants were discovered. The full-length cDNA of TSARG7 variant 1 was 2 513 bp and variant 2 was 2 634 bp. The putative porcine TSARG7 proteins, which were located in the cytoplasm, encoded 458 and 456 amino acids, respectively. Real-time PCR analysis showed that TSARG7 gene was expressed in various tissues, but at different levels. The expression levels of this gene were higher in the skeletal muscle, heart, and testis than that in other tissues, suggesting that the TSARG7 gene played a role in procine skeletal muscle, heart, and testis functions. LI Mei-li LI Gui-qiang FANG Wei WANG Wei SONG Xiao-guang LI Er-lin JIA Chao XU Yin-xue关键词:PIG 苏淮猪7个功能基因的多态性及其与生产性能的相关性 被引量:10 2008年 利用PCR-RFLP方法,对130头苏淮猪的IGF1、MSTN、MyoG、RYR1、RBP4、PRLR、ESR7个功能基因进行多态性检测,并分析其基因型与生长、繁殖性状的相关性。结果表明:7个候选基因均表现了多态性,其中IGF1基因的AB型,RYR1基因的Nn型个体均可作为苏淮猪早期生长的优势基因型;RYR1基因的不同基因型对苏淮猪头胎总产仔数和产活仔数有显著影响。表明,IGF1、RYR1基因可望作为猪生长、繁殖方面的遗传标记用于标记辅助选择。 李隐侠 徐银学 陈杰 于传军关键词:苏淮猪 繁殖性能 功能基因 猪Gpr6基因的克隆及表达分析 2013年 为了探明G蛋白偶联受体6基因(Gpr6)的结构、功能与表达模式,克隆了含有完整阅读框的猪Gpr6的cDNA序列。利用生物信息学方法对Gpr6基因的结构及功能进行了系统研究,运用Real-time PCR技术对其在组织中的表达规律进行了分析,并利用构建的原核表达载体pET32a-Gpr6对其在BL21菌株中的最佳蛋白表达条件进行了筛选。结果表明:猪Gpr6基因的cDNA序列由1 664个核苷酸组成,编码366个氨基酸残基,等电点为7.63,相对分子质量为38.38×103,与牛、犬、人、黑猩猩、大鼠和小鼠的氨基酸相似性分别为91.2%、89.5%、88.3%、88.3%、86.3%和86.1%。猪Gpr6基因在各组织中均有表达,但仅在下丘脑、垂体和肝脏中表达量较高。经原核表达分析,发现成功获得了相对分子质量约为27 000的Gpr6蛋白,并且确定了该蛋白的最佳表达条件为0.8 mmol.L-1IPTG,37℃诱导表达2 h。 李晔 张宝乐 丁建华 张子敬 徐银学关键词:组织表达谱 原核表达 黄Ⅳ肉鸡微卫星多态性与生长和屠宰性状的相关分析 2010年 利用31个微卫星标记分析了黄Ⅳ肉鸡群体的173个个体各标记座位的等位基因数、基因频率、杂合度和多态信息含量,同时测定群体的14项生长性状和屠宰性能指标,采用方差分析法对标记与性状进行相关分析。结果表明:各位点平均等位基因数为4,平均杂合度为0.330 6,平均多态信息含量为0.487 1。方差分析显示:微卫星标记ABR0322、MCW0104对2周龄体重有极显著和显著影响;MCW0331对4周龄体重有显著影响;ABR0322、MCW0258对6周龄体重有极显著和显著影响;MCW0331、MCW0258对8周龄体重、屠体重和半净堂重有显著影响;ABR0322、ADL0146、MCW0067对胸肌重有显著影响;MCW0183、MCW0258对腹脂重有显著影响;ADL0146、MCW0095、MCW0331对肝重有显著影响;LEI0146、MCW0183、MCW0245、MCW0331对肌胃重影响显著;ADL0278、MCW0258、MCW0331对心重有显著影响;MCW 0331对腿肌重有极显著影响。 方威 杨彤彤 卢智彬 袁海峰 徐银学关键词:微卫星标记 生长性状 屠宰性状 促黄体素(LH)对猪卵巢颗粒细胞细胞周期及类固醇激素分泌的影响 被引量:5 2011年 为揭示促黄体素对猪卵巢颗粒细胞生长及类固醇分泌的影响,从当地屠宰场采集猪卵巢,选择表面直径大于6 mm的卵泡(优势卵泡)作为试验材料,将从其中获得的颗粒细胞进行体外培养,并在培养基中添加不同浓度(0 IU/ml、2 IU/ml和4 IU/ml)的促黄体素(LH),通过流式细胞仪、放射性免疫和定量PCR分别检测细胞周期的情况、类固醇激素的分泌和相关基因mRNA的表达。结果显示:高剂量的LH(4 IU/ml)可使G0/G1期的细胞数量由92.79%减少到86.12%;S期细胞数量由1.97%增加到8.43%,并能显著提高细胞周期依赖性蛋白激酶-4(CDK4)和细胞周期素-D2(Cyclin D2)的表达水平;高剂量的LH(4 IU/ml)能显著减少培养基中E2和P4的浓度,并能降低芳香化酶(P450arom)和胆固醇侧链裂解酶(P450scc)的表达。结果表明LH对猪卵巢颗粒细胞生长和类固醇激素分泌有调控作用。 王伟 贺彧 张海燕 田宽校 宋晓光 王晶晶 徐银学关键词:颗粒细胞 促黄体素 细胞周期 类固醇激素 G蛋白偶联受体3:调控神经系统和卵泡发育的关键因子 被引量:3 2013年 G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)是细胞表面最大的受体超家族,参与调节多种生理和病理过程。G蛋白偶联受体3(G protein-coupled receptor 3,Gpr3)是一种新发现的鞘氨醇1-磷酸受体,它直接或者间接参与调节脊椎动物神经系统及卵泡的发育过程。作为潜在的治疗多种神经疾病和卵巢早衰的药物靶标,Gpr3的生理功能及作用的分子机制等都值得进一步研究。文章主要就Gpr3及其介导的信号通路在脊椎动物神经系统发育及卵巢卵泡发育过程中的相关作用作一综述。 张宝乐 高殿帅 徐银学关键词:G蛋白偶联受体 神经系统 卵泡发育 减数分裂 沉默Gpr3基因表达对猪卵泡颗粒细胞凋亡的影响 2014年 G蛋白偶联受体3(G protein-coupled receptor 3,Gpr3)属于G蛋白偶联受体超家族成员,能够维持卵泡卵母细胞减数分裂的前期阻滞,但在卵泡颗粒细胞中的作用不清。该研究利用RNAi技术,以化学合成的siRNA转染体外培养的猪卵泡颗粒细胞,并利用Real-time PCR和Western blot技术检验Gpr3基因的沉默效果;利用MTT(四甲基偶氮唑盐)、流式细胞术和Real-time PCR技术检测沉默Gpr3基因表达对猪卵泡颗粒细胞凋亡以及凋亡相关基因表达的影响。结果显示,Gpr3-siRNA能够有效地抑制猪卵泡颗粒细胞中Gpr3基因mRNA和蛋白的表达(P<0.01);在沉默Gpr3基因表达后,猪卵泡颗粒细胞的细胞活性由0.419升高至0.586,同时细胞凋亡率由2.67%下降至0.42%,并在显著上调Bcl-2表达的同时,下调了Bax的表达(P<0.05)。结果表明,沉默Gpr3基因的表达抑制了猪卵泡颗粒细胞的凋亡,其机制可能与调控Bcl-2和Bax表达有关。 张宝乐 徐银学关键词:RNA干扰 颗粒细胞 细胞凋亡 BMP/Smad信号通路与哺乳动物卵泡发生 被引量:10 2009年 BMPs属于TGF-β超家族成员,在调节哺乳动物的生长、细胞增殖和分化等方面有很广泛的生物学功能。越来越多的证据显示,BMPs在雌性哺乳动物生殖,尤其在卵泡发生过程中发挥重要作用。Smads蛋白是BMP家族细胞内信号转导分子,可将BMPs胞外信号从细胞膜传递入细胞核。文章对BMPs、BMP/Smad信号通路和BMP如何被调节进行概述,并重点对BMP/Smad信号通路在卵泡发生过程中所起的调控作用进行综述。 王伟 王少兵 徐银学关键词:BMPS SMADS 信号通路