国家自然科学基金(31272652)
- 作品数：14 被引量：48H指数：5
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- 相关机构：湖南农业大学湖南文理学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目中国博士后科学基金更多>>
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- 畜产动物过氧化物酶体增殖物激活受体基因的表达模式及功能研究进展被引量：4
- 2013年
- 过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)是一类配体依赖的核转录因子,属核受体超家族成员。自从PPARs于1990年被发现以来,研究人员对啮齿动物和人体PPARs基因的结构与多态性、组织中表达模式、影响表达的因素、信号传导途径以及调控脂类代谢等方面的功能进行了广泛和深入的研究。近年来,PPARs基因在畜禽及鱼类中的表达模式及功能的研究也逐渐开展起来,并取得了一些进展。本文对PPARs基因在畜产动物组织中的表达模式及功能研究进行了综述。
- 黄春红肖调义刘巧林胡毅赵玉蓉
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体
- 赤眼鳟MyD88基因cDNA克隆与表达特性研究被引量：6
- 2016年
- 实验使用RACE-PCR技术获得了赤眼鳟(Squaliobarbus curriculus)髓样分化因子88(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)的c DNA全长,命名为Sc My D88。ScMy D88的cDNA全长为1779 bp,其中开放阅读框855 bp,共编码284个氨基酸残基,推导的蛋白质分子量为33.053 k D,理论等电点为5.66。赤眼鳟My D88具有典型的MyD88结构特征,包括死亡结构域和TIR结构域(Toll-IL-1 receptor domain,TIR),其氨基酸序列和鲤科鱼类具有高度保守性,相似性达到了90%以上,特别是和武昌鱼相比,相似性达到了98%。在检测的9个赤眼鳟组织和器官中均有MyD88表达,其中肝脏、头肾和体肾中表达水平最高,在脑中表达量最低。在草鱼呼肠弧病毒(Grass carp reovirus,GCRV)感染初期(12h内),My D88在赤眼鳟免疫组织中表达水平急剧上升,特别是在脾脏和体肾中尤为明显,随后恢复正常水平。研究表明,MyD88在赤眼鳟抵抗GCRV入侵的免疫应答反应初期发挥了重要作用。
- 王荣华李伟肖调义刘巧林金生振周智愚
- 关键词：基因克隆
- 草鱼、赤眼鳟及杂交F1对嗜水气单胞菌、GCRV的抗性比较研究
- 2018年
- 为探究草鱼、赤眼鳟及其杂交F1在应对嗜水气单胞菌、草鱼出血病病毒(GCRV)的抗性差异,本实验以五月龄鱼为研究对象,采用腹腔注射和高渗浸泡两种方法人工感染以上细菌和病毒,连续7 d观察并记录实验鱼的症状和死亡情况。结果表明:四个群体中,杂交F1对嗜水气单胞菌和GCRV具有较强的抗性。
- 杨雄金生振肖调义
- 关键词：草鱼嗜水气单胞菌草鱼出血病病毒
- 抗红斑丹毒丝菌的rSpaA蛋白猪源单链抗体库构建及单链抗体淘选
- 2016年
- 从免疫过rSpaA的猪的脾淋巴细胞中提取总RNA,采用RT–PCR技术反转录合成cDNA。设计兼并引物扩增抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因片段,采用重叠延伸PCR方法,将VH和VL通过Linker连接成重组单链抗体(以下简写为sc Fv)的基因片段。将sc Fv的基因连接至噬菌粒载体p Comb3Xss,将重组载体电转化至宿主菌XL1-Blue,并经辅助噬菌体M13KO7拯救,获得猪源噬菌体单链抗体库,库容约为2.5×106。以rSpaA为靶抗原,经免疫亲和筛选,获得8株特异性较好的阳性克隆。本研究结果可为制备抗红斑丹毒丝菌的重组sc Fv提供新途径,并为猪丹毒的免疫检测和综合防制提供材料基础。
- 王锐葛猛陈一苇方超柴强强李润成余兴龙
- 关键词：单链抗体红斑丹毒丝菌噬菌体展示技术
- 草鱼和赤眼鳟及其正交F_1代的肌肉营养特性比较被引量：3
- 2017年
- 为比较草鱼和赤眼鳟正交(草鱼(♀)×赤眼鳟(♂))的子一代F1(下文中简称"正交F1")与同龄草鱼、赤眼鳟的肌肉营养特性,评价正交F1肌肉的营养价值,选取18月龄的健康正交F_1、草鱼及赤眼鳟各12尾,采用生化方法分析3种鱼背肌中水分、粗脂肪、粗蛋白和粗灰分的含量以及氨基酸和脂肪酸的组成,并进行氨基酸营养价值评价。结果显示:正交F_1肌肉中的水分含量显著低于草鱼的(P<0.05),显著高于赤眼鳟的(P<0.05);粗蛋白含量显著高于草鱼的(P<0.05),显著低于赤眼鳟的(P<0.05);正交F_1肌肉中的总氨基酸(AA)含量、必需氨基酸(EAA)含量和鲜味氨基酸(DAA)含量分别为156.45、62.81、61.32 mg/g,其中AA含量和DAA含量均显著高于草鱼的(P<0.05),且低于赤眼鳟的(P>0.05);对试验结果进行氨基酸评分(AAS)和化学评分(CS)分析,发现赖氨酸为3种试验鱼共有的评分最高的氨基酸;正交F1不饱和脂肪酸(UFA)占总脂肪酸的67.67%,显著高于赤眼鳟的(P<0.05),显著低于草鱼的(P<0.05),其ω6族多不饱和脂肪酸与ω3族多不饱和脂肪酸族的比值为5.88。结果表明,正交F_1较草鱼具有更好的肌肉营养品质。
- 李伟李迪肖调义黄春红金生振周智愚
- 关键词：肌肉营养脂肪酸
- 赤眼鳟TRIF基因cDNA克隆及其组织表达分析被引量：1
- 2018年
- 为探究诱导β干扰素包含TIR结构域的接头分子(TIR-domain-containing adaptor inducing interferon-β,TRIF)是否参与赤眼鳟(Squaliobarbus curriculus)抗病免疫反应,克隆获得了2 263 bp的赤眼鳟TRIF基因(Sc TRIF)全长c DNA.研究结果显示Sc TRIF具有TIR结构域,Sc TRIF和同属亚罗鱼亚科的草鱼TRIF聚为一支.该基因在赤眼鳟12个组织中均有表达,其中鳃中表达水平最高.感染草鱼呼肠弧病毒后,头肾和脾脏组织中Sc TRIF表达水平均呈现先下降后上调的趋势.研究表明Sc TRIF参与赤眼鳟抗GCRV病毒的免疫应答反应.
- 徐莹李耀国王荣华王荣华刘巧林赵鑫王静安
- 关键词：CDNA
- 养殖鱼类脂肪肝研究现状分析被引量：14
- 2014年
- 为了能够提供更多的水产品和提高养殖效益,目前我国的鱼类养殖多采用高密度、精饵料的养殖模式。在精养条件下,一方面,鱼类的生长速度大大提高;另一方面,鱼类在养殖、捕捞和运输过程中的抗应激能力下降,死亡率上升,鱼体和肝脏脂质蓄积严重,肌肉品质和肝脏功能下降。其中,以肝脏脂质过量蓄积为基本特征的鱼类脂肪肝引起了广泛关注。本文主要对鱼类脂肪肝的定义、诊断方法、营养因素、致病机理等进行论述,并对鱼类脂肪肝研究中存在的具体问题进行分析,以期为鱼类脂肪肝的诊断、预防以及健康养殖提供参考。
- 黄春红肖调义胡毅赵玉蓉刘巧林
- 关键词：养殖鱼类脂肪肝
- 草鱼、赤眼鳟及其杂交F_1的形态差异分析被引量：6
- 2015年
- 为了研究正交F1(草鱼♀×赤眼鳟♂)、反交F1(赤眼鳟♀×草鱼♂)的形态特点,采用传统形态学测定与现代框架测定结合的方法,测定了杂交F1及其亲本的可量可数性状,并进行了相关统计分析。结果显示:草鱼、赤眼鳟及正、反交F1在体型、体色、眼睛、鳞片以及口须等性状上有差异;杂交F1的胸鳍分支鳍条、侧线鳞数、侧线下鳞数与赤眼鳟差异显著(P<0.05);正交F1的体宽超亲本偏离,反交F1的吻长、口长、口裂长、眼间距、尾鳍长超亲本偏离;聚类结果表明杂种F1的传统可量性状偏赤眼鳟遗传,框架性状偏草鱼遗传;构建了4个群体的判别函数,其判别准确率均为100%。综上所述,杂交F1综合了双亲特点,且存在杂种优势性状,可考虑作为新品种开发。
- 何美凤肖调义刘巧林李迪李伟邓亚林
- 关键词：草鱼正交反交
- 异精雌核发育草鱼F_1与普通草鱼的SCAR标记鉴别初报被引量：4
- 2013年
- 以赤眼鳟生理失活精子诱导的雌核发育草鱼F1群体(CC)和与之母本同源的普通草鱼群体(PC)为材料,采用RAPD和SCAR分子标记相结合的技术,在100条RAPD随机引物扩增的16条有效引物中扩增筛选出7条群体差异条带,其中1条为异精雌核发育草鱼群体中特有,其余均表现为异精雌核发育草鱼群体缺失;对7条RAPD特异条带的回收中仅得到S32和S336的特异条带。经回收、克隆、测序后根据序列信息设计了4对SCAR引物,其中S336的2对SCAR引物在两群体间扩增出的条带一致,特异性消失;S32的2对SCAR引物能扩增出两群体间的特异条带;对S32-Scar1F/S32-Scar1R扩增出的SCAR标记S321643进行大样本检测结果表明:该标记在异精雌核发育草鱼群体中的出现频率为0(0/55),在普通草鱼群体中出现频率为76.7%(46/60)。
- 刘敏肖调义孙念刘巧林苏建明许宝红
- 关键词：RAPDSCAR标记
- 赤眼鳟Toll样受体3基因cDNA全长克隆及表达分析被引量：7
- 2016年
- 为探究赤眼鳟(Squaliobarbus curriculus)Toll样受体3(Toll-like receptor 3,Sc TLR3)基因是否参与抗病毒免疫反应,实验运用RACE技术,克隆得到Sc TLR3基因c DNA全长序列,并进行了生物信息学分析;通过RealTime q PCR技术,检测了Sc TLR3 m RNA在健康赤眼鳟10个组织中的分布以及感染草鱼呼肠孤病毒(GCRV)后肝脏、脾脏、体肾和头肾中的表达特征。结果表明:Sc TLR3基因c DNA序列全长4043 bp,包括5?-非编码区(UTR)216 bp,开放阅读框(ORF)2715 bp和3?-UTR 1112 bp;Sc TLR3共编码904个氨基酸残基,推导的蛋白分子量102.67 k D,理论等电点8.76;SMART结构域预测显示,Sc TLR3由N端的信号肽(SP)、富亮氨酸结构域(LRRs)、跨膜结构域(TM)和C端的Toll/白介素-1受体结构域(TIR)组成。实时荧光定量结果显示,Sc TLR3m RNA在检测的各组织中均有表达,肝脏中的相对表达量极显著高于其他组织(P<0.01);感染GCRV后,肝脏、脾脏、体肾和头肾组织中Sc TLR3 m RNA均上调表达,肝脏、脾脏和体肾组织中的相对表达量在24h达到峰值,分别为对照组的5倍、7倍和6倍。研究表明,Sc TLR3具有TLRs家族基因的典型结构特征,并能被GCRV诱导表达,推测其在赤眼鳟抗GCRV入侵免疫反应中发挥了重要作用。
- 肖调义李伟王荣华刘巧林彭慧珍苏建明
- 关键词：TOLL样受体3分子克隆
