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上海市卫生局科研基金(2009Y042)

作品数：1 被引量：2H指数：1
相关作者：姚玮艳朱黎明乔敏敏涂水平江石湖更多>>
相关机构：上海交通大学医学院附属第三人民医院上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
发文基金：上海市卫生局科研基金国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇体内外
  • 1篇人肝
  • 1篇人肝癌
  • 1篇人肝癌细胞
  • 1篇肿瘤
  • 1篇重组腺病毒
  • 1篇细胞
  • 1篇腺病
  • 1篇腺病毒
  • 1篇腺病毒载体
  • 1篇肝癌
  • 1篇肝癌细胞
  • 1篇肝肿瘤
  • 1篇癌细胞
  • 1篇XAF1
  • 1篇病毒载体

机构

  • 1篇上海交通大学...
  • 1篇上海交通大学...

作者

  • 1篇孙璟
  • 1篇吴云林
  • 1篇江石湖
  • 1篇涂水平
  • 1篇乔敏敏
  • 1篇朱黎明
  • 1篇姚玮艳

传媒

  • 1篇国际消化病杂...

年份

  • 1篇2012
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
XAF1基因重组腺病毒载体的构建及其在人肝癌细胞体内外的表达被引量：2
2012年
目的利用携带35型腺病毒纤毛的嵌合型5型腺病毒载体系统Ad5/F35构建XAF1基因重组腺病毒,体内外感染人肝癌细胞SMMC7721并使XAF1基因有效表达。方法将真核表达质粒pcDNA3.1-XAF1和穿梭质粒pDC316用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切、筛选、测序获得重组穿梭质粒pDC316-XAF1。将测序正确的pDC316-XAF1和骨架质粒pBHG-fiber5/F35用Lipofectamine2000共转染HEK293细胞,进行细胞内同源重组,得到重组腺病毒Ad5/F35-XAF1。予终点稀释法测定重组腺病毒的感染滴度。用同样的方法得到携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的报告病毒Ad5/F35-EGFP。建立人肝癌细胞株SMMC7721裸鼠移植瘤模型,将Ad5/F35-XAF1和Ad5/F35-EGFP重组腺病毒分别感染人肝癌细胞株SMMC7721和瘤内注射;荧光显微镜观察EGFP在细胞和移植瘤冰冻切片中的表达;RT-PCR和Westrenblot法检测XAF1的mRNA和蛋白在细胞和移植瘤组织的表达。结果重组腺病毒Ad5/F35-EGFP感染肝癌细胞和瘤内注射后,予荧光显微镜均可见细胞和冰冻切片中呈现绿色荧光;Ad5/F35-XAF1感染肝癌细胞和瘤内注射后,XAF1mRNA和蛋白表达均显著高于对照组和报告病毒组。结论成功构建重组腺病毒Ad5/F35-XAF1和Ad5/F35-EGFP。该腺病毒载体可携带目的基因在人肝癌细胞株SMMC7721体内和体外进行有效表达。
孙璟朱黎明姚玮艳涂水平吴云林乔敏敏江石湖
关键词：腺病毒载体XAF1肝肿瘤
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