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肾癌特异相关基因GYLZ-RCC18的表达及对肾癌细胞生长及增殖活性的影响被引量：1: 2001年; 目的　通过检测肾癌相关新基因GYLZ RCC1 8(基因号 :BE82 51 3 3 )在肾癌中的表达特点及其对肾癌细胞生长、增殖的影响 ,探讨GYLZ RCC1 8基因的功能及其在肾癌发生发展中的作用。方法　应用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)的方法检测肾癌相关基因GYLZ RCC1 8在3 1例肾癌标本中的表达特点 ;观察GYLZ RCC1 8反义寡核苷酸对肾癌细胞生长、增殖活性、形态学的影响。结果　GYLZ RCC1 8基因在肾癌组织特异表达 ,正常肾组织较肾癌组织低表达或不表达 ,两者表达量差异为 1～ 9倍。GYLZ RCC1 8基因的表达在高分级、高分期肾癌明显高于低分级、低分期肾癌 ;导入GYLZ RCC1 8反义寡核苷酸后 ,可明显抑制癌细胞的生长和增殖活性 ,并减少GRC 1细胞的核分裂。结论　GYLZ RCC1 8是肾癌组织相对较特异表达的新基因 ,它的高表达与肾癌的发生发展以及生长、增殖密切相关 ,它的成功克隆为阐明肾癌发生发展的分子生物学机制开辟了新的途径 ,为今后肾癌的特异诊断 ,基因治疗提供了新的理论依据。; 张强陈琳梁丽莉艾军魁席志军丁义李钟佟明张志文郭应禄; 关键词：肾细胞癌基因表达细胞增殖

用酵母双杂交系统筛选ATF5相互作用蛋白被引量：3: 2008年; 转录激活因子5(activating transcription factor5,ATF5)最初是从人T淋巴细胞中分离出来,并在肿瘤发展中起重要作用.为研究ATF5的作用机理,以其C末端区域为诱饵蛋白,用酵母双杂交技术从人心脏cDNA文库中筛选出了包括热休克蛋白27和核糖体蛋白L18a等与肿瘤转移、预后密切相关的蛋白.免疫共沉淀实验表明,热休克蛋白27能够特异结合在ATF5C末端区域.由此推论,ATF5通过细胞内一些与肿瘤发展、转移及预后有关的蛋白相互作用,进而影响肿瘤的进展,为ATF5的功能研究提供了重要的线索.; 王鸿杰张志文; 关键词：酵母双杂交肿瘤免疫共沉淀

在肾癌细胞系GRC-1细胞周期不同阶段Wnt-5A基因的表达情况: 1999年; Ｗｎｔ基因所编码的蛋白质与许多生长因子一样具有分泌型生长因子的结构特点，其家族成员Ｗｎｔ５Ａ是许多恶性肿瘤的自分泌生长因子，在肾细胞癌中表达显著升高．为研究在细胞周期的不同阶段生长因子Ｗｎｔ５Ａ在转录水平的表达情况，我们采用胸腺嘧啶双阻断及高压笑气处理的方法，使肾细胞癌细胞系ＧＲＣ１细胞同步化．用半定量反转录多聚酶链反应对处于细胞周期不同阶段的细胞ｃＤＮＡ进行扩增，Ｓ期与Ｇ１，Ｍ期Ｗｎｔ５ＡｍＲＮＡ表达存在差异显著（Ｐ＜０－０５）．结果提示生长因子Ｗｎｔ５Ａ在肾细胞癌的发生中具有潜在的作用，在Ｓ期作用可能尤为显著．; 庄立岩张志文郭宏骞李宏军唐东起苑学礼刘漓波丁义郭应禄; 关键词：WNT-5A 肾细胞癌细胞周期基因表达 RT-PCR

酵母双杂交系统鉴定hTCF4相互作用被引量：3: 2000年; 利用酵母双杂交试验技术，鉴定了Ｗｎｔ／Ｆｒｉｚｚｌｅｄ信号通路中的关键信号分子ＴＣＦ４自身的相互作用．通过ＴＣＦ４突变体的同源相互作用的双杂交反应（ｔｗｏｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ），确定了转录因子ＴＣＦ４在发挥作用过程中形成双聚体，推测以ＨＬＨ或ＬＺ的结构花式（ｍｏｔｉｆ）调控下游基因的表达．; 林桂亭张志文藏桐辛殿旗常智杰郭应禄; 关键词：酵母双杂交相互作用

肾癌相关基因GYLZ-RCC18对肾癌细胞系GRC-1抗死亡作用机制的研究被引量：1: 2001年; 目的　应用反义基因转染技术探讨肾癌相关新基因GYLZ RCC18与肾癌细胞死亡 (包括坏死及凋亡 )之间的关系 ,并探讨肾癌基因疗法的新途径。　方法　用脂质体包裹的新基因GYLZ RCC18第一编码区起始处的 2 0个碱基的反义和正义寡核苷酸导入肾癌细胞系GRC 1,应用流式细胞技术和伊红排斥实验连续检测GYLZ RCC18反义寡核苷酸对肾癌细胞凋亡、坏死的影响。　结果　导入GYLZ RCC18反义寡核苷酸后 ,可大量杀伤GRC 1细胞并明显促进GRC 1细胞坏死 ,于第 4天达到杀伤高峰约 6 0 % ;同时可连续 8d诱导凋亡峰 ,最高于第 2天达到约 2 2 5 % ,两种作用曲线形状和峰值不完全一致。　结论　GYLZ RCC18是肾癌相关的重要的新的癌基因 ,GYLZ RCC18的表达可通过两种不同的机制即抗癌细胞坏死机制和抗凋亡机制发挥对肾癌细胞的保护作用 ,GYLZ RCC18可能对肾癌细胞生存和耐药至关重要。通过导入反义基因的方法阻断肾癌细胞中GYLZ RCC18的表达 ,可有效地杀伤肾癌细胞。对此新基因的研究将有助于为肾癌的基础研究和临床治疗提供新的思路和途径。; 张强张志文陈琳李钟梁丽莉郭晓建那彦群郭应禄; 关键词：肾肿瘤基因表达基因转染 GRC-1

应用抑制性消减杂交技术克隆鉴定肾癌特异表达基因被引量：12: 2000年; 应用抑制性消减杂交技术（ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎｓｕｂｔｒａｃｔｉｖｅｈｙｂｒｉｄｄｉｚａｔｉｏｎ，ＳＳＨ），成功地构建了高消减效率的人肾癌细胞与正常肾组织差异表达的ｃＤＮＡ消减文库，从中随机挑取２００个克隆进行酶切分析，结果显示其中１９０个均得到５０～４００ｂｐ插入片段，１０个无插入片段。对其中１０个插入的ｃＤＮＡ片段进行测序后经ＧｅｎＢａｎｋ检索表明１０个片段均为未知新序列。; 张强张志文龚侃辛殿旗那彦群郭应禄; 关键词：肾肿瘤抑制性消减杂交特异表达基因肾癌克隆

Use of suppression subtractive hybridization strategy for cloning and identifying specifically expressed genes of renal cell carcinoma被引量：8: 2001年; Using suppression subtractive hybridization, a renal cell carcinoma (RCC) cDNA subtractive library which only contains differently expressed cDNAs between human RCC and normal kidney has been constructed. 200 clones were picked out randomly to perform enzyme digest analysis, a part of them underwent sequence analysis and Northern blot to identify RCC specially expressed genes. Results showed that 190 clones contain 50-400 bp inserts respectively. Sequence analysis was performed in 10 clones. All the 10 sequences were unknown before and derived from 6 unique novel genes among which the cDNA insert RCC18 has five copies. Northern blot analysis showed that RCC18 cDNA expressed highly in RCC, but there was no signal detected in normal kidney, and the full length of RCC18 was about 2.5 kb. The constructed cDNA subtractive library of human RCC is a highly efficient one and lays the solid foundation for large-scale screening and cloning new and specific oncogenes or tumor suppressor genes of RCC. The novel; ZHANG QiangZHANG ZhiwenGONG KanXIN DianqiNA YanqunGUO Yinlu; 关键词：KIDNEY NEOPLASMS CARCINOMA HYBRIDIZATION

肾癌相关基因克隆——肾癌cDNA消减文库的构建被引量：9: 2000年; 应用抑制性消减杂交技术 ,构建人肾癌与正常肾差异表达的cDNA消减文库 .分别从肾癌及正常肾细胞系中提取 poly (A) +RNA ,依次合成单链及双链cDNA ,经酶切成平均大小为 4 0 0～ 60 0bp的片段 ,将肾癌cDNA分为两组 ,分别与两种不同的接头衔接 ,再与正常肾cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR后 ,将产物与T/A载体连接构建成功cDNA消减文库 ,并转染大肠杆菌进行文库扩增 .构建成功具有高消减效率的人肾癌cDNA消减文库 ,非特异性cDNA片段被有效地消减 ,特异表达的cDNA得到富集 .文库扩增后得到 650 0个克隆 ,随机挑取 3 50个制备质粒 ,酶切分析均得到 4 0 0～ 60 0bp插入片段 .所构建的人肾癌cDNA消减文库为进一步大批量筛选。; 张强毛泽彬张志文辛殿旗郭应禄; 关键词：抑制性消减杂交肾癌 CDNA消减文库基因克隆

肾癌相关新基因GYLZ-RCC18的表达及意义被引量：3: 2001年; 目的　探讨GYLZ RCC18功能及在肾癌发生发展中的作用。　方法　应用SMARTRACE技术克隆GYLZ RCC18全长 ,应用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)特异扩增第 1阅读框中5 0 4bp序列 ,分析在肾癌中的表达特点及与肾癌分级、分期的关系。　结果　GYLZ RCC18基因全长约为 3.5kb ,在肾癌组织特异表达 ,正常肾组织低表达或不表达 ,两者表达量差异约 1～ 9倍。GYLZ RCC18表达在高分级分期肾癌中的表达明显高于低分级分期者。　结论　GYLZ RCC18是肾癌组织相对特异表达的新基因 ,高表达与肾癌的早期发生及晚期进展密切相关。; 张强张志文梁丽莉郭晓健那彦群郭应禄; 关键词：肾肿瘤肾癌基因表达

T细胞因子4在肾癌中的表达及其意义被引量：11: 2000年; 目的　研究Wnt/Frizzled信号通路在核内的转导及其主要信号分子T细胞因子 4(TCF4)在肾癌发生发展中的作用。　方法　采用RT PCR及NorthernBlot的方法检测了TCF4基因在肾癌组织及正常肾组织 ,肾癌细胞系GRC I和正常肾小管上皮细胞系HK 2中的表达。　结果　TCF4在肾癌组织及细胞系中强表达 ,且存在剪接性突变 ,形成了 30 0bp左右的突变基因。　结论　TCF4作为Wnt/Frizzled信号通路的核内信号分子 ,在肾癌发生和发展中具有重要作用 ,其致病机理与TCF4的剪接性突变有一定关系。; 林桂亭藏桐张志文辛殿旗郭应禄; 关键词：基因表达肾肿瘤 TCF4 基因调控

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