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浙江省“钱江人才计划”(J20100471)
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
相关作者:
石爱琴
戴燕青
曾苏
孙冬黎
涂美娟
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相关机构:
浙江大学
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发文基金:
浙江省“钱江人才计划”
国家自然科学基金
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相关领域:
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孙冬黎
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戴燕青
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石爱琴
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中国药学杂志
年份
1篇
2013
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稳定表达人寡肽转运体1的细胞模型构建及应用
被引量:2
2013年
目的构建稳定表达人寡肽转运体1(hPepT1)的马丁-达比犬肾细胞模型(MDCK-hPepT1),并将其应用于中药单体中人寡肽转运体1抑制剂的筛选。方法构建重组质粒pcDNA3.1(+)-hPepT1,将其转染马丁-达比犬肾系细胞,经G418筛选后以有限稀释法挑选单克隆细胞。以人寡肽转运体1荧光底物β-Ala-Lys(AMCA)和经典底物Glysar对单克隆细胞转运活性进行验证;通过反转录聚合酶链式反应验证人寡肽转运体1在转录水平的表达。以中药单体对Glysar摄取的影响实现人寡肽转运体1抑制剂的筛选。结果获得的两株单克隆细胞(D19、A11)对β-Ala-Lys(AMCA)摄取均显著高于转染空载体的马丁-达比犬肾系细胞,对Glysar的摄取分别为转染空载体细胞的24、11倍;D19、A11中hPepT1的mRNA水平亦显著高于转染空载体的细胞;已知的人寡肽转运体1抑制剂(底物)显著减少单克隆细胞D19和A11对Glysar的摄取;部分中药单体对Glysar摄取产生不同程度的抑制。结论本实验成功构建了稳定高表达人寡肽转运体1的马丁-达比犬肾系细胞模型,并应用该模型筛选出对人寡肽转运体1具有潜在抑制作用的中药单体。
戴燕青
涂美娟
孙冬黎
石爱琴
曾苏
蒋惠娣
关键词:
细胞模型
中药
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