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四川省科技支撑计划(2009SZ0217)

作品数:3 被引量:7H指数:2
相关作者:谢亦武王宗奎李长清肖小璞曹海军更多>>
相关机构:中国医学科学院北京协和医学院更多>>
发文基金:四川省科技支撑计划更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 3篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 3篇蛋白
  • 2篇蛋白酶
  • 2篇胰蛋白酶
  • 2篇抗胰蛋白酶
  • 2篇分离纯化
  • 2篇Α1-抗胰蛋...
  • 2篇纯化
  • 1篇蛋白C
  • 1篇蛋白酶抑制
  • 1篇蛋白酶抑制剂
  • 1篇抑制剂
  • 1篇制剂
  • 1篇丝氨酸
  • 1篇丝氨酸蛋白酶
  • 1篇丝氨酸蛋白酶...
  • 1篇缺乏症
  • 1篇酶缺乏
  • 1篇酶抑制剂
  • 1篇免疫
  • 1篇Α1-抗胰蛋...

机构

  • 3篇中国医学科学...

作者

  • 3篇李长清
  • 3篇王宗奎
  • 3篇谢亦武
  • 2篇杜晞
  • 2篇肖小璞
  • 2篇张学俊
  • 2篇曹海军
  • 1篇林方昭
  • 1篇叶生亮

传媒

  • 3篇中国输血杂志

年份

  • 1篇2012
  • 1篇2011
  • 1篇2010
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
从Cohn法组份Ⅳ中分离纯化人血浆蛋白C被引量:2
2010年
目的探索建立1种串联离子交换层析和固相化金属螯合亲和层析从Cohn法组份Ⅳ分离纯化蛋白C的方法 ,降低纯化蛋白C的成本,并实现血浆的综合利用。方法 4℃条件下,将Cohn法组份Ⅳ用PBS缓冲液抽提5h,离心(6500g)40min,上清液依次用0.45μm和0.22μm的滤膜过滤后,超滤透析;再通过串联离子交换层析和固相化金属螯合亲和层析,对蛋白C进行纯化。通过SDS-PAGE鉴定蛋白C的纯度;用考马斯亮蓝法通过紫外分光光度计测定总蛋白含量;通过WHO指定的发色底物法和凝固法(一期法)测定蛋白C活性。结果纯化的蛋白C在SDS-PAGE图谱上呈现1条62kD左右的蛋白带;经过离子交换层析,蛋白C的活性回收率为(48.19±9.22)%,纯化倍数为(3.75±0.56)倍;固相化金属螯合亲和层析后,蛋白C活性回收率为(59.61±5.59)%,纯化倍数为(36.79±3.72)倍;蛋白C总活性回收率为(28.77±9.45)%,纯化倍数为(136.64±6.82)倍,比活性为(11.70±0.89)IU/mg。结论串联离子交换层析和固相化金属螯合亲和层析可以从Cohn法组份Ⅳ中获得比活性较高的蛋白C浓缩物。
王宗奎林方昭肖小璞谢亦武李长清
关键词:蛋白C纯化
人α1-抗胰蛋白酶缺乏症的临床治疗及α1-PI规模化制备的进展被引量:4
2011年
α1-抗胰蛋白酶(alpha-1-proteinase inhibitor,α1-PI或α1-antitrypsin,α1-AT)是由肝细胞合成的1种丝氨酸蛋白酶抑制剂(serine protease inhibitor,serpin),它最重要的生理功能是在肺内抑制弹性蛋白酶的活性[1]。1963年,Laurell和Eriksson[2]报道了遗传性α1-PI缺乏及其与患者早年(30~40岁)发生肺气肿的关系。
张学俊曹海军王宗奎杜晞肖小璞谢亦武李长清
关键词:Α1-抗胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶抑制剂
亲和凝胶分离纯化人α1-抗胰蛋白酶的研究被引量:1
2012年
目的探索通过免疫亲和层析从Cohn法组份Ⅳ分离纯化人α1-抗胰蛋白酶浓缩物的方法。方法 24℃下,将Cohn氏法组份Ⅳ用Tris缓冲液抽提0.5 h后,离心4 750 g×15 min,上清液加入亲水型气相二氧化硅脱脂后,离心6 000 g×15 min,再用1.2μm的滤膜过滤;通过GE公司新型的Alpha-1 Antitrypsin Select免疫亲和凝胶层析柱,对α1-抗胰蛋白酶进行纯化。用考马斯亮蓝法通过紫外分光光度计测定总蛋白含量;用SDS-PAGE鉴定α1-抗胰蛋白酶的纯度,并用Western Blot和串联质谱分析鉴定纯化的蛋白;通过发色底物法测定α1-抗胰蛋白酶活性。结果纯化的α1-抗胰蛋白酶在非还原性SDS-PAGE图谱上呈现1条54 kD左右的蛋白带和1条约140 kD的多聚体蛋白带,经过还原性SDS-PAGE多聚体条带解聚,Western Blot也可以反应相关变化;在经过前处理和亲和层析后,α1-抗胰蛋白酶活性回收率为(60.35±1.39)%,α1-抗胰蛋白酶总活性回收率为(41.88±6.98)%,纯化倍数为(71.68±1.32)倍,比活性大约(1.00~1.05)PU/mg。结论 GE公司Alpha-1 Antitrypsin Select免疫亲和层析亲和层析可以从Cohn氏法组份Ⅳ中特异性捕获α1-抗胰蛋白酶浓缩物。
张学俊叶生亮曹海军王宗奎杜晞谢亦武李长清
关键词:Α1-抗胰蛋白酶纯化
共1页<1>
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