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博士科研启动基金(2012C01)
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宣爱国
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组蛋白去乙酰化酶抑制剂促大鼠胚胎干细胞向神经元分化
2014年
目的探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂丁酸钠(NaB)对大鼠胚胎干细胞(ESC)向神经元分化的影响。方法利用含bFGF、EGF的DMEM/F12培养基培养原代ESC;应用DAPI染色,荧光显微镜观察不同药物浓度NaB(0.2、1、2μmol/L)作用48h后对细胞凋亡的影响;免疫荧光检测NaB(1μmol/L)作用72h后和对照组(PBS)ESC双肾上皮质激素(DCX)和DAPI,计算DCX/DAPI的比值;免疫印迹检测不同浓度NaB(0.2、1、2μmol/L)作用48h后和对照组(PBS)ESC组蛋白H3、H4乙酰化水平。结果在1、2/μmol/LNaB组ESC出现明显凋亡,细胞形状不规则,核固缩,核内可见致密的颗粒荧光,视野下细胞碎片较多,且凋亡细胞百分比明显高于0.2μmol/LNaB组和对照组[(7.85±0.73)%、(18.42±2.04)%比(3.48±0.35)%、(2.16±0.32)%,均P〈0.05]。1μmol/LNaB组ESCDCX/DAPI比值高于对照组(38.51±4.33比14.81±1.77,P〈0.05)。随NaB药物浓度的增加,ESC蛋白H3、H4乙酰化程度较对照组增强,0.2±mol/L组处理后乙酰化组蛋白H3和H4表达变化不明显,1、2μmol/L时组蛋白H3和H4乙酰化程度明显增高(均P〈0.05)。结论HDAC抑制剂NaB可明显促使ESC向神经元分化。
张西
宣爱国
徐丽萍
龙大宏
洪乐鹏
关键词:
组蛋白去乙酰化酶抑制剂
丁酸钠
胚胎干细胞
神经元
全反式维甲酸促神经干细胞分化中DNA甲基转移酶1和乙酰化组蛋白H3的表达
2013年
目的:探讨全反式维甲酸体外促神经干细胞分化为神经元过程中DNA甲基转移酶1和乙酰化组蛋白H3的表达变化。方法:0.5、1.0和4μmol/L全反式维甲酸诱导体外培养的鼠胚神经干细胞,免疫荧光检测NeuN和DAPI,计算各组NeuN/DAPI的比值,免疫印迹检测DNA甲基转移酶1以及乙酰化组蛋白H3表达水平。结果:免疫荧光结果显示给药组NeuN/DAPI比值显著高于对照组。药物浓度在1和4μmol/L时,DNA甲基转移酶1表达水平与对照组相比均显著降低,且有剂量依赖性;而在4μmol/L时,组蛋白H3乙酰化水平较对照组有显著增强。结论:全反式维甲酸促进神经干细胞向神经元的分化可能与DNA甲基转移酶1的表达抑制和组蛋白乙酰化水平增加有关。
宣爱国
龙大宏
王智明
陈艳
张文娟
关键词:
全反式维甲酸
神经干细胞
DNA甲基转移酶1
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