国家教育部博士点基金(20094101110004)
- 作品数：3 被引量：4H指数：2
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- 旋毛虫肌幼虫在不同培养基中发育情况的观察被引量：1
- 2010年
- 目的观察旋毛虫肌幼虫在不同培养基中的发育情况。方法将旋毛虫肌幼虫接种在不同培养基中于37℃5%CO2条件下培养18 d,观察幼虫开始蜕皮的时间和蜕皮率,并测量幼虫长度。结果肌幼虫在RPMI-1640、含5%胎牛血清（FBS）的RPMI-1640培养液、PBS和生理盐水中开始蜕皮的时间分别为15、23、19和37 h;肌幼虫在RP-MI-1640与5%FBS＋RPMI-1640中分别蜕皮1~4层和1~2层,在PBS与生理盐水中仅蜕皮1层。培养5 d后,RP-MI-1640中培养幼虫的蜕皮率（77.94%）显著高于在其他3种培养液培养的幼虫蜕皮率（39.83%、44.64%和8.84%）（Z1640＋5%FBS=-2.268,ZPBS=-2.641,Zsaline=-6.826,P〈0.05）;培养18 d后,在RPMI-1640中蜕2~4层皮的幼虫蜕皮率（25.6%、1.32%及0.26%）显著高于在5%FBS＋RPMI-1640中培养的幼虫蜕皮率（0.45%、0和0）（Z2=-16.111,Z3=-7.991,Z4=-3.885,P〈0.05）;在2种培养液中培养1~18 d的幼虫长度差异无统计学意义（t=0.138,P〉0.05）,幼虫长度均随培养时间的延长而减小（F1640=54.639,P〈0.05;F1640＋5%FBS=26.928,P〈0.05）。结论绝大多数旋毛虫肌幼虫在RPMI-1640与5%FBS＋RPMI-1640培养液中不能蜕下完整表皮,不能发育到成虫阶段。
- 王莉崔晶王书伟王中全
- 关键词：旋毛虫肌幼虫蜕皮
- 旋毛虫幼虫体外对肠上皮细胞侵入及发育的观察被引量：3
- 2010年
- 目的观察旋毛虫幼虫在体外对肠上皮细胞的侵入及发育情况。方法将旋毛虫肌幼虫在大鼠肠内容物或小鼠胆汁中孵育2 h后,分别接种至半固体培养基（DMEM/F12完全培养基＋1.75%琼脂糖）、半固体培养基＋T84细胞、DMEM/F12完全培养基＋T84细胞及半固体培养基（高糖DMEM完全培养基＋1.75%琼脂糖）＋Caco-2细胞中,37℃5%CO2培养24 h,观察并计数细胞层中的1期及2~4期幼虫。结果经肠内容物与胆汁孵育后的幼虫在半固体培养基＋Caco-2细胞中发育为2~4期幼虫的百分比分别为50.00%和34.78%（χ2=0.836,P〉0.05）,两者均高于经RPMI-1640孵育的幼虫百分比8.70%（χ21=5.978,χ22=4.600,P〈0.05）。经肠内容物孵育后的幼虫在半固体培养基＋T84细胞中2~4期幼虫的百分比（40.00%）显著高于半固体培养基中的幼虫百分比4.76%（χ2=10.947,P〈0.05）;在T84和Caco-2细胞中发育为2~4期幼虫的百分比分别为40.00%和50.00%,差异无统计学意义（χ2=0.546,P〉0.05）;在完全培养基＋T84细胞中未观察到2~4期幼虫;在半固体培养基中,幼虫可侵入T84/Caco-2细胞并在细胞单层中移行,留下明显的移行轨迹,培养37 h与42 h后分别发现1条雌虫与3条雄虫。结论旋毛虫幼虫经肠内容物或胆汁孵育后再接种至半固体培养基,可在体外侵入肠上皮细胞并能生长发育。
- 王莉崔晶王书伟王中全
- 关键词：旋毛虫肠上皮细胞发育半固体培养基
- 免疫血清对旋毛虫感染性幼虫侵入肠上皮细胞及其发育的影响被引量：2
- 2010年
- 目的观察旋毛虫感染性幼虫排泄分泌(ES)抗原与旋毛虫感染性幼虫表面抗原免疫鼠血清对幼虫侵入HCT-8肠上皮细胞及其发育的影响。方法将旋毛虫感染性幼虫接种至半固体培养基(RPMI1640培养基+1.75%琼脂糖)+HCT-8细胞中,37℃5%CO2培养12、24、36、72和96h后镜下观察幼虫发育情况;将幼虫接种至含免疫血清的半固体培养基+HCT-8细胞中,培养15min后镜下观察幼虫形态及其对肠上皮细胞的侵入情况,36h后应用间接荧光抗体试验(IFAT)观察幼虫蜕皮,并计数Ⅰ期和Ⅱ～Ⅳ期幼虫。结果幼虫在半固体培养基培养12h可侵入HCT-8细胞单层,36～72h幼虫可蜕皮1～2次,培养96h可见早期成虫。在含ES抗原免疫血清与感染鼠血清条件下培养15min,幼虫头端可见免疫复合物形成的帽样结构,但在含表面抗原免疫血清、正常鼠血清或不含免疫血清条件下培养的幼虫头端则无帽样结构,头端带有帽样结构的幼虫不能侵入HCT-8细胞单层。在含ES抗原与表面抗原免疫血清条件下发育至Ⅱ～Ⅳ期幼虫的百分比(2.25%、2.2%)均明显低于含正常鼠血清条件下培养的幼虫(24.7%)(P<0.05)。结论旋毛虫ES抗原免疫血清可阻止幼虫对肠上皮细胞的侵入,ES抗原及表面抗原免疫血清均可阻止部分幼虫的发育(蜕皮)。
- 王书伟崔晶王中全王莉
- 关键词：旋毛虫排泄分泌抗原表面抗原免疫血清肠上皮细胞
