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浙江省科技计划项目(2006C24003)
作品数:
2
被引量:4
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问号钩端螺旋体病人血清中LipL21抗体检测
被引量:1
2007年
寻找钩体属特异性保护抗原,对于研制通用型钩体疫苗及实验室诊断试剂盒均有重要价值。Cullen等首先报告了致病性问号钩体均具有属特异性lipL21脂蛋白基因。我们也曾证实我国15群15型问号钩体参考标准株均含有序列保守的lipL21基因。已知钩体病免疫保护作用主要依赖血清抗体为主的体液免疫。我们采用显微镜凝集试验(MAT)检测了156份钩体病人血清的凝集效价,并建立rLipL21-IgM/IgG-ELISAs对血清标本中LipL21的IgG和IgM型抗体进行了检测。
罗冬娇
郭宗琪
孙百莉
蒋晓崎
周金成
严杰
关键词:
抗体检测
病人血清
问号钩端螺旋体
免疫保护作用
基于响应面分析方法的钩端螺旋体三联属特异性蛋白抗原原核表达条件的优化
被引量:3
2008年
脂蛋白LipL32和LipL21及穿膜蛋白OMPL1是问号钩端螺旋体(简称钩体)属特异性表面抗原,可作为通用型钩体基因工程疫苗抗原。【目的】在我们的研究中,为了获得使得重组人工融合基因lipL32/1-lipL21-ompL1/2获得较高的表达水平,我们优化了重组宿主大肠杆菌的表达条件。【方法】我们采用了基于中心复合设计(CCD)的响应面分析方法(RSM)。影响重组大肠杆菌生长的主要因素包pH、诱导剂IPTG浓度、诱导前培养实践、诱导时间以及诱导温度。响应面分析方法可以从这些因素中找到适合目的蛋白表达的最优表达条件。【结果】我们的结果显示在pH7.9、0.20mmol/LIPTG、诱导前培养时间2.5h、诱导时间5.83h、诱导后温度31℃条件下,可获得目的重组蛋白37.78mg/L的最大表达量。【结论】实验结果表明采用基于中心复合设计的响应面分析方法能够较大地提高目的产物的产量。利用统计方法不但可以减少试验的次数,而且还能够从影响蛋白的因素中找出最重要的影响因素,因此该方法不仅对重组蛋白表达条件的优化有用,而且是一种很好的筛选方法。
王江
罗冬娇
孙爱华
严杰
关键词:
问号钩端螺旋体
原核表达
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