国家自然科学基金(39870919)
- 作品数：4 被引量：64H指数：4
- 相关作者：许铁峰丁如贤张汉明张威李博华更多>>
- 相关机构：第二军医大学哈尔滨医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 四倍体菘蓝毛状根的抗内毒素作用被引量：12
- 2000年
- 目的 :从菘蓝的同源四倍体植物诱导出毛状根 ,并探讨用毛状根代替自然根作为药用的可能性。 方法 :利用发根农杆菌 A4菌株感染四倍体菘蓝 ,采用细菌内毒素检查法考察诱导所得毛状根的抗内毒素作用。结果 :A4菌株能诱导四倍体菘蓝产生毛状根 ,毛状根具有较强的抗内毒素作用。 结论 :发根农杆菌诱导四倍体植物产生的毛状根有可能成为传统中药材的一种代用品。
- 李博华张汉明王寅丁如贤许铁峰
- 关键词：菘蓝四倍体毛状根抗内毒素作用
- 贯叶连翘的组织培养和快速繁殖被引量：20
- 2000年
- 目的 :探索贯叶连翘外植体组织培养的适合培养基配方。方法 :将贯叶连翘种子发芽产生的根、带节茎段、叶作为外植体 ,培养在含不同种类及浓度激素的 Murashige and Skoog ( MS)基本培养基上 ,诱导愈伤组织、芽和根的形成 ,并进行试管苗的移栽。结果 :不同激素配比和不同种类外植体对愈伤组织和芽的形成有较大区别。 2 ,4-二氯苯氧乙酸 ( 2 ,4- D)有利于促进贯叶连翘愈伤组织的形成 ;在细胞分裂素中 ,6 -苄基氨基嘌呤 ( 6 - BA)促进生芽的作用很明显 ,而激动素 ( KT)、玉米素 ( ZT)则不明显 ;α-萘乙酸 ( NAA) 1mg/ L 与 6 - BA0 .2 m g/ L 的组合有利于贯叶连翘的生根。 结论 :含有 2 ,4- D的 MS培养基有利于愈伤的诱导 ,外植体根最适合丛生芽的快速诱导。
- 丁如贤许铁峰张汉明
- 关键词：贯叶连翘愈伤培养基
- 应用发根农杆菌RiT-DNA建立菘蓝的毛状根优质株系和植株再生系统被引量：24
- 2000年
- 目的 :建立菘蓝 ( Isatis indigotica Fort)的毛状根离体培养系统 ,并诱导毛状根再生植株。 方法 :分别用发根农杆菌A4,R16 0 1和 ATCC15 834三种菌株感染菘蓝的子叶外植体 ,获得毛状根 ,并筛选了优质株系 ;测定了毛状根的生长曲线 ;在含不同激素的培养基上诱导毛状根再生植株 ;利用高压纸电泳法对毛状根和再生植株进行 T- DNA转化的检测。 结果 :首次利用发根农杆菌 A4,R16 0 1和 ATCC15 834三种菌株成功地从菘蓝中诱导出毛状根 ;菘蓝毛状根在含 BA的 MS培养基中成功地诱导出再生植株 ;经高压纸电泳检测 ,菘蓝毛状根及其再生植株中均含有甘露碱 ,表明 Ri质粒的 T- DNA已整合进毛状根和再生植株中。 结论 :菘蓝毛状根离体培养和植株再生系统的建立 ,为进一步进行药用活性成分的工业化生产和引入外源基因改良性状奠定了基础。
- 许铁峰张汉明张威丁如贤李博华
- 关键词：发根农杆菌毛状根菘蓝再生植株
- 转双价抗虫基因Bt-CpTI提高四倍体菘蓝对小菜蛾抗性被引量：8
- 2009年
- 目的将外源苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白基因CryIA(c)和豇豆胰蛋白酶抑制剂基因CpTI共同转入四倍体菘蓝以获得鳞翅目昆虫小菜蛾抗性。方法构建了以CaMV 35S为启动子,新霉素磷酸转移酶(Npt-Ⅱ)为选择标记,带有CryIA(c)基因和CpTI基因的植物表达载体pGBI121S4ABC并转入根癌农杆菌LBA4404。采用叶盘法遗传转化四倍体菘蓝。转基因再生植株经PCR和Southern杂交检测,并进行抗小菜蛾实验。结果T0代转化四倍体菘蓝的双基因阳性转化率达到16.67%。Southern杂交检测结果表明外源CryIA(c)基因和CpTI基因均已经随机整合到转基因菘蓝的基因组中。与野生对照相比,转基因四倍体菘蓝对小菜蛾显示出明显抗性。结论转双价抗虫基因Bt-CpTI是提高四倍体菘蓝对小菜蛾抗性的有效手段。
- 丁如贤肖莹王凯陈万生张汉明张磊
- 关键词：根癌农杆菌抗虫SOUTHERN杂交
