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湖北省自然科学基金(2003ABA144)

作品数:1 被引量:2H指数:1
相关作者:曹勇熊盛道熊维宁宋青凤方慧娟更多>>
相关机构:华中科技大学更多>>
发文基金:湖北省自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇单纯疱疹
  • 1篇单纯疱疹病毒
  • 1篇单纯疱疹病毒...
  • 1篇胸苷
  • 1篇胸苷激酶
  • 1篇疱疹
  • 1篇细胞
  • 1篇基因
  • 1篇基因治疗
  • 1篇激酶
  • 1篇肺癌
  • 1篇A549细胞
  • 1篇HSV-TK
  • 1篇IL-2

机构

  • 1篇华中科技大学

作者

  • 1篇徐永健
  • 1篇方慧娟
  • 1篇宋青凤
  • 1篇熊维宁
  • 1篇熊盛道
  • 1篇曹勇

传媒

  • 1篇肿瘤防治研究

年份

  • 1篇2009
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
HSV-TK与IL-2共表达真核载体的构建及其在A549细胞中的表达被引量:2
2009年
目的构建含有自杀基因单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)和人类细胞因子白细胞介素-2(IL-2)的联合表达质粒载体并观察其在人类肺腺癌细胞系A549细胞中的表达。方法设计、合成多克隆位点(MCS)插入到质粒TPNAV中,然后分别从其他不同的质粒剪切片段HSV-TK、内部核糖体进入位点(IRES)、IL-2并依次接入到MCS中,最终得到目的质粒TPNAV-TK-IRES-IL2(pMTⅡ)。目的质粒经酶切、DNA测序鉴定正确后,转染到A549细胞中。用RT-PCR方法、ELISA法检测转染后细胞目的基因的转录和表达;进一步倒置显微镜观察、MTT法检测更昔洛(GCV)对转然后细胞的杀伤作用。结果经酶切、DNA测序、RT-PCR法和ELISA法鉴定,双基因真核表达载体pMTⅡ序列正确并能有效表达。进一步倒置显微镜观察和MTT法检测表明HSV-TK/GCV自杀基因系统对A549细胞有明显的杀伤作用。结论成功构建了pMTⅡ真核表达载体,并观察了其对A549细胞的杀伤效应,为进一步研究HSV-TK/GCV联合IL-2基因治疗肺癌提供实验基础。
宋青凤方慧娟熊维宁徐永健熊盛道曹勇
关键词:肺癌基因治疗IL-2
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