公共文化服务平台

共 5 条记录，以下是 1-5

全选清除导出

排序方式：

小菜蛾糖基转移酶基因的克隆、序列分析及在不同发育阶段的表达: 2010年; 根据秀丽小杆线虫Caenorhabditis elegans及其他昆虫中糖基转移酶基因的同源序列,采用逆转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)和cDNA末端快速扩增PCR(rapid amplification of cDNA ends PCR,RACE-PCR)技术从小菜蛾Plutella xylostella4龄幼虫中肠组织中获得了3个基因的全长序列,其开放阅读框长度分别为1383bp,1230bp和1041bp,分别编码460,409和346个氨基酸,将其分别命名为Pxbre-3,Pxbre-4和Pxbre-5(GenBank登录号分别是GU321343,GU321344和GU321345)。同源序列比对发现,这些基因和线虫中相应的糖基转移酶基因具有较高相似度,且具有对糖基转移酶活性起关键作用的氨基酸保守模块,也包含类似的跨膜区。由此推测,这3个基因为小菜蛾糖基转移酶基因,参与小菜蛾鞘糖脂的合成。实时定量PCR检测结果表明,这3个基因以及Pxbre-2在小菜蛾4龄幼虫、蛹和成虫以及4龄幼虫中肠组织均有表达,在蛹和成虫阶段表达量较高。本实验结果为今后研究鞘糖脂是否参与小菜蛾对Bt毒素的抗性奠定了基础。; 包宏伟吴益东杨亦桦; 关键词：小菜蛾鞘糖脂糖基转移酶 MRNA表达

小菜蛾烟碱型乙酰胆碱受体α亚基cDNA的克隆、序列分析与不同发育阶段表达分析被引量：7: 2009年; 烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）介导昆虫中枢神经系统中胆碱能突触兴奋性神经递质的快速传递，也是新烟碱类杀虫剂和多杀菌素的作用靶标。本研究利用RT-PCR和RACE技术，克隆了小菜蛾Plutella xylostella nAChRα亚基的一个新基因（Pxx8）的全长cDNA（GenBank登录号为EU914853）。Pxα8的cDNA序列全长1744bp，开放阅读框为1602bp，编码534个氨基酸，具有nAChRd亚基的典型特征，与其他昆虫nAChRα8亚基具有77％～96％的相似性，与果蝇nAChR132亚基具有76％的相似性。既胡的开放阅读框存在单核苷酸多态性位点，导致多个位点氨基酸的替换。雌性4龄幼虫的多态性位点多于雄性4龄幼虫，而且雌、雄4龄幼虫的多态性位点均不相同。半定量RT—PCR研究结果表明，Pxcα8mRNA在成虫期表达量高于蛹期和4龄幼虫期。本研究结果为进一步研究小菜蛾nAChR亚基的多样性和对多杀菌素的靶标抗性机制提供重要基础。; 赵宇杨亦桦武淑文吴益东; 关键词：小菜蛾烟碱型乙酰胆碱受体 Α亚基 CDNA克隆半定量RT-PCR

Cry1Ac敏感和抗性小菜蛾bre-3和bre-5基因mRNA的表达差异研究: 2011年; 在室内选用Cry1Ac对小菜蛾Plutella xylostella 3龄幼虫进行抗性选育,获得相对抗性为356倍的抗性种群DBM1Ac-R品系。应用实时定量基因扩增荧光检测(real time quantitative PCR,real-time qPCR)技术检测敏感小菜蛾DBM1Ac-S和抗性小菜蛾DBM1Ac-R品系鞘糖脂(Glycosphingolipids,GSLs)合成酶基因bre-3和bre-5 mRNA在2龄、3龄、4龄和老熟幼虫、蛹及4龄中肠的表达情况。结果显示:bre-3和bre-5在两个品系的5个时期和4龄中肠均有表达,其中DBM1Ac-S品系的bre-3 mRNA在3龄、4龄和老熟幼虫的相对表达量显著高于DBM1Ac-R品系(P<0.05),分别为DBM1Ac-R品系的2.36、5.54和2.68倍;DBM1Ac-S品系的bre-5 mRNA在2龄至蛹期的相对表达量分别为DBM1Ac-R品系的1.19、3.13、1.78、1.75和1.65倍,其中由3龄到蛹期差异显著(P<0.05)。DBM1Ac-R品系3龄至老熟幼虫的bre-3和bre-5 mRNA相对表达量降低可能与小菜蛾长期的Cry1Ac汰选有一定的关系。比较同一种群、同一龄期(包括4龄中肠)的bre-3和bre-5 mRNA相对表达量差异时,发现bre-5相对表达量均高于bre-3。研究结果为苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫晶体蛋白受体之一GSLs的进一步研究提供了一定的基础。; 李拓张友军王少丽吴青君徐宝云杨中侠王沫; 关键词：鞘糖脂苏云金芽孢杆菌受体

小菜蛾碱性磷酸酶基因cDNA片段的克隆及其序列分析被引量：1: 2010年; 利用DNAman设计简并引物,通过反转录一多聚酶链式反应(RT-PCR)克隆小菜蛾Plutella xylostella(L.)抗性、敏感种群中可能与苏云金芽孢杆菌(Bt)抗性相关的碱性磷酸酶基因。琼脂糖电泳结果显示扩增条带与预期片段长度一致,阳性克隆经测序获得了403bp的基因片断。经blast比较得出所克隆基因属于碱性磷酸酶基因。与敏感种群相比,抗性种群中该基因片段有18个碱基发生变化,有1个氨基酸发生替换(缬氨酸转变为苏氨酸)。研究结果对于进一步研究小菜蛾全基因结构、功能有重要的意义。; 刘洁文礼章王少丽吴青君张友军; 关键词：小菜蛾克隆

利用RNAi技术沉默小菜蛾类钙粘蛋白基因被引量：11: 2009年; RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种调控基因表达的方法,其通过体外合成一段与内源靶基因同源的双链RNA(dsRNA)或siRNA,导入生物体内,使内源靶基因中同源mRNA降解,从而达到阻抑基因表达的目的。类钙粘蛋白(cadherin-likeprotein)是位于昆虫中肠刷状缘膜囊(brush border membrane vesicles,BBMV)上与钙粘蛋白(cadherin)结构相似的物质,是多种昆虫体内Bt杀虫蛋白的受体。本研究利用基因特异引物通过RT-PCR扩增了小菜蛾类钙粘蛋白基因的2个片段(CAD1和CAD2),合成相对应的双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA);并将dsRNA通过显微注射导入小菜蛾3龄幼虫体内,测定了不同靶位点、不同剂量、不同检测时间对目的基因mRNA表达量的影响。结果表明:将70nLCAD1对应的dsRNA注射到幼虫体内48h后,基因表达量显著下降,72h后恢复。免疫印迹检测结果表明,类钙粘蛋白在注射dsRNA48h后幼虫BBMV中的含量明显下降。本实验成功实现了小菜蛾类钙粘蛋白基因的沉默,该体系的成功建立为利用RNAi技术分析小菜蛾及其他鳞翅目昆虫基因的功能提供了参考。; 杨中侠吴青君王少丽文礼章徐宝云张杰张友军; 关键词：小菜蛾苏云金芽胞杆菌 RNA干扰基因沉默

全选清除导出

共1页<1>

国家高技术研究发展计划(2007AA10Z421)