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重庆市教育委员会科学技术研究项目(040310)
重庆市教育委员会科学技术研究项目(040310)
作品数:
1
被引量:6
H指数:1
相关作者:
倪江涛
石海鹏
易永芬
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相关机构:
重庆医科大学
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易永芬
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2010
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RNA干扰maspin基因对胃癌细胞株MKN-28凋亡的影响
被引量:6
2010年
目的:探讨转染maspin特异性短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)重组质粒对胃癌细胞株MKN-28凋亡的影响。方法:设计并合成针对maspin基因的shRNA,并将其与真核表达载体pGenesil-1.1连接,构建重组质粒pGenesil-maspin。应用RT-PCR和Western印迹法检测转染重组质粒后MKN-28细胞中maspin、bcl-2和bax mRNA及蛋白的表达变化,应用FCM法检测转染重组质粒对MKN-28细胞的细胞周期和细胞凋亡的影响。结果:成功构建maspin特异性shRNA重组质粒pGenesil-maspin1、pGenesil-maspin2及pGenesil-HK(阴性对照);pGenesil-maspin成功转染后可明显下调胃癌细胞MKN-28中maspin和bax mRNA及蛋白的表达水平(P<0.01),并上调bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平(P<0.01);重组质粒转染后,MKN-28细胞的细胞周期呈现G0/G1期细胞减少(P<0.01),细胞凋亡率下降(P<0.01)。结论:外源性maspin shRNA转染MKN-28细胞后能下调maspin的表达,抑制胃癌细胞的凋亡,且使细胞周期分布发生改变;其分子机制可能与上调bcl-2和下调bax的表达有关。
倪江涛
石海鹏
易永芬
关键词:
RNA干扰
细胞周期
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