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湖北省自然科学基金(2003ABA193)

作品数:16 被引量:19H指数:3
相关作者:陈珺徐少勇王家宁黄永章邓长生更多>>
相关机构:郧阳医学院附属人民医院武汉大学郧阳医学院更多>>
发文基金:湖北省自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 16篇中文期刊文章

领域

  • 15篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 12篇肠癌
  • 10篇突变
  • 10篇大肠
  • 10篇大肠癌
  • 9篇基因
  • 9篇P27基因
  • 8篇细胞
  • 7篇腺病
  • 7篇腺病毒
  • 5篇肿瘤
  • 5篇裸鼠
  • 5篇癌细胞
  • 5篇肠癌细胞
  • 4篇直肠
  • 4篇直肠肿瘤
  • 4篇突变型
  • 4篇结直肠
  • 4篇结直肠肿瘤
  • 4篇P27
  • 4篇肠肿瘤

机构

  • 14篇郧阳医学院附...
  • 8篇武汉大学
  • 5篇郧阳医学院
  • 1篇太和医院
  • 1篇湖北中医药大...
  • 1篇天门市第一人...

作者

  • 14篇徐少勇
  • 14篇陈珺
  • 11篇王家宁
  • 10篇黄永章
  • 7篇邓长生
  • 4篇杜勇
  • 4篇杨建业
  • 3篇熊玲
  • 2篇张丽
  • 1篇丁武华
  • 1篇曹勇
  • 1篇卢光新
  • 1篇黄云章
  • 1篇赵丽云
  • 1篇李玉红
  • 1篇武桂云

传媒

  • 2篇肿瘤防治研究
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  • 1篇现代生物医学...

年份

  • 1篇2016
  • 1篇2009
  • 1篇2008
  • 1篇2007
  • 4篇2006
  • 5篇2005
  • 2篇2004
  • 1篇2003
16 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
人突变p27基因对大肠癌细胞生物学行为的影响被引量:1
2007年
目的:观察人突变p27基因(p27mt)对人大肠癌细胞生长的影响,探讨p27mt基因在大肠癌基因治疗中的作用及可能机制。方法:以携带突变p27基因复制缺陷型腺病毒(Ad-p27mt)为载体,转染大肠癌细胞SW480;Western blotting方法检测p27mt蛋白的表达;细胞计数法检测p27mt对SW480细胞生长的抑制作用;用流式细胞仪检测细胞周期;用DNA片段分析法检测细胞凋亡。结果:Ad-p27mt转染SW480细胞后,p27在细胞中出现了蛋白高表达;77.96%的细胞阻滞于G0/G1期,而Ad-LacZ组及空白对照组分别为27.57%和25.29%;生长曲线显示Ad-p27mt对细胞生长有明显的抑制作用;DNA片段分析示p27mt基因可诱导细胞的凋亡。结论:p27mt对细胞周期有明显的阻滞作用,主要阻滞于G0/G1期;p27mt基因对细胞的生长抑制机制与诱导细胞凋亡和细胞周期的阻滞有关。
陈珺徐少勇邓长生王家宁黄云章
关键词:结直肠肿瘤细胞周期
人突变p27基因对大肠癌细胞SW480生长的影响
2005年
目的:观察人突变p27基因(p27mt)对人大肠癌细胞生长的影响,探讨p27mt基因在大肠癌基因治疗中的作用机制。方法:以携带突变p27基因复制缺陷型腺病毒(Ad-p27mt)为载体,转染大肠癌细胞SW480;用Westernblot方法检测p27mt蛋白的表达;细胞计数法检测p27mt对SW480细胞生长的抑制作用;用流式细胞仪检测细胞周期;用DNA片段分析法检测细胞凋亡。结果:通过免疫印迹分析Ad-p27mt转染SW480细胞后,p27在细胞中出现了蛋白高表达。PI染色流式细胞仪检测77.96%的细胞阻滞于G0/G1期,而Ad-LacZ组及空白对照组分别为27.57%和25.29%;生长曲线显示Ad-p27mt对细胞生长就有明显的抑制作用;DNA片段分析示p27mt基因可诱导细胞的凋亡。结论:p27mt对细胞周期有明显的阻滞作用,主要阻滞于G0/G1期;p27mt基因对细胞的生长抑制机制与诱导细胞凋亡和细胞周期的阻滞有关。
徐少勇陈珺邓长生王家宁黄永章
关键词:大肠癌凋亡
Influence of human mutant p27 gene on the biological behaviors of colon cancer cells被引量:1
2009年
Objective: To observe the influence of human mutant p27 gene (p27mt) on the growth and apoptosis of colon cancer cells so as to investigate the function mechanism of p27mt in gene therapy for colon cancer. Methods: Colon cancer cell line SW480 was infected with recombinant replication defective adenovirus Ad-p27mt, and expression of p27mt protein was detected by Western blot; the inhibition effect of p27mt on SW480 cells was detected with cytometry. Cell cycle was decided with flow cytometer, and DNA fragment analytic process identified the occurrence of apoptosis. Results: After transfected SW480 cells with Ad-p27mt, high expression of p27 protein was identified with immunoblotting assay. PI staining and flow cytometer assay showed 77.96% colon cancer cells was blocked in phase G0/G1, while in Ad-LacZ group and blank control group, 27.57% and 25.29% cells were blocked in the same phase, respectively. Growth curve showed Ad-p27mt has an obvious inhibition effect on the growth of SW480 cells, DNA fragment assay demonstrated that p27mt was able to induce the apoptosis of colon cancer cells. Conclusion: p27mt has an obvious blocking effect on colon cancer cell cycle, and most cells were blocked in phase G0/G1. This blockage is related with the growth inhibition and apoptosis induction effect of p27mt.
Jun ChenGuangxin LuBin WangWuhua Ding
关键词:APOPTOSIS
人突变p27基因对大肠癌细胞凋亡的影响被引量:1
2006年
目的探讨人突变p27基因对大肠癌细胞凋亡的诱导作用。方法构建重组腺病毒Ad-p27mt,转染大肠癌细胞SW480,用流式细胞仪、DNA片段分析法、TUNEL法观察Ad-p27mt对大肠癌细胞的凋亡的诱导作用。结果成功构建了Ad-p27mt,在感染复数≥50时,可达100%的转导效率。Ad-p27mt转染SW480。24h后流式细胞仪检测在G1期前出现了亚二倍体凋亡峰,细胞DNA提取电泳后出现了凋亡特征性梯带,TUNEL法检测凋亡指数实验组和对照组分别为(82.0±3.2)和(5.0±3.5),差异有显著性(P<0.01)。结论人突变p27基因能有效诱导大肠癌细胞的凋亡。
徐少勇陈珺熊玲王家宁黄永章
关键词:大肠癌细胞凋亡
突变型p27基因治疗裸鼠大肠癌移植瘤的研究被引量:2
2006年
目的:研究外源性突变型p27(p27 m t)基因对大肠癌的体内抑制作用。方法:应用细胞移植法把人大肠癌SW 480细胞接种于BALB/c裸鼠皮下,构建大肠癌裸鼠模型,将腺病毒介导的突变型p27(Ad-p27 m t)及Lac-Z注射到瘤体内,绘制肿瘤生长曲线,计算肿瘤生长抑制率,并进行细胞凋亡及MMP-9的相关检测。结果:Ad-p27 m t基因治疗组肿瘤生长明显受到抑制,MMP-9的表达也明显较低,与Lac-Z、空白对照组比较,有显著性差异(P<0.01)。结论:Ad-p27 m t基因对大肠癌裸鼠的体内肿瘤有明显的抑制作用,并能抑制MMP-9。
杜勇徐少勇杨建业张丽陈珺王家宁黄永章
关键词:腺病毒P27MT裸鼠MMP-9
突变型p27对大肠癌裸鼠模型肿瘤生长及转移的作用
2006年
目的研究外源性突变型p27(p27mt)基因对大肠癌体内抑制作用。方法以腺病毒为载体,采用细菌内同源重组方法制备Ad-p27mt,应用细胞移植法把人大肠癌SW480细胞接种于BALB/c裸鼠皮下,构建荷大肠癌裸鼠模型,将已成功构建的Ad-p27mt及Lac-Z采用瘤体内直接注射法注射到瘤体内,绘制肿瘤生长曲线,计算肿瘤生长抑制率,进行细胞凋亡及MMP-9检测。结果Ad-p27mt基因治疗组肿瘤生长明显受到抑制,有更强促凋亡作用,MMP-9表达明显降低,与Lac-Z、对照组比较,有显著性差异。结论Ad-p27mt基因对大肠癌肿瘤生长有明显抑制作用并能减少其转移。
杜勇徐少勇杨建业张丽陈珺王家宁黄永章
关键词:大肠癌腺病毒裸鼠模型
人突变p27重组腺病毒的构建及其在结肠癌细胞SW480中的表达
2003年
目的 :为了探讨腺病毒载体用于基因治疗的可行性及突变 p2 7的抗肿瘤特性 ,构建复制缺陷型重组hp2 7mt基因腺病毒。 方法 :hp2 7mt自载体pORF9-hp2 7mt中切出 ,经 2次亚克隆 ,插入到穿梭质粒 pShuttle -CMV中 ,形成转移质粒 pShuttle -CMV -hp2 7mt;然后再用PmeI线性化的 pShuttle -CMV -hp2 7mt转化含腺病毒骨架质粒 pAdeasy - 1的超感受态BJ5 183,使其在细菌内发生同源重组。重组质粒鉴定正确后经PacⅠ酶切 ,转入Ad2 93细胞 ,包装成重组腺病毒Ad -hp2 7mt。采用PCR方法对重组腺病毒进行鉴定 ,用紫外分光光度计进行滴度测定。用重组 p2 7mt的腺病毒Ad - p2 7mt感染大肠癌细胞SW 4 80 ,WesternBlot检测p2 7蛋白的表达。结果 :用含pShuttle -CMV -hp2 7mt转化含 pAdeasy - 1的超感受态BJ5 183后 ,可获得约 30 %的阳性重组质粒。PCR检测表明重组腺病毒DNA中含有目的基因。重组腺病毒滴度为 7.95× 10 15pfu/L。转染大肠癌细胞后 ,p2 7在SW4 80中获得了高表达 ,而未转染细胞和Ad -LacZ转染的细胞中仅有低表达。结论 :腺病毒作为一种基因转移载体 ,可有效介导 p2 7在肿瘤细胞中的表达 ,在肿瘤基因治疗方面具有很大的应用前景。
陈珺徐少勇邓长生王家宁黄永章
关键词:重组腺病毒结肠癌细胞SW480细胞周期素CDK
腺病毒介导的突变型p27对裸鼠大肠癌的抑制作用
2005年
目的:以腺病毒为载体,研究外源性突变型p27(p27mt)基因对大肠癌的体内抑制作用.方法:应用细胞移植法把人大肠癌SW480细胞接种于BALB/c裸鼠皮下,构建大肠癌裸鼠模型,将已成功构建的腺病毒介导的突变型p27(Adp27mt)及LacZ采用瘤体内直接注射法注射到瘤体内,与对照组比较,绘制肿瘤生长曲线,计算肿瘤生长抑制率,并进行细胞凋亡的相关检测.结果:Adp27mt基因治疗组肿瘤生长明显受到抑制,有明显的促凋亡作用,与LacZ、对照组比较,有显著性差异(P<0.01).结论:Adp27mt基因对大肠癌裸鼠模型的体内肿瘤有明显的抑制作用.
杜勇徐少勇陈珺杨建业王家宁黄永章
关键词:结直肠肿瘤
腺病毒介导的人突变p27基因转染对人大肠癌细胞系的作用被引量:2
2004年
目的 用人重组p2 7mt腺病毒感染大肠癌细胞株SW 480 ,研究p2 7mt对大肠癌细胞的抑制作用。方法 用重组腺病毒Ad -p2 7mt转染SW 480后 ,用Westernblot检测目的基因的表达 ;用流式细胞仪对转染细胞进行倍体分析 ,绘制生长曲线观察对细胞的生长抑制作用。结果 Ad -p2 7mt转染SW 480后 ,通过Westernblot分析发现p2 7在细胞中出现了高表达 ;PI染色流式细胞仪检测 ,77 9%的细胞阻滞于G0 /G1 期 ,而Ad -LacZ组及空白对照组分别为 2 5 5 7%和 2 5 2 9%(P <0 0 0 1) ;由生长曲线可以看出Ad -p2 7mt于 2 4h内对细胞就有明显的抑制作用 ( P<0 0 5 ) ,且持续时间长。结论 重组腺病毒能够有效转染p2 7mt基因进入SW480细胞内并获得了高表达 ;p2 7mt对细胞周期有明显的阻滞作用且对细胞的生长有明显的抑制作用。突变p2 7是一种细胞周期高效阻滞因子和高效生长抑制因子 ,为p2
陈珺徐少勇邓长生王家宁黄永章
关键词:腺病毒介导作用基因突变P27基因转染大肠癌细胞系
人突变p27基因转染大肠癌细胞凋亡的实验研究被引量:3
2005年
目的:探讨人突变p27基因对大肠癌细胞凋亡的诱导作用。方法:构建重组腺病毒Ad-p27mt,转染大肠癌细胞SW480,用流式细胞仪、DNA片段分析法、TUNEL法观察Ad-p27mt对大肠癌细胞凋亡的诱导作用。结果:成功构建了Ad-p27mt,在感染复数≥50时,可达100%的转导效率。Ad-p27mt转染SW48024h后流式细胞仪检测在G1期前出现了亚二倍体凋亡峰,细胞DNA提取电泳后出现了凋亡特征性梯带,TUNEL法检测凋亡指数实验组和对照组分别为82·6±3·2和5·0±3·5,差异显著(P<0·01)。结论:人突变p27基因能有效诱导大肠癌细胞的凋亡。
陈珺徐少勇熊玲王家宁黄永章
关键词:结直肠肿瘤细胞凋亡
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